无高致病性禽流感生物安全隔离区监测指南

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（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛266032）

无高致病性禽流感生物安全隔离区监测指南

刘俊辉，张衍海，范钦磊，郑增忍，蒋正军

（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛266032）

本文根据OIE《动物卫生法典》关于禽流感监测总则的有关内容，参考泰国生物安全隔离区建设经验，提出了无高致病性禽流感生物安全隔离区监测的主要方法和要求，以期对我国生物安全隔离区建设企业提供参考。

生物安全隔离区；监测；方法

生物安全隔离区在重大动物疫病防控和促进动物及动物产品国内外贸易中发挥重要作用，已被越来越多的国家认可[1-2]。随着生物安全隔离区建设理念的普及和农业部的推动，吉林、山东、河南和福建等多个省份兽医行政主管部门，采取了多种推进措施，在生物安全隔离区建设方面开展了一些积极的探索。同时，国内很多基础条件好、管理水平高，对生物安全隔离区的认识比较到位的企业，积极开展生物安全隔离区建设，取得了重大进展[3]。

“证明无疫靠监测”，开展有效监测是获得无疫生物安全隔离区国家评估的重要基础。本文在总结一些地方成功经验的基础上，就如何对高致病性禽流感生物安全隔离区开展监测，为开展生物安全隔离区建设的养禽企业提供借鉴和参考。

1 监测的基本要求

1.1 进行生物安全隔离区建设的企业应与当地兽医机构共同建立生物安全隔离区监测体系，制定监测计划和监测方案，共同承担禽流感监测工作。

1.2 生物安全隔离区和缓冲区的禽流感监测应综合运用临床监测、血清学监测和病原学监测方法。

1.3 样品采集、保存和运输应按照国家相关标准的规定进行。

1.4 承担禽流感监测、诊断的实验室可以是企业自控的实验室，也可以是指定的第三方实验室，但该实验室必须要由官方指定，并按照ISO/ IEC17025要求运行，而且该实验室要建立向兽医机构快速报告检测结果的程序。

1.5 样品检测方法应是国家发布的标准检测方法；没有标准检测方法时，可采用OIE规定的国际标准或诊断试剂提供的方法进行检测，但需到国家有关部门进行备案、获得认可。

1.6 开展生物安全隔离区建设的企业和所在地兽医机构应分别建立抽样、检测、报告和检测结果分析等记录。

1.7 禽类出栏实行检疫申报制度。养禽场应在商品禽出栏前3天向兽医机构报检，由官方兽医到养禽场采取适宜样品，送官方指定的实验室进行禽流感检测，结合临床健康状况出具检疫合格证明。

2 监测方案的制定

生物安全隔离区建设企业应制定完善的高致病性禽流感监测方案，监测方案应明确监测类型、监测对象和范围、监测方法、抽样原则及数量等，抽样数量应根据设计流行率和置信水平进行确定。

2.1 监测类型

生物安全隔离区禽流感监测主要包括两种类型：一是评估养禽场无禽流感状态所实施的最初的强化监测，二是维持养禽场无禽流感状态所实施的持续的日常监测。

2.2 监测对象和范围

生物安全隔离区包括种禽、商品禽在内的所有养殖单元均应纳入监测范围。生物安全隔离区设有缓冲区的，还应对缓冲区内的易感禽只进行禽流感监测。

2.3 监测方法

监测方法包括临床监测、血清学监测和病原学监测。

2.3.1 临床监测

发现禽类急性死亡，并且出现脚鳞皮下出血，或鸡冠出血或发绀、头部水肿，或肌肉和其他组织器官广泛性严重出血就可以怀疑为禽流感。任何人发现可疑病例，须遵照《动物防疫法》要求向当地兽医行政主管部门、动物卫生监督机构或动物疫病预防控制机构报告。

2.3.2 血清学监测

用间接酶联免疫吸附试验（间接ELISA）或血凝抑制试验（HI）检测血清抗体。如果出现间接ELISA阳性，或H5或H7的HI效价达到1∶16以上，须进行现场调查并采样进行病原学检测。如生物安全隔离区实施禽流感免疫，则不宜采用血清学监测。

2.3.3 病原学监测

用SPF鸡胚分离病原或用RT—PCR检测禽流感病原。如果发现病原，应将样品送指定实验室进一步检验。

2.4 抽样原则及数量

采用随机抽样的原则，简单随机抽样可采用抽签法或随机数表法。血清学监测采集禽血清，病原学监测每只禽需同时采集咽喉棉拭子和泄殖腔棉拭子。

确定抽样数量应综合考虑监测目的、预期患病率（设计流行率）、置信水平和检测方法敏感性等因素。

3 监测要求

3.1 生物安全隔离区禽流感监测

根据泰国生物安全隔离区建设经验[4]，生物安全隔离区禽流感监测分为两个阶段：一确认养禽场无禽流感状态所实施的最初的强化监测，二维持养禽场无禽流感状态所实施的持续日常监测。

