冬虫夏草真伪鉴别方法研究进展△

李文佳，汪小东，艾中，钱正明*，向丽，张晓婧

(1. 广东东阳光药业有限公司，广东 东莞 523850； 2.中国中医科学院 中药研究所，北京 100700)

冬虫夏草真伪鉴别方法研究进展△

李文佳1，汪小东1，艾中1，钱正明1*，向丽2，张晓婧1

(1. 广东东阳光药业有限公司，广东 东莞 523850； 2.中国中医科学院 中药研究所，北京 100700)

冬虫夏草为传统的名贵中药材，近年来由于疯狂的采挖使得其资源急剧减少，濒临灭绝。目前市场上冬虫夏草价格堪比黄金，掺伪现象严重。本文从性状鉴别、显微鉴别、分子生物学鉴别和化学鉴别(理化鉴别、光谱鉴别、色谱鉴别和色谱-光谱联用鉴别)四个方面，对近10年来国内外冬虫夏草真伪鉴别方法研究文献进行了概括和总结，为市场上冬虫夏草的真伪鉴别提供科学参考依据。

冬虫夏草；性状鉴别；显微鉴别；分子生物学鉴别；化学鉴别

冬虫夏草为传统名贵中药，具有补肺益肾，止血化痰的功效，主治肾虚精亏、阳痿遗精、腰膝疼痛、久咳虚喘和劳嗽咳血[1]。现代药理研究结果显示，冬虫夏草具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗疲劳和降血糖等多种药理作用[2]。近年来，由于乱采滥挖，生态环境受损、菌源枯竭、冬虫夏草资源濒临灭绝。有学者调查研究表明，青海、西藏、四川和云南等省区大部分地区虫草的产量不到25年前的10%，甚至有些原来资源分布密集区近年没有发现虫草生长[3]。由于冬虫夏草确切的临床功效和资源的稀缺，导致冬虫夏草的价格不断上涨，堪比黄金[4]，从20世纪70年代的36元·kg-1，到现在的20万元·kg-1左右，最贵已达80万元·kg-1。由于现阶段冬虫夏草价格的昂贵和资源的稀缺，市场上虫草产品以次充好、以假乱真的现象大量存在，这对其临床疗效和用药安全造成了严重的影响[5]，因此冬虫夏草的真伪鉴别研究对保证其用药的安全性和有效性尤为重要。前期已有文献对冬虫夏草鉴别方法进行了概述[6-7]，本文在已有文献综述的基础上对国内外近10年来冬虫夏草真伪鉴别方法进行了系统的归纳总结，为广大消费者和科研工作者提供科学参考。根据中药鉴定学方法分类[8-9]，冬虫夏草鉴别方法可以分为性状鉴别、显微鉴别、分子生物学鉴别和化学鉴别，现分述如下。

1 性状鉴别

冬虫夏草性状鉴别一般是从样品的虫体色泽、眼睛颜色、环纹数以及“一宽三狭的结构”、腹足和子座着生位置、子座表面结构、长短、数量以及样品气味等特征进行观察比较。本文根据文献记载[5-6，10-19]，分析总结出了冬虫夏草性状鉴别的以下特征：①虫体的体表呈深黄色至黄棕色，头部呈红棕色。②虫体环纹20～30个，1～7腹节存在“一宽三窄”结构。足8对，中部4对较明显。③虫体质脆易断，断面黄白色，中间会存在一个黑色“V”字或黑色圆点。④子座表面深棕色至棕褐色，从寄主顶部正上方发出，呈细长圆柱形，长4～7cm，直径约0.3～0.8cm。⑤气微腥，味微苦。上部稍膨大，有细纵皱纹，质地柔软。以上冬虫夏草鉴别点能够对冬虫夏草和其常见的伪品(亚香棒虫草、蝉花、蛹虫草、分枝虫草、新疆虫草、凉山虫草、香棒虫草、珊瑚虫草)进行有效区分，但是很多时候对冬虫夏草了解不深入的大众消费者来说，有些高度相似的伪品在形态鉴别方面存在一定的困难，更有造假者将混淆品或者伪品进行加工，使它们和真品冬虫夏草形态更为接近，这无形中又增加了鉴别的难度。故一般需要结合其他分析鉴定技术进行鉴别。

