瑞香狼毒地上部分化学成分的研究

路利芹，崔海燕，张立春，刘 权，秦 波*

1中国科学院兰州化学物理研究所中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室/甘肃省天然药物重点实验室，兰州 730000;2内蒙古通辽市气象局，通辽 028000

瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)为瑞香科狼毒属多年生草本植物，广泛分布于中国东北、华北、西南及西北等地区的草地及高山向阳处。近年来，瑞香狼毒在我国局部草原地区大面积蔓延，逐渐取代原有物种，形成优势种群，影响草地植物生态平衡。瑞香狼毒全株有毒，早春时节，牲畜抢青误食造成中毒致死，危害草地畜牧业生产［1］。瑞香狼毒根入药，能散结、逐水、止痛、杀虫，主治水气肿胀、淋巴结核、骨结核［2］。迄今为止，国内外对瑞香狼毒根的化学成分及其生物活性进行了大量研究，从中分离得到了二萜类、木脂素类、挥发油类、香豆素类和黄酮类化合物［3］，但对其地上部分化学成分的研究鲜有报道。为充分开发利用瑞香狼毒地上部位丰富的植物资源，我们对其化学成分进行了研究，从中分离得到了11 种化合物，结合理化性质和波谱分析，分别鉴定为:1-亚油酸-棕榈酸-甘油酯(1)亚麻酸(2)，亚油酸(3)，β-谷甾醇(4)，亚麻酸乙酯(5)，西瑞香素(6)，异新狼毒素A(7)，丙二酸单乙酯(8)，伞形花内酯(9)，新狼毒素B(10)和龙胆酸(11)。其中，化合物1、8 和11 为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

旋转蒸发仪SW-CJ-2G 购自瑞士Buchi 公司，柱层析用硅胶(200～300 目)由青岛海洋化工厂生产，凝胶Sephadex LH-20 为Pharmacia Fine Chemical 公司生产，薄层色谱用硅胶板GF254(0.20～0.25 mm)为青岛海洋化工厂出品。1H 和13C NMR 谱在氘代溶剂中用Varian Mercury-400BB 超导核磁共振仪测定，以TMS 为内标，单位为δ ppm。所用化学试剂均为分析纯。

瑞香狼毒地上部分实验样品2011 年9 月采自甘肃天祝，由甘肃农业大学的徐长林教授鉴定。

2 提取和分离

瑞香狼毒地上部分样品14 kg，阴干，粉碎，采用渗滤法以95%乙醇提取，提取液经减压浓缩后得棕黑色浸膏约1068 g。将此浸膏悬浮于蒸馏水，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液减压浓缩得到上述四个部分萃取物和水相提取物。取石油醚萃取物285 g，硅胶拌样后上硅胶柱，以石油醚∶丙酮(1∶0～0∶1)梯度洗脱，其中石油醚∶丙酮30∶1 洗脱部分经反复硅胶柱层析，得到化合物1(28 mg)、2(8 mg)和3(4 mg)，石油醚∶丙酮10∶1 洗脱部分经反复硅胶柱层析，得到化合物4(1020 mg);氯仿萃取物240 g，硅胶拌样后上硅胶柱，以氯仿∶甲醇(1∶0～0∶1)梯度洗脱，其中氯仿∶甲醇50∶1 洗脱部分经反复硅胶柱层析和Sephadex LH-20 纯化，得到化合物5(12 mg)和6(30 mg)，氯仿∶甲醇20∶1洗脱部分经反复硅胶柱层析和Sephadex LH-20 纯化，得到化合物7(17 mg)和8(4 mg);乙酸乙酯萃取物40 g，硅胶拌样后上硅胶，以氯仿∶甲醇(1∶0～0∶1)梯度洗脱，再经反复硅胶柱层析和Sephadex LH-20 纯化，得到化合物9(12 mg)、10(520 mg)和11(38 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 黄色油状物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.31 (4H，m，H-9'，H-10'，H-12'，H-13')，4.30 (2H，dd，J=4.3 Hz，11.9 Hz，H-1)，4.17 (2H，dd，J=6.2 Hz，11.9 Hz，H-3)，2.73 (1H，m，H-2)，2.33 (4H，m，H-2'，2'')，0.84 (6H，m，H-18'，16'');13C NMR (CD3Cl，100 MHz)δ:62.2 (t，C-1，3)，69.1 (d，C-2)，173.2 (s，C-1')，174.5 (s，C-1'')，130.2 (d，C-9')，130.1 (d，C-10')，128.1 (d，C-12')，127.9 (d，C-13)，33.9～22.5 (t，CH2)，14.01 (q，C-18'，16'')。以上波谱数据与文献［4］报道一致，故鉴定其为1-亚油酸-棕榈酸-甘油酯。