3.1.1 评估养禽场无禽流感状态所实施的强化监测

在过去至少12个月内对生物安全隔离区的每个养禽场实施临床监测和实验室监测相结合的强化监测。

3.1.1.1 临床监测

养禽场管理人员每天应进行日常临床监视。当观察到任何疑似禽流感临床症状的禽只时，养禽场管理者应按规定向当地兽医机构进行报告。

当地兽医机构在接到禽流感疑似疫情报告后，应立即开展流行病学调查，并采集5～10只病死禽的适宜样品送实验室进行检测。

3.1.1.2 实验室监测

在每批禽只出栏前3～5天，由地方兽医机构在每个养禽场的每个禽舍随机抽取15个泄殖腔棉拭子样品和15个血清样品，送指定实验室进行禽流感检测。

这种监测可以在等于或高于20%患病率，以及在95%置信水平上检测到禽流感感染。只有所有临床监测和实验室主动监测结果均为禽流感阴性时，才可认可该生物安全隔离区为无禽流感生物安全隔离区。

3.1.2 维持养禽场无禽流感状态所实施的日常监测

当一个生物安全隔离区被认可为无禽流感状态后，地方兽医机构和企业应对养禽场进行持续的日常监测，以确信该生物安全隔离区保持无禽流感状态。日常监测包括：

3.1.2.1 临床监测

临床监测内容同3.1.1。

3.1.2.2 实验室监测

在禽只出栏前3～5天，由地方兽医机构在每个养禽场随机抽取5个禽舍，每个禽舍随机抽取20个泄殖腔棉拭子样品和20个血清样品，送指定实验室进行禽流感检测。每出栏两批禽只进行一次实验室监测。

只有临床监测和实验室主动监测结果均为禽流感阴性时，才可认为该生物安全隔离区保持无禽流感状态。

3.2 缓冲区禽流感监测

地方兽医机构应与养禽场管理者共同对缓冲区内的家禽及易感动物进行禽流感监测。

3.2.1 临床监测

临床监测内容同3.1.1。

3.2.2 实验室监测

当一个生物安全隔离区被认可为无禽流感状态时，地方兽医机构应每季度在缓冲区内随机抽取5个邻近的农户/小规模饲养场，每个农户/小规模饲养场随机抽取20只禽的泄殖腔棉拭子样品和血清样品（不足20只的全部抽取），送指定实验室进行禽流感检测。

3.3 监测结果的处理

出现疑似禽流感病例，或经实验室确认为禽流感病例时，应立即按《高致病性禽流感疫情处置技术规范》的规定，实施禽流感疫情处置。

4 说明

“证明无疫靠监测”。疫病监测是及时发现疫病风险，维持生物安全隔离区无疫状况的重要手段。生物安全隔离区及缓冲区监测工作是生物安全隔离区建设管理的一项重要内容。开展疫病监测，需要根据当地规定动物疫病的流行病学特点和生物安全隔离区及周边地区的风险因素，制定监测方案，明确监测范围、监测方法、监测频率、抽样原则、样本数量、检测方法等。本文讨论的生物安全隔离区无高致病性禽流感监测方法，是根据OIE《动物卫生法典》关于禽流感监测总则的有关要求提出的，该方法也征求了OIE有关专家的意见，但不作为国家评估的正式评估依据，仅对生物安全隔离区建设企业提供参考。

生物安全隔离区建设需要地方兽医部门和企业共同进行，但是如何开展生物安全隔离区及缓冲区的监测工作，尤其是如何确定监测的实施主体，目前还存在一定变数。有专家认为生物安全隔离区及缓冲区的监测工作应纳入到国家监测计划中，由政府统一组织对生物安全隔离区的监测工作，企业配合政府承担部分抽样工作。这样的好处是：一方面可以获得较为可靠的监测数据，便于准确把握生物安全隔离区内的动物疫病状况；另一方面是获取的监测数据属于官方数据，更容易获得外界认可，具有较强的说服力。另外一种观点认为，企业是生物安全隔离区建设的主体，也是最直接的受益者，所以企业应作为监测工作的实施主体。但是，不管如何，企业和兽医机构在生物安全隔离区建设管理中都发挥着重要作用，二者应相互配合，充分发挥各自优势，共同做好生物安全隔离区监测工作。

[1] 刘俊辉，张衍海，范钦磊，等.国内外生物安全隔离区建设概况[J].动物医学进展，2012，33（12）：178-182.

[2] 陈国胜. 关于生物安全隔离区建设试点的几点思考[J]. 中国动物检疫，2009，26（7）：1-3.

[3] 刘俊辉，张衍海，郑增忍，等.我国生物安全隔离区建设调查研究[J]. 中国动物检疫，2013，30（8）：14-18.

[4] 陈萍，黄保续. 家禽生产中的风险减轻方法——生物安全隔离区[J]. 中国动物检疫，2011，28（8）：4-9.

S851.33文献识别码：B

：1005-944X（2014）04-0056-03