2 显微鉴别

显微鉴别是中药鉴定领域很常用的技术，冬虫夏草的显微鉴别一般是利用光学或电子显微镜对样品体壁刚毛、绒毛、环纹、腹足、子囊壳等结构的显微/亚显微特征进行观察和比较。

冬虫夏草显微结构：冬虫夏草切片后显微观察，与其他伪虫草样品在体壁细胞的表面观、侧面观、体表刚毛、子囊壳着生位置等显微结构上也存在显著的差异，如冬虫夏草体壁细胞表面观颜色呈淡黄至黄色，侧面观可见丛生刺状毛；体表刚毛呈黄橙色，眼睫毛状，不规则排列，顶端钝圆，基部渐阔，有些上部略呈钩状；子囊壳半埋生，可以根据这些特征对冬虫夏草及其伪品进行鉴别[12，15-16，18]。

粉末显微结构：虫草纯粉片、虫草胶囊等粉末制品充斥市场，不法商贩为了获取巨大利润向虫草粉末制品中添加含淀粉的植物粉末、不明虫卵粉末、伪虫草粉末等，以此获高额利润。粉末制品肉眼无法鉴别，显微镜检能够辨认细小的冬虫夏草粉末和杂质[20]。冬虫夏草虫体体壁粉末碎片表面具小刺毛或圆形残痕，团块状物质色泽呈黄色；毛片碎片呈淡黄色点状，具环状残留毛窝；子囊壳呈卵圆形、半埋生的着生方式、边缘色褐、子囊直径10 μm左右等特征均可以作为冬虫夏草粉末的鉴别特征，如果未发现粉末碎片呈现上述特征或掺杂有其他特征碎片的，比如子囊全埋生或者毛片碎片无淡黄色点状等，则为伪品或掺伪品[21]。通过番红-固绿染色、斯氏碘染色等染色方法也可以有效地对冬虫夏草粉末进行鉴别，如果每片均能清晰观察到冬虫夏草的特有结构，且没有碘液染色下的明显蓝色斑点，没有观测到明显的植物组织，即可判断为纯冬虫夏草粉，如果有蓝色斑点则表明有淀粉类物质混入[22]。

超微结构：冬虫夏草分离出的杂菌菌丝和中国被毛孢的超微结构中都存在一个瓶形小梗的结构，但是前者瓶形小梗呈圆形或椭圆形，后者呈钻形；另外，瓶形小梗着生方式也不同，前者为单生或者顶生而后者为单生或轮生[23-24]。根据以上结构特点可以区分冬虫夏草中分离的杂菌和中国被毛孢菌丝体。Noriko Kinjo等[25]对冬虫夏草子囊超微结构进行了研究，干虫草标本子囊壳呈球形或花瓶形、密集排列，拟薄壁组织厚，子囊柱形、基部窄；鲜虫草标本子囊透明，4个子囊孢子平行排列在一个子囊，呈圆柱体，子囊孢子纤维状、柱形、光滑具膜，以上特征均可以作为冬虫夏草鉴别特征。

3 分子生物学鉴别

传统的性状和显微鉴定方法是建立在个体形态描述和微观观测的水平上，得到的结论往往不完善。随着分子生物学技术的进步，中药鉴定方法逐渐过渡到分子生物学鉴定[26]。中药分子鉴定一般是指依据核酸或蛋白质等大分子物质特征的鉴定，具有不受外界因素及生物体发育阶段的影响，具有准确性高，重现性好的优点。按照鉴定特征可分为核酸分子鉴定和蛋白质分子鉴定。DNA分子鉴定技术是目前应用较为广泛的中药生物分子鉴定方法。

