丙环唑·嘧菌酯在玉米和土壤中的残留分析

李辉+刘磊+张玉婷+邵辉+李娜+李晶+宋淑荣+郭永泽

摘 要：经过对样品前处理过程的研究和优化，建立了丙环唑和嘧菌酯的气相色谱分析方法。样品经乙腈水溶液提取分配后，用弗罗里硅土小柱净化，采用气相色谱（μ-ECD）测定。方法中目标物在50～2 000 μg·L-1浓度范围内线性良好，相关系数分别为0.999 1和0.999 4。在5，50，200 μg·kg-13个添加浓度水平下，平均加标回收率在79.2%～110.9%之间，相对标准偏差不大于15%。该方法可灵敏、简便、快速地测定玉米中丙环唑和嘧菌酯的残留。

关键词：丙环唑；嘧菌酯；残留；玉米；土壤

中图分类号：S513 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.02.018

Analysis of Residues of Propiconazole and Azoxystrobin in Cron and Soil

LI Hui， LIU Lei， ZHANG Yu-ting， SHAO Hui， LI Na， LI Jing， SONG Shu-rong， GUO Yong-ze

（Tianjin Institution of Agricultural Quality Standards and Testing Technology，Tianjin 300381，China）

Abstract： Through studying and optimizing of sample preparation process， an gas chromatography method was developed for propiconazole and azoxystrobin in cron and soil. The sample were extracted with acetonitril and water， cleaned-up by an magnesiumsilicate solid phase，and analyzed by GC-ECD. The standard calibration curves for two pesticides showed high correlation coefficients over the range of 50～2 000 μg·L-1， with the correlation coefficients between 0.999 1 and 0.999 4.The average recoveries of two pesticides at the three levels of 5，50 and 200 μg·kg-1 were between 79.2% and 110.9%， with the relative standard deviation （RSD） less than 15%. So， this method could be further applied to detection of propiconazole and azoxystrobin in cron and soil.

Key words： propiconazole； azoxystrobin； residue； cron； soil

丙环唑属于三唑类杀菌剂，对叶斑病、小麦全蚀病、粒黑粉病等有较好的防治效果[1-2]，嘧菌酯是甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，对几乎所有真菌纲病害均有良好的活性，这两种农药均属于新型高效、广谱、内吸性杀菌剂[3]。

嘧菌酯与已有杀菌剂无交互抗性，因而常被用于制作混剂，18.7%丙环唑·嘧菌酯悬乳剂为最常见混剂之一。丙环唑和嘧菌酯在实际生产中均被广泛使用，因此， 开发农作物中丙环唑和嘧菌酯的残留分析方法，对农产品安全和合理用药具有重要意义。目前对农产品中丙环唑和嘧菌酯杀菌剂残留量的检测方法虽已有报道， 但针对其混剂的检测方法研究，以及在油脂和淀粉含量均较高的玉米等农作物中的检测方法研究国内未见报道，本试验应用气相色谱（μ-ECD）对18.7%丙环唑·嘧菌酯在玉米和土壤中的残留分析方法进行了研究，以期为此种农药在农产品中的安全评估工作提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂

安捷伦气相色谱仪（美国Agilent公司）；HZQ-C空气浴振荡器；旋转蒸发仪（Laborota 4000 efficient，德国Heidolph）；旋涡混合器（QL-901，江苏海门其林贝尔仪器制造有限公司）等。农药标准品纯度：丙环唑（96.5%）；嘧菌酯（99%），由德国Dr. Ehrenstorfer公司购买。

前处理使用的乙腈、正己烷、丙酮、无水硫酸钠、氯化钠均为分析纯。作为定容试剂，流动相使用的正己烷和丙酮为色谱纯。弗罗里硅土柱（1 000 mg，6 mL）。

分别称取标准品各5.00 mg放入50 mL棕色容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度，配制成浓度为100 μg·mL-1的标准储备液，于4 ℃条件下保存，备用。

