肌炎抗体在多发性肌炎/皮肌炎的表达研究

细胞免疫和体液免疫在多发性肌炎(polymyositis, PM)和皮肌炎(dermatomyositis, DM)的发病机制中具有重要作用。大部分PM/DM患者体内存在自身抗体，主要分为肌炎特异性抗体(myositis specific autoantibodies，MSAs)和肌炎相关性抗体(myositis associated autoanti-bodies, MAAs)[1]。本文对36例PM/DM患者自身抗体分布特点进行分析。

1对象和方法

1.1观察对象收集于2009-10-2012-12在作者医院住院确诊的PM及DM患者36例，DM 20例,其中男5例、女15例，PM 16例，其中男6例、女10例，年龄21～63岁，平均年龄(42.56±11.27)岁。患者均符合2004年欧洲神经肌肉疾病中心和美国肌肉研究协作组特发性炎性肌病分类诊断标准[2]中PM及DM诊断标准，并排除：(1)非对称性肌无力，远端肌无力重于近端肌；(2)眼肌无力，孤立性构音障碍，颈伸肌无力重于颈屈肌；(3)中毒性肌病、活动性内分泌疾病(甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退，甲状旁腺功能亢进)及淀粉样变性；(4)神经肌肉疾病家族史。 健康对照25名，来自作者医院门诊的健康体检者，既往均无内分泌代谢性疾病、肌肉无力、皮疹及风湿免疫性疾病病史。

1.2方法所有患者均测定血清MSAs(包括抗Jo-1抗体、抗Mi-2抗体)、MAAs(包括抗Ku-86抗体、抗PM-Scl抗体)，ENA抗体谱，肌酶，红细胞沉降率(ESR)，C反应蛋白(CRP)，甲状腺功能及肿瘤标记物(包括AFP、CEA、CA125、CA199及fPSA)，行肌电图及神经电图检查及肱二头肌活检。肱二头肌活检采用开放式骨骼肌活检，液氮/异戊烷冷冻，5 μm厚冰冻连续切片，行苏木精-伊红(HE)、改良Gomori三原色(MGT)、还原型辅酶Ⅰ四唑氮还原酶(NADH-TR)、酸性磷酸酶、三磷酸腺苷酶(ATPase，pH 4.3，4.6，9.9)、过碘酸雪夫(PAS)、油红O染色等免疫组化染色。

2结果

2.1自身抗体检测(1)PM患者：抗Jo-1抗体、抗Mi-2抗体、抗Ku-86抗体及抗PM-Scl抗体阳性患者分别6例(37.5%)、0例、1例(6.25%)、1例(6.25%)。在6例抗Jo-1 抗体阳性患者中，临床表现为肌炎6例、间质性肺病5例、关节炎3例、吞咽困难3例、雷诺现象2例，发热2例；1例抗PM-Scl抗体阳性患者肌肉损害严重，血清CK水平高达11 245 U/L，肾功能损害，临床症状严重，治疗效果差。(2)DM 患者：抗Jo-1抗体、抗Mi-2抗体、抗Ku-86抗体及抗PM-Scl抗体阳性患者分别4例(20%)、7例(35%)、4例(20%)、0例。在4例抗Jo-1 抗体阳性患者中，临床表现为肌炎4例、间质性肺病3例、关节炎2例、吞咽困难1例、雷诺现象2例、发热1例；7例抗 Mi-2 抗体阳性患者中，临床表现为肌炎7例、Gotron 征5例、间质性肺病4例、发热3例、关节炎4例、吞咽困难2例。

2.2其他实验室检查结果所有患者血清CK水平不同程度升高，范围256～11 245 U/L。所有患者甲状腺功能及肿瘤标记物均正常。肌电图均呈肌源性损害，少数患者同时并存轻度神经源性损害。