化合物2 无色油状物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.36 (6H，m，H-9，10，12，13，15，16)，2.79(4H，br s，H-11，14)，2.35 (2H，t，J=7.2 Hz，H-2)，1.95～2.07 (4H，m，H-8，17)，1.53～1.65 (2H，m，H-3)，1.25～1.45 (8H，m)，0.95 (3H，t，J=7.2 Hz，H-18)。以上波谱数据与文献［5］报道一致，故鉴定其为亚麻酸。

化合物3 无色油状物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.36 (4H，m，J=1.2 Hz，H，10，12，13)，2.77 (2H，m，J=6.4 Hz，H-11)，2.35 (2H，t，J=7.2 Hz，H-2)，2.04 (4H，m，J=7.2 Hz，H-8，14)，0.89 (3H，m，J=3.6 Hz，H-18)。以上波谱数据与文献［6］报道一致，故鉴定其为亚油酸。

化合物4 无色针状结晶，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.35 (1H，br d，J=4.8 Hz，H-6)，3.58(1H，m，H-3)，1.01 (3H，s，H-29)，0.91 (3H，d，J=8.0 Hz，H-21)，0.85 (3H，m，H-29)，0.84 (3H，m，H-26)，0.74(3H，m，H-27)，0.68(3H，s，H-18)。以上波谱数据与文献［7］报道一致，与标准品β-谷甾醇薄层对照Rf值一致，故鉴定为β-谷甾醇。

化合物5 淡黄色油状物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:4.12 (2H，dd，J=7.2 Hz，-OCH2-)，0.88 (3H，t，J=7.2 Hz，-CH3)，其他数据与亚麻酸一致，C 谱上δ=60.1 的峰也证明了有酯基的存在，故鉴定为亚麻酸乙酯。

化合物6 无色结晶，1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:7.89 (1H，s，H-4)，7.22 (1H，s，H-5)，6.87(1H，s，H-8)，6.39 (1H，d，J=9.6 Hz，H-3')，8.05(1H，d，J=9.2 Hz，H-4)，7.72 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5')，7.12 (1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6)，7.20(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，3.82 (3H，s，-OCH3);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:159.9 (C-2)，159.6(C-2')，156.9 (C-7')，154.9 (C-9')，150.4(C-7)，147.4 (C-9)，145.6 (C-3')，144.0 (C-6')，135.7(C-3)，130.9(C-4)，129.8 (C-5')，114.4(C-10)，113.9 (C-10')，113.4 (C-4')，110.1 (C-5)，109.3(C-6)，104.0 (C-8)，102.7 (C-8')，56.0 (-OCH3)。以上波谱数据与文献［8］报道一致，故鉴定为西瑞香素。