3.1 DNA分子鉴定

中药DNA分子鉴定主要是基于核酸序列分析、分子杂交信号、PCR扩增指纹图谱的三大DNA鉴定技术体系[27]，基于DNA分子技术的鉴定在虫草中主要有以下几个方面。

3.1.1 基于ITS序列的条形码技术 DNA条形码技术是指利用基因组中一段公认的、相对较短的DNA片段作为物种标记而建立的一种生物鉴定方法，Paul Hebert等[28]将DNA条形码技术运用于物种鉴定。翁榕安等[29]对冬虫夏草和其混淆品北虫草在分子水平进行了鉴别，提取两者DNA后使用PCR法进行DNA ITS测序发现，两者在ITS序列上有显著的差异，其中ITS1差异性达到33.31%，ITS2差异性达到26.26%。钟欣等[30]采用通用引物ITS5/ITS4对冬虫夏草、亚香棒虫草和蛹虫草中提取的核糖体基因(rDNA)进行扩增后测序发现，亚香棒虫草与冬虫夏草在ITS5/ITS4区间序列的相似度仅为80.5～81%，蛹虫草与冬虫夏草在该区间序列的相似度为80.8～81.3%。Chen Yue-Qin等[31]对冬虫夏草和各种伪品进行核酸序列分析(包括ITS1，ITS2和5.8S rRNA编码区)发现各个不同产地的冬虫夏草在ITS序列区间具有很高的同源性，其序列之间的距离值低于0.02，然而蛹虫草、古尼虫草和拟青霉分生孢子与冬虫夏草有很大的差异，序列间的距离值为0.25～0.33。将ITS区序列作为DNA条形码比对区，能够很好地将冬虫夏草和其混伪品鉴别开来[32-33]。Xiang Li等[34]对冬虫夏草和罗伯茨虫草、下垂虫草、蝉花、蛹虫草、古尼虫草等多种伪虫草进行了DNA条形码分析，它们之间在ITS序列上存在很大的差异，也证实了DNA条形码技术能对冬虫夏草及其混淆品、近缘种能够进行快速、准确、经济地鉴别。此外，无性型和交配型冬虫夏草也可以通过ITS序列和5.8S rRNA序列上的差异进行比对鉴别[35-39]。

3.1.2 基于PCR分子鉴定技术 随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA，RAPD)技术是建立在PCR基础之上以任意核苷酸序列为引物(通常为10个碱基)，对所研究的基因组DNA进行扩增，然后通过琼脂糖凝胶电泳得到图谱。根据图谱的DNA多态性信息可以对中药进行鉴定和分类。Feng K等[40]利用RAPD技术对冬虫夏草的子座、菌核、菌丝体以及分离得到的真菌进行了比对，筛选到了一个特异性高、图谱特征稳定的随机引物，能够进行很好的区分分离得到的不同真菌。利用该段随机引物能够在冬虫夏草中扩增出一条长约350 bp的特异性条带，而新疆虫草、亚香棒虫草、北虫草都没有该条带，藉此可以对这些伪品进行很好的鉴定。RAPD技术可以快速并且提供大量的多态性数据，但是最大缺陷在于其再现性相对较差[41]。

PCR-SSCP(PCR-single-strand conformation polymor-phism)是Shuiji Hoshino[42]等在SSCP分析法基础上用敏感的银染法代替放射性同位素标记的改进技术，从而增强了安全性，实用性。利用该技术，可以对基于ITS2和18S rRNA PCR的产物将冬虫夏草和红座虫草、金龟子虫草、拟蛹虫草以及其他三种不知名近缘种等6种伪品进行了很好的鉴定区分[43]。另外利用该技术可以确定不同地域的冬虫夏草遗传的多样性和冬虫夏草子座、菌核、菌丝体的真菌群落组成的多样性，这些均为冬虫夏草的鉴别提供了参考[44-45]。该技术分析核酸片段大于300 bp灵敏度会下降，假阳性结果的不可避免，易受各种外界环境的影响，如游离引物、凝胶的浓度、厚度、温度，故利用此种技术进行鉴定，还需要继续研究和改良[46-47]。