2.3肱二头肌活检(1)PM患者：HE染色示肌纤维不同程度变性、坏死及再生，肌内膜、肌束膜不同程度炎性细胞浸润；部分肌纤维内可见边缘空泡，结缔组织正常或轻至中度增生。PAS染色：肌纤维糖原成分正常。油红O染色显示肌纤维脂肪成分正常。酸性磷酸酶染色显示变性、坏死肌纤维及炎性细胞的酸性磷酸酶活性升高。(2)DM患者：HE染色可见散在变性、坏死及再生肌纤维，不同程度炎性细胞浸润，主要分布在小血管周围，均可见肌纤维束周萎缩；结缔组织轻至中度增生。PAS染色：肌纤维糖原成分正常。油红O染色：肌纤维脂肪成分正常。酸性磷酸酶染色：变性、坏死肌纤维及炎性细胞的酸性磷酸酶活性升高。

3讨论PM及DM是特发性炎性肌病的两种类型，均呈亚急性或隐袭性起病，对称性四肢近端肌无力、肌痛、血清CK升高，肌电图呈肌源性损害，DM患者常有典型皮疹。PM肌肉病理特征为肌内膜炎性细胞浸润(T细胞)，炎性细胞侵入非坏死肌细胞，DM肌肉病理特征为束周肌纤维萎缩。DM是补体介导的微血管病， PM则是CD8+T细胞与主要组织相容性复合体-Ⅰ分子阳性肌纤维形成免疫突触造成肌纤维破坏。

MSAs包括三大类：抗氨基酰tRNA合成酶抗体、抗信号识别颗粒抗体和抗Mi-2抗体。抗Jo-1抗体占抗氨基酰tRNA合成酶抗体的80%，文献报道抗Jo-1抗体在PM/DM中阳性率为20%～30%，PM伴有间质性肺病的患者中阳性率高达50%～75%[1，3]。这是因为健康人肺组织上抗氨基酰-tRNA合成酶含量远远高于其他器官，使抗 Jo-1 抗体阳性患者肺组织成为免疫细胞攻击的靶器官[4]。本研究显示PM、DM 患者抗 Jo-1 抗体阳性率分别为37.5%及20%， 抗 Jo-1抗体阳性的PM、DM患者合并间质性肺病发生率分别为 83.3%及75%。抗Mi-2抗体的靶抗原参与调节基因转录，是DM的特异性抗体，与DM患者的皮疹相关。据文献报道[5]，DM患者该抗体阳性率明显高于PM，约为21%。本组病例中，有7例DM患者抗Mi-2抗体阳性，阳性率为35%，PM患者未检测到该抗体。Targoff等[6]发现抗氨基酰tRNA合成酶抗体阳性的DM/PM患者在临床上构成一种特征性症候群——“抗合成酶综合征”，包括肌炎、ILD、关节炎、雷诺现象、发热等临床症状。本组病例中抗Jo-1抗体阳性的患者均表现为抗合成酶综合征。

MAAs包括抗Ku抗体、抗PM-Scl 抗体、抗U1RNP 抗体、抗-Ro52抗体及抗-Ro60抗体等[1]。这些自身抗体与肌炎相关，但也常见于其他不合并肌炎的风湿性疾病。抗Ku抗体在DM、系统性硬化(systemic sclerosis, SSc)和PM/SSc重叠综合征的阳性率分别为2.2%、3.4%和60%[7]，对PM/SSc重叠综合征具有特异性。本组患者中，1例PM及4例DM患者检测到抗Ku-86抗体，阳性率分别为6.25%及20%。 抗PM-Scl抗体常见于PM/硬皮病重叠综合征患者中，阳性率为87%，对该综合征诊断敏感性较高，单纯PM阳性率仅为8%，抗PM-Scl抗体阳性患者易发生严重肌肉、肌腱及肾损害，本组仅1例PM患者阳性，该患者肌肉损害严重，血清CK水平高达11 245 U/L，合并肾功能损害，临床症状重。

综上所述，作为一种无创伤性检查，MSAs及MAAs测定对PM/DM的诊断及临床预后判断具有一定辅助价值。

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