犬瘟热病毒截短P蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

/袁维峰（中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100193），贾红，于萍萍…//中国畜牧兽医.-2013，40（4）.-22～25

为制备针对犬瘟热病毒（canine distemper virus，CDV）P1蛋白的单克隆抗体（McAb），本研究利用重组犬瘟热病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠，并将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合，用CDV包被ELISA板，通过间接ELISA法筛选出两株稳定分泌抗CDV-P1的杂交瘤细胞株（E9E4C10、E9F8D9）。间接ELISA检测腹水效价均为1∶106，亚类鉴定结果均为IgG2b。Western blotting和间接免疫荧光（IFA）分析结果表明，两株单克隆抗体均能与重组P1蛋白和CDV发生反应；ELISA叠加试验增殖结果表明，两株单克隆抗体识别的抗原表位不同。本研究制备的特异性抗CDV-P1的单克隆抗体为建立CDV免疫学检测方法和P蛋白的功能研究奠定了基础。