3.1.3 环介导等温扩增法鉴定 环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)，是利用4种特异引物针对靶基因的6个区域，用一种链置换DNA聚合酶在等温条件完成核酸扩增的方法。李奎等[48]通过特异性靶序列的环介导等温扩增(LAMP)引物实现了冬虫夏草特异性扩增，而其他伪虫草无交叉反应，由此可以将冬虫夏草和其混伪品鉴别开来。该检测可以便捷、准确地对冬虫夏草进行检测，适于基层推广[49]。

3.2 蛋白质免疫鉴定

蛋白质免疫鉴定是利用中草药中抗原类物质，制备特异性抗体，采用免疫酶联吸附法、抗体酶免疫试验等免疫学测定方法进行中药鉴别。李杨[50]提取了冬虫夏草特异性蛋白，制备特异性多克隆抗体，采用金标法检测冬虫夏草抗原，利用该法对冬虫夏草做出了准确的鉴定，检测灵敏度达到20 ng·mL-1。

4 化学鉴别

4.1 一般理化鉴别

冬虫夏草的一般理化鉴别主要是根据其中所含化学成分能与某些化学试剂产生特殊颜色或者在紫外下观察发出荧光等进行鉴别，也有物理方法如沉淀法、升华法和结晶法。傅道珍[51]对冬虫夏草与新疆虫草、亚香棒虫草、地蚕与淀粉人工伪制品进行了详细的理化比较分析。冬虫夏草的酸性醇提物在紫外灯(365nm)下观察发淡蓝色荧光，亚香棒虫草发黄绿色荧光，地蚕发鲜紫荧光，新疆虫草和人工伪制品无荧光。冬虫夏草水浸提液在紫外灯(365 nm)下观察发黄蓝色荧光，亚香棒虫草发淡黄绿荧光，地蚕发青黄荧光，新疆虫草和人工伪制品无荧光。此外也比较了冬虫夏草与这些伪品在化学显色上的差异，冬虫夏草的甲醇提取物与锌粉沸水浴之后，正品不显红色，伪品显红色。

4.2 光谱鉴别

4.2.1 紫外光谱鉴定技术 紫外-可见光吸收光谱是一种常见的光谱分析方法，利用某种溶剂对中草药进行提取之后，采用紫外光谱测定待测物质的吸光度或者光谱图，根据吸收值或光谱图上的特征，可对中药材进行鉴定和质量评价。殷仁亭[52]的研究表明，冬虫夏草在200～400 nm波段有4个特征吸收峰，而亚香棒虫草只有2个，藉此可以鉴别。顾峥嵘等[53]利用紫外吸收光谱对虫草伪品进行了鉴别，发现正品虫草紫外吸收光谱在259 nm和309 nm波长处有最大吸收峰，伪品(染色金针菜套在虫体头部干燥伪制而成)在259 nm波长处有最大吸收峰，在309 nm波长处无最大吸收峰。高明等[16]利用紫外吸收光谱对冬虫夏草和湖北虫草在200～300 nm处的最大吸收峰进行了比较，结果显示冬虫夏草在区间内具两个吸收峰，而湖北虫草具三个吸收峰。