1.2 样品前处理方法

1.2.1 提取 称样品20.0 g置于具塞锥形瓶中，加20 mL水和40 mL乙腈振荡30 min，用20 mL乙腈洗涤残渣，合并滤液至装有少量氯化钠的分液漏斗中，振荡3 min，静置10 min，取上层有机相过无水硫酸钠，用20 mL乙腈洗无水硫酸钠，减压浓缩至干，待净化。

1.2.2 净化 样品浓缩残留物用3 mL正己烷溶解待净化。弗罗里硅土净化柱依次用5 mL正己烷和5 mL丙酮+正己烷（体积比1+9）活化，然后将样品溶液上样，开始收集。再用10 mL丙酮+正己烷（体积比3+2）进行洗脱，收集洗脱液，40 ℃下减压浓缩近干，用2 mL丙酮+正己烷（体积比1+1）定容待测。

1.3 色谱条件

Agilent 7890A气相色谱仪。进样口：260 ℃，不分流进样；进样体积：2 μL；载气：高纯氮气（≥99.999%）。色谱柱（HP-5）：30 m×0.25 mm×0.25 μm。柱流速：1.5 mL·min-1；柱温：100 ℃（1 min）20 ℃·min-1 220 ℃（8 min）10 ℃·min-1 260 ℃（20 min）。检测器（μ-ECD）：300 ℃。

1.4 标准曲线制作

准确吸取丙环唑和嘧菌酯标准储备液，将其逐级稀释成质量浓度为0.05，0.1，0.5，1，2 mg·L-1混合标准工作溶液，在1.3的色谱条件下分别进样，重复3次，以进样浓度（mg·L-1）为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

1.5 方法回收率试验

根据玉米中丙环唑和嘧菌酯的MRL值以及方法的灵敏度，准确添加丙环唑和嘧菌酯的标准溶液于玉米空白样品中，添加浓度分别为0.005，0.05，0.2 mg·kg-1，每个质量分数设5个重复，按照上述方法进行测定。

2 结果与分析

2.1 色谱柱的确定

试验比较了DB-1 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）和 HP-5 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）两种色谱柱对药物分析的影响，结果表明使用非极性色谱柱DB-1时，药物出峰和分离均不大理想，而使用弱极性色谱柱HP-5时，目标药物出峰良好，且与组分达到较好的分离，而且杂质较少，因此试验最终确定采用HP-5色谱柱为分析柱。

2.2 提取条件的确定

分别以正己烷、丙酮、乙腈和乙腈水[4-7]对样品的提取效果做了分析比对，试验结果证明，采用正己烷为提取液时，目标物的回收率低；采用丙酮提取样品，虽然目标物的回收率提高，但样品中杂质较多；使用乙腈和乙腈水为提取试剂时，均可得到较高的回收率，但当样品含水量较低时，以乙腈提取样品中目标物的回收率不如以乙腈水对样品的提取效果好，因而试验最终以乙腈和水为共萃剂对样品进行提取。

2.3 净化条件选择

由于玉米中油脂和淀粉等杂质会干扰气相色谱对待测组分的分离和测定，因此试验选用石墨柱，C18和弗罗里硅土萃取柱[8-10]对样品做了净化处理对比。结果发现，当使用丙酮+正己烷（体积比3+2）作为洗脱液，采用弗罗里硅土固相萃取柱净化样品的效果最好，而且洗脱液的用量比较少。故本方法最终以弗罗里硅土为固相萃取柱，以丙酮+正己烷（体积比3+2）为洗脱液。

2.4 方法的线性、灵敏度、准确度和精密度

试验以各组分的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制了标准工作溶液的标准曲线，线性方程和相关系数见表1。结果表明，目标物在50～2 000 μg·L-1的浓度范围内，线性关系良好，相关系数分别为0.999 1和0.999 4。目标物在 5，50，200 μg·kg-1 3个添加浓度，按照上述提取、净化和测定方法，做5个平行测定样品，各农药的平均回收率在79.2% 和110.9% 之间，相对标准偏差（RSD）不大于15%（表2）。各农药的最低定量限可达到5 μg·kg-1，满足残留分析的要求。

3 结 论

采用乙腈水混合溶液提取，弗罗里硅土固相萃取柱净化，气相色谱法测定，建立了玉米和土壤中丙环唑和嘧菌酯的检测方法。目标物在各样品中3个添加浓度水平下的平均回收率在79.2%和110.9%之间，相对标准偏差不大于15%，定量限均可达到5 μg·kg-1。该方法操作简便，样品处理时间短，方法的灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留分析的要求。

参考文献：

[1] 赵琳， 张晓波， 任红波， 等. 气相色谱方法测定大豆中丙环唑残留[J]. 农药， 2012， 51（5）： 372-374.