化合物7 浅黄色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:7.08 (4H，d，J=8.4 Hz，H-2'，2'''，6'，6''')，6.80 (4H，d，J=8.4 Hz，H-3'，3'''，5'，5''')，5.94 (2H，d，J=2.0 Hz，H-8，H-8'')，5.81 (2H，d，J=2.0 Hz，H-6，H-6'')，5.48(1H，s，H-2，H-2'')，3.33 (2H，s，H-3，3'');13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:197.0 (C-4，C-4'')，167.3(C-7，C-7'')，164.9 (C-5，C-5'')，163.9 (C-9，C-9'')，157.9 (C-4'，4''')，128.2 (2'，2'''，6'，6''')，128.0 (C-1'，1''')，116.0 (C-3'，3'''，5'，5''')，102.3 (C-10，C-10'')，96.4 (C-6，C-6'')，95.3 (C-8，C-8'')，81.3(C-2，C-2''')，497.3 (C-3，3'')。以上波谱数据与文献［9］报道一致，故鉴定为异新狼毒素A。

化合物8 白色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:1.24 (3H，t，J=7.2 Hz，-CH3)，3.37(2H，s，H-2)，4.15 (2H，q，J=7.2 Hz，OCH2)，10.21 (1H，br s，-COOH);13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:14.3 (C-5)，41.7 (C-2)，61.5 (C-4)，167.4 (C-3)，168.1 (C-1)。以上波谱数据与文献［10］报道一致，故鉴定为丙二酸单乙酯。

化合物9 无色结晶，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:6.16(1H，d，J=9.2 Hz，H-3)，6.76(1H，d，J=8.4 Hz，H-8)，6.85 (1H，d，J=8.4 Hz，H-6)，7.52(1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，7.87 (1H，d，J=9.6 Hz，H-4)，9.5 (1H，br s，-OH);13C NMR(CD3COCD3，100 MHz)δ:160.2 (C-2)，149.7 (C-7)，145.1 (C-8a)，143.7 (C-4)，132.2 (C-8)，118.9 (C-5)，112.5 (C-6)，112.1 (C-3)，111.2 (C-4a)。以上波谱数据与文献［11］报道一致，故鉴定为伞形花内酯。

化合物10 棕色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:3.16 (1H，br s，H-3)，3.36 (1H，dd，J=9.2，3.6 Hz，H-3'')，5.17 (1H，d，J=9.2 Hz，H-2)，5.41 (1H，d，J=4.8 Hz，H-2')，5.88 (2H，s，H-6'，H-8')，5.98 (1H，s，H-6)，6.10 (1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.77 (2H，J=8.8 Hz，H-13'，H-15')，6.89(2H，d，J=8.4 Hz，H-12'，16')，7.01 (2H，d，J=8.8 Hz，H-13，15)，7.24 (2H，d，J=7.6 Hz，H-12，16);13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:49.0 (C-3)，49.8 (C-3'')，80.8 (C-2)，82.8 (C-2'')，95.7 (C-8)，96.0 (C-8'')，96.8 (C-6)，97.1 (C-6'')，103.7(C-10)，104.8 (C-10'')，116.0 (C-3'，5')，116.4(C-3'''，5''')，128.1 (C-2'，6')，128.5 (C-1')，129.9(C-1''')，130.6 (C-2'''，6''')，158.3(C-4')，158.6(C-4''')，162.8 (C-9)，164.8 (C-5，9'')，165.3 (C-5'')，167.3 (C-7)，167.5 (C-7'')，196.0(C-4)，198.1 (C-4'')。以上波谱数据与文献［12］报道一致，故鉴定为新狼毒素B。

化合物11 无色针晶，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:6.85(1H，d，J=8.8 Hz，H-3)，7.09(1H，dd，J=8.8 Hz，3.2 Hz，H-4)，7.36 (1H，d，J=3.2 Hz，H-6)，10.49 (2H，brs，2，5-OH);13C NMR(CD3COCD3，100 MHz)δ:112.8 (C-3)，115.5 (C-6)，118.7 (C-1)，124.9 (C-4)，150.2 (C-5)，156.3(C-2)，172.3 (-COOH)。以上波谱数据与文献［13］报道一致，故鉴定为龙胆酸。

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