4.2.2 红外光谱鉴定技术 红外光谱按照波长范围的不同可分为近红外光谱(NIR)、中红外光谱(MIR)和远红外光谱(FIR)，尤以中红外光谱技术最为成熟、应用最为广泛，中药材鉴定即是其重要的应用领域[8]。该技术能够反映样品的整体化学信息，实现各种形态样品的快速无损检测，且不需要进行提取分离等前处理过程。王宜祥等[54]利用傅里叶变换红外光谱仪对冬虫夏草和古尼虫草进行了比较分析，实验结果表明，冬虫夏草与古尼虫草的子座上部外表皮红外光谱差异很大，冬虫夏草在777 cm-1、1 671 cm-1两处具吸收峰，古尼虫草在766 cm-1、1 675 cm-1两处具吸收峰，且在1 675 cm-1处得吸收峰较冬虫夏草在1 671 cm-1处吸收峰强度要弱得多；古尼虫草在1 025和1 087 cm-1处具两个尖峰，其在其两侧1 191和936 cm-1处具两个小的吸收峰，而冬虫夏草均无；另外古尼虫草在895、873 cm-1处具双峰，在714、1 316、1 388 cm-1处均具有吸收峰，而冬虫夏草仅在1 338 cm-1处具有一个弱的吸收峰。根据以上特征峰差异可以鉴别冬虫夏草和古尼虫草。宋文军等[55]比较了不同产地野生冬虫夏草和伪虫草在红外图谱上的差异，发现伪虫草中脂类、蛋白质和多糖类物质对应的峰值处较正品冬虫夏草弱，同时，伪品虫草在1 711 cm-1处有羧酸强吸收峰，而真品冬虫夏草的红外谱图中没有此吸收峰，从而导致其峰形和冬虫夏草不同。Yang Ping等[56]人对青海和西藏冬虫夏草和地蚕、甘露子两种伪虫草的红外光谱进行了比较，结果发现，两地产的冬虫夏草与伪虫草的一级红外图谱没有很大的差异，相似系数的比较没有明显的区别，只是伪虫草较真品吸收峰弱。但是两种伪虫草与青海、西藏产地正品冬虫夏草在二阶导数图谱上存在显著的差异，两种伪虫草在1 400～1 700 cm-1之间不存在显著的峰值，而正品虫草则存在数个显著的峰值，可以据此做出清晰的鉴别。

近红外光谱亦可用于虫草鉴定，但由于存在谱图影响因素多、背景复杂、谱峰重叠等限制，应用较少[8]。王钢力等[57]利用近红外光谱技术比较了青海和其他产地102批冬虫夏草样品，实验结果显示近红外光谱技术能够较好地显示出青海产药材和其他产地药材的差异，准确率高达95%以上，该技术可以作为鉴别冬虫夏草的技术模型。

4.2.3 核磁共振鉴定技术 中药的核磁共振指纹图谱是一种综合的、整体的鉴定手段，可以用于中药材真伪鉴别，具有高度的重现性和特征性。陈畅等[58]利用核磁共振技术，分别比较了冬虫夏草和蒙山九州虫草的醇提取物、水提取物的1HNMR图谱，蒙山九州虫草醇提取物核磁共振图谱在7.2 ppm处有峰而冬虫夏草没有；蒙山九州虫草水提取物核磁共振图谱在4.1～4.3 ppm处存在一个冬虫夏草没有的峰，而冬虫夏草在4.8-4.9 ppm处的峰蒙山九州虫草不存在，这些显著的差异能够对冬虫夏草和九州虫草进行有效地鉴别。

4.3 色谱鉴别

4.3.1 薄层色谱 薄层色谱鉴别适合于组成成分复杂的中草药鉴别，可以在一块层析板上进行多个样品的分析，它具有分离和鉴定的双重作用。傅道珍[51]等建立了一种薄层层析方法，发现冬虫夏草样本在层析板上出现了8个紫红色斑点，而新疆虫草样本则出现了6个、亚香棒虫草样本没有紫色斑点，据此可以对新疆虫草和亚香棒虫草进行鉴别。顾峥嵘[53]等报道冬虫夏草在薄层层析板上具有尿苷斑点，伪品(染色金针菜套在虫体头部干燥伪制而成)无尿苷斑点，可以据此进行鉴别。朱国强等[59]将冬虫夏草及其混伪品利用薄层层析方法进行了分析研究，发现冬虫夏草及其伪品的甲醇浸出液薄层层析结果有显著的差异，冬虫夏草和蛹虫草斑点数目为6个，其他伪品亚香棒虫草、凉山虫草、分枝虫草、蛹虫草、地蚕、人工虫草的斑点数1～5个不等；冬虫夏草最前方的斑点相对距离大于其他伪品，前两个斑点之间的距离较远，后5个斑点彼此间距大致相同，约为前两个斑点间距的1/2，蛹虫草6个斑点之间距离大致相同，由这些特征性差异可以对冬虫夏草和上述混伪品进行鉴别。