[2] 刘燕菁，范玉，张旭光，等. 丙环唑在香蕉和土壤中的消解动态及残留安全性评价[J].植物保护，2010， 36（2） ： 109-111.

[3] 薄海波，孙洁. 气相色谱法检测西兰花和荷兰豆中嘧菌酯残留量[J].分析试验室，2008， 27（9） ： 31-33.

[4] 王冬兰，龚勇，李拥兵，等. 环丙唑醇在黄瓜和土壤中的残留[J].江苏农业学报，2011，27（6）： 1 371-1 375.

[5] 张国生，李永志，王丽颖，等. 28%百菌清·唑菌酯悬浮剂的研制[J]. 农药，2012（6）：433-435.

[6] 吴常敏. 嘧菌酯在水稻中的残留及消解动态[J].广州化工， 2013，41（8）：139-141.

[7] 卢蕾，刘雪，赵善仓，等. 4%春雷霉素可湿性粉剂液相色谱串联质谱法分析[J].农药， 2013，52（4）： 273-274，277.

[8] 张月，林靖凌，苏冰霞，等.丙环唑在香蕉及土壤中的残留量测定[J].现代农药，2012，11 （5）：44-47.

[9] 殷利丹，侯志广，陈超，等. 嘧菌酯在大豆中的残留及消解动态[J].农药学学报，2011，13（3）： 304-309.

[10] 杨振华，魏朝俊，贾临芳，等. 嘧菌酯在草莓与土壤中的残留动态研究[J].农业环境科学学报，2013，32（4）：697-700.

1.3 色谱条件

Agilent 7890A气相色谱仪。进样口：260 ℃，不分流进样；进样体积：2 μL；载气：高纯氮气（≥99.999%）。色谱柱（HP-5）：30 m×0.25 mm×0.25 μm。柱流速：1.5 mL·min-1；柱温：100 ℃（1 min）20 ℃·min-1 220 ℃（8 min）10 ℃·min-1 260 ℃（20 min）。检测器（μ-ECD）：300 ℃。

1.4 标准曲线制作

准确吸取丙环唑和嘧菌酯标准储备液，将其逐级稀释成质量浓度为0.05，0.1，0.5，1，2 mg·L-1混合标准工作溶液，在1.3的色谱条件下分别进样，重复3次，以进样浓度（mg·L-1）为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

1.5 方法回收率试验

根据玉米中丙环唑和嘧菌酯的MRL值以及方法的灵敏度，准确添加丙环唑和嘧菌酯的标准溶液于玉米空白样品中，添加浓度分别为0.005，0.05，0.2 mg·kg-1，每个质量分数设5个重复，按照上述方法进行测定。

2 结果与分析

2.1 色谱柱的确定

试验比较了DB-1 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）和 HP-5 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）两种色谱柱对药物分析的影响，结果表明使用非极性色谱柱DB-1时，药物出峰和分离均不大理想，而使用弱极性色谱柱HP-5时，目标药物出峰良好，且与组分达到较好的分离，而且杂质较少，因此试验最终确定采用HP-5色谱柱为分析柱。

2.2 提取条件的确定

分别以正己烷、丙酮、乙腈和乙腈水[4-7]对样品的提取效果做了分析比对，试验结果证明，采用正己烷为提取液时，目标物的回收率低；采用丙酮提取样品，虽然目标物的回收率提高，但样品中杂质较多；使用乙腈和乙腈水为提取试剂时，均可得到较高的回收率，但当样品含水量较低时，以乙腈提取样品中目标物的回收率不如以乙腈水对样品的提取效果好，因而试验最终以乙腈和水为共萃剂对样品进行提取。