4.3.2 电泳色谱 电泳法鉴别中药的原理是利用中药中含有的带电荷的成分在同一电场作用下，各组分所带电荷的性质、电荷数量以及分子质量的不同导致泳动方向和速度的差异，可以结合谱带条数和染色的不同达到分离鉴定的目的。傅道珍等[51]报道了运用电泳色谱可以鉴别冬虫夏草与新疆虫草、亚香棒虫草和地蚕。结果显示，新疆虫草有2条一级谱带，冬虫夏草只有1条一级谱带；亚香棒虫草有4条二级谱带，冬虫夏草有3条二级谱带，新疆虫草和地蚕均只有1条二级谱带；冬虫夏草没有显示三级蛋白电泳图谱条带，而其他三种伪品均有1～2条三级谱带，由以上三级谱带数的差异可成功鉴别出冬虫夏草与几种伪品。吕鹏等[60]利用毛细管区带电泳(CZE)方法对冬虫夏草、蛹虫草、蒙山瘤座虫草进行了鉴别分析，冬虫夏草在2.56～4.29 min处有一个明显特征吸收峰，而蛹虫草和蒙山瘤座虫草在对应的时间均无明显特征吸收峰，藉此差异可以进行有效地鉴别。古今等[61]利用高效毛细管电泳法(HPCE)对冬虫夏草、亚香棒虫草和地蚕三者的Tris-甘氨酸和碱性、酸性蛋白所进行了检测，结果显示Tris-甘氨酸提取液中，冬虫夏草在7.048 min处具有特征吸收峰；碱性蛋白质提取液中，冬虫夏草在3.725和9.243 min处具特征吸收峰；酸性蛋白质提取液中，5.700和9.875 min处为冬虫夏草特有吸收峰。以上实验结果表明HPEC对冬虫夏草及其伪品能够进行准确的鉴定，该方法具分辨率高、速度快、需样品量少等优点。刘玉军等[62]利用毛细管电泳法测定了冬虫夏草和人工蛹虫草中核苷、碱基的含量，实验数据显示人工蛹虫草虫草素含量高达4 581.8 μg·g-1，冬虫夏草中不能测出，冬虫夏草中测出次黄嘌呤为118.5 μg·g-1，而人工蛹虫草中未测出该物质含量，因此根据人工蛹虫草与天然虫草核苷及碱基成分在含量上的差异，可以高效快速的鉴别蛹虫草与冬虫夏草。

4.3.3 高效液相色谱 高效液相色谱(HPLC)是一种高效快速的分离分析技术，在中药领域有非常广泛的应用，对中药有效成分建立指纹图谱进行分析是中药鉴别和质量控制常用方法。钟欣等[30]比对了冬虫夏草和亚香棒虫草的HPLC指纹图谱，两者图谱的相似度低于47.9%，对这两种虫草能起到鉴别作用。栾兰等[63]对野生冬虫夏草与虫草发酵菌丝体进行了HPLC指纹图谱比较研究，两者在高极性物质成分方面相似，在低极性成分方面有较大的差异，可以对冬虫夏草和菌丝体进行鉴别。赖宇红等[64]对冬虫夏草与分枝虫草、亚香棒虫草、凉山虫草和人工培植的虫草花进行了HPLC指纹图谱比较，采用相似度评价和轮廓图、雷达图、星座图等多变量二维平面比对分析，结果显示冬虫夏草与伪品在水溶性成分方面存在很大的差异，可以对这些伪品进行有效鉴别。国锦琳等[65]利用HPLC测定了10批凉山虫草的腺苷含量，发现凉山虫草比冬虫夏草中腺苷含量相比要低，可以作为凉山虫草和冬虫夏草的鉴别依据。周枝凤等[66]进行了蚕蛹虫草与冬虫夏草水溶液成分的HPLC指纹图谱中相应化学组分的归属分析，发现蚕蛹虫草和冬虫夏草有5个共有组分，分别有4个和6个相异组分，可以有效地对两者进行鉴别。Wang Shuang等[67]综合HPLC二极管阵列检测器(DAD)和蒸发光散射耦合法(ELSD)定性定量分析了野生虫草和人工虫草中的核苷和碱基、糖类、多球壳菌素等12种组分，分析结果显示含糖量的多寡也可以用作冬虫夏草鉴伪。

4.4 色谱光谱联用鉴定技术

色谱-光谱联用鉴定技术是将高效分离性能的色谱技术与能获取化学成分结构信息的光谱技术相结合形成的中药鉴定技术。常用的联用技术有高效液相-质谱法(HPLC-MS)、气相-质谱法(GC-MS)、毛细管电泳-质谱法(EC-MS)。钱正明等[68]采用高效液相-四级杆飞行时间质谱联用技术(HPLC-QTOF/MS)建立了冬虫夏草高效液相特征图谱，该方法分别从冬虫夏草中鉴定了9个化学成分，北虫草中鉴定了8个化学成分，其中虫草素、脱氧鸟苷可作为冬虫夏草和北虫草的鉴别成分。陈林琤等[69]利用液质联用技术对虫草子实体、中国被毛孢菌丝体、蛹虫草和蝙蝠蛾拟青霉中的麦角甾醇及其衍生物进行了分析，结果发现，虫草子座中含有2种HI-A衍生物，菌丝体中含有5种H1-A衍生物，而在虫草菌核、蛹虫草和拟青霉中没有检测到H1-A衍生物，可以根据麦角甾醇衍生物的差异对虫草菌丝体、蛹虫草和拟青霉进行区分。Guan Jia等[70]运用GC/MS技术对冬虫夏草、人工虫草和蛹虫草中的游离和聚合糖类物质进行了分析，结果显示，野生冬虫夏草中游离甘露醇的含量超过7.99%，而在人工虫草和蛹虫草中含量小于5.83%，同时结合聚类分析可以对野生和人工虫草进行区分。Yang等[71]运用CE/MS技术对冬虫夏草、人工虫草和蛹虫草中的12种核苷和碱基进行了分析，分析结果表明，虫草素为蛹虫草特有成分，冬虫夏草中次黄嘌呤和肌苷的含量比人工虫草和蛹虫草高很多。

5 小结

冬虫夏草作为珍稀名贵药材，市场上以假乱真的手段层出不穷，为冬虫夏草的质量控制带来了很大的挑战，为了规范市场秩序和保障用药安全，对其快速有效的鉴别非常重要。本文从形态、显微、化学及分子生物鉴别这4个方面，综述了近十年以来的国内外冬虫夏草鉴别方法的研究进展。但随着新技术的发展和分子生物学在中药领域研究的深入，必然会有更加高效、准确的方法应用于冬虫夏草的真伪鉴别，以保证其临床用药的准确性。

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AdvancesinIdentificationMethodofCordyceps

LI Wenjia1，WANG Xiaodong1，AI Zhong1，QIAN Zhengming1*，XIANG Li2，ZHANG Xiaojing1

(1.HECPharmCo.，Ltd，Guangdong，Dongguan523850，China)(2.InstituteofChineseMateriaMedica，ChinaAcademyofChineseMedicalSciences，Beijing100700，China)

Cordyceps，a valued Chinese medicine，in recent years because of the crazy digging makes its resources on the verge of extinction.The price of Cordyceps is becoming higher than gold.Due to the high price，counterfeits in the market are becoming more and more common.This article is a review of advances in identification method of Cordyceps and its counterfeits from view of morphology，microscopy，molecular biology and chemistry(including physicochemical property，spectrum analysis，chromatogram and spectrum-chromatogram identification).This review referred to recent ten years literatures and attempted to make a scientific reference for identification of Cordyceps in the market.

Cordyceps；morphology identification；microscopic identification；chemical identification；molecular biology identification

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.11.002

2014-10-05)

国家工信部中药材扶持项目：仿生态栽培冬虫夏草产业化生产基地，负责人：华献春

*

钱正明，博士，主要研究方向：中药和食品质量控制。E-mail：qianzhengming@hecpharm.com