2.3 净化条件选择

由于玉米中油脂和淀粉等杂质会干扰气相色谱对待测组分的分离和测定，因此试验选用石墨柱，C18和弗罗里硅土萃取柱[8-10]对样品做了净化处理对比。结果发现，当使用丙酮+正己烷（体积比3+2）作为洗脱液，采用弗罗里硅土固相萃取柱净化样品的效果最好，而且洗脱液的用量比较少。故本方法最终以弗罗里硅土为固相萃取柱，以丙酮+正己烷（体积比3+2）为洗脱液。

2.4 方法的线性、灵敏度、准确度和精密度

试验以各组分的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制了标准工作溶液的标准曲线，线性方程和相关系数见表1。结果表明，目标物在50～2 000 μg·L-1的浓度范围内，线性关系良好，相关系数分别为0.999 1和0.999 4。目标物在 5，50，200 μg·kg-1 3个添加浓度，按照上述提取、净化和测定方法，做5个平行测定样品，各农药的平均回收率在79.2% 和110.9% 之间，相对标准偏差（RSD）不大于15%（表2）。各农药的最低定量限可达到5 μg·kg-1，满足残留分析的要求。

3 结 论

采用乙腈水混合溶液提取，弗罗里硅土固相萃取柱净化，气相色谱法测定，建立了玉米和土壤中丙环唑和嘧菌酯的检测方法。目标物在各样品中3个添加浓度水平下的平均回收率在79.2%和110.9%之间，相对标准偏差不大于15%，定量限均可达到5 μg·kg-1。该方法操作简便，样品处理时间短，方法的灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留分析的要求。

参考文献：

[1] 赵琳， 张晓波， 任红波， 等. 气相色谱方法测定大豆中丙环唑残留[J]. 农药， 2012， 51（5）： 372-374.

[2] 刘燕菁，范玉，张旭光，等. 丙环唑在香蕉和土壤中的消解动态及残留安全性评价[J].植物保护，2010， 36（2） ： 109-111.

[3] 薄海波，孙洁. 气相色谱法检测西兰花和荷兰豆中嘧菌酯残留量[J].分析试验室，2008， 27（9） ： 31-33.

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[5] 张国生，李永志，王丽颖，等. 28%百菌清·唑菌酯悬浮剂的研制[J]. 农药，2012（6）：433-435.

[6] 吴常敏. 嘧菌酯在水稻中的残留及消解动态[J].广州化工， 2013，41（8）：139-141.

[7] 卢蕾，刘雪，赵善仓，等. 4%春雷霉素可湿性粉剂液相色谱串联质谱法分析[J].农药， 2013，52（4）： 273-274，277.

[8] 张月，林靖凌，苏冰霞，等.丙环唑在香蕉及土壤中的残留量测定[J].现代农药，2012，11 （5）：44-47.

[9] 殷利丹，侯志广，陈超，等. 嘧菌酯在大豆中的残留及消解动态[J].农药学学报，2011，13（3）： 304-309.

[10] 杨振华，魏朝俊，贾临芳，等. 嘧菌酯在草莓与土壤中的残留动态研究[J].农业环境科学学报，2013，32（4）：697-700.

1.3 色谱条件

Agilent 7890A气相色谱仪。进样口：260 ℃，不分流进样；进样体积：2 μL；载气：高纯氮气（≥99.999%）。色谱柱（HP-5）：30 m×0.25 mm×0.25 μm。柱流速：1.5 mL·min-1；柱温：100 ℃（1 min）20 ℃·min-1 220 ℃（8 min）10 ℃·min-1 260 ℃（20 min）。检测器（μ-ECD）：300 ℃。

1.4 标准曲线制作

准确吸取丙环唑和嘧菌酯标准储备液，将其逐级稀释成质量浓度为0.05，0.1，0.5，1，2 mg·L-1混合标准工作溶液，在1.3的色谱条件下分别进样，重复3次，以进样浓度（mg·L-1）为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

1.5 方法回收率试验

根据玉米中丙环唑和嘧菌酯的MRL值以及方法的灵敏度，准确添加丙环唑和嘧菌酯的标准溶液于玉米空白样品中，添加浓度分别为0.005，0.05，0.2 mg·kg-1，每个质量分数设5个重复，按照上述方法进行测定。

2 结果与分析

2.1 色谱柱的确定

试验比较了DB-1 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）和 HP-5 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）两种色谱柱对药物分析的影响，结果表明使用非极性色谱柱DB-1时，药物出峰和分离均不大理想，而使用弱极性色谱柱HP-5时，目标药物出峰良好，且与组分达到较好的分离，而且杂质较少，因此试验最终确定采用HP-5色谱柱为分析柱。

2.2 提取条件的确定

分别以正己烷、丙酮、乙腈和乙腈水[4-7]对样品的提取效果做了分析比对，试验结果证明，采用正己烷为提取液时，目标物的回收率低；采用丙酮提取样品，虽然目标物的回收率提高，但样品中杂质较多；使用乙腈和乙腈水为提取试剂时，均可得到较高的回收率，但当样品含水量较低时，以乙腈提取样品中目标物的回收率不如以乙腈水对样品的提取效果好，因而试验最终以乙腈和水为共萃剂对样品进行提取。

2.3 净化条件选择

由于玉米中油脂和淀粉等杂质会干扰气相色谱对待测组分的分离和测定，因此试验选用石墨柱，C18和弗罗里硅土萃取柱[8-10]对样品做了净化处理对比。结果发现，当使用丙酮+正己烷（体积比3+2）作为洗脱液，采用弗罗里硅土固相萃取柱净化样品的效果最好，而且洗脱液的用量比较少。故本方法最终以弗罗里硅土为固相萃取柱，以丙酮+正己烷（体积比3+2）为洗脱液。

2.4 方法的线性、灵敏度、准确度和精密度

试验以各组分的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制了标准工作溶液的标准曲线，线性方程和相关系数见表1。结果表明，目标物在50～2 000 μg·L-1的浓度范围内，线性关系良好，相关系数分别为0.999 1和0.999 4。目标物在 5，50，200 μg·kg-1 3个添加浓度，按照上述提取、净化和测定方法，做5个平行测定样品，各农药的平均回收率在79.2% 和110.9% 之间，相对标准偏差（RSD）不大于15%（表2）。各农药的最低定量限可达到5 μg·kg-1，满足残留分析的要求。

3 结 论

采用乙腈水混合溶液提取，弗罗里硅土固相萃取柱净化，气相色谱法测定，建立了玉米和土壤中丙环唑和嘧菌酯的检测方法。目标物在各样品中3个添加浓度水平下的平均回收率在79.2%和110.9%之间，相对标准偏差不大于15%，定量限均可达到5 μg·kg-1。该方法操作简便，样品处理时间短，方法的灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留分析的要求。

参考文献：

[1] 赵琳， 张晓波， 任红波， 等. 气相色谱方法测定大豆中丙环唑残留[J]. 农药， 2012， 51（5）： 372-374.

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[3] 薄海波，孙洁. 气相色谱法检测西兰花和荷兰豆中嘧菌酯残留量[J].分析试验室，2008， 27（9） ： 31-33.

[4] 王冬兰，龚勇，李拥兵，等. 环丙唑醇在黄瓜和土壤中的残留[J].江苏农业学报，2011，27（6）： 1 371-1 375.

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[7] 卢蕾，刘雪，赵善仓，等. 4%春雷霉素可湿性粉剂液相色谱串联质谱法分析[J].农药， 2013，52（4）： 273-274，277.

[8] 张月，林靖凌，苏冰霞，等.丙环唑在香蕉及土壤中的残留量测定[J].现代农药，2012，11 （5）：44-47.

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[10] 杨振华，魏朝俊，贾临芳，等. 嘧菌酯在草莓与土壤中的残留动态研究[J].农业环境科学学报，2013，32（4）：697-700.