瘦肉精/羧甲基-β-环糊精包合物的制备及其表征

■周 婕李颖慧 刘 倩 张振中

(1.郑州大学药学院，河南郑州450001；2.药物关键制备技术省部共建重点实验室，河南郑州450001)

盐酸克伦特罗（结构如图1所示）是β2-肾上腺素受体激动剂，又称“瘦肉精”。80年代初，意外发现盐酸克伦特罗在动物体内，可以增加瘦肉率、降低脂肪含量。所以，它曾被作为家畜促生长剂在国内广泛应用。与其它β2-肾上腺素受体激动剂相比，盐酸克伦特罗的生物利用度高，主要存在于动物肝脏、皮毛和视网膜中，食用了含有克伦特罗的猪肉可能出现肌肉震颤、心跳过速、心悸、头晕等症状[1-3]。在农业部176号公告中，明确规定盐酸克伦特罗为禁用药物，不得用于动物饲养过程。但在利益的驱动下，违法使用盐酸克伦特罗的现象仍时有发生[4-5]。

β-CD、HP-β-CD、CM-β-CD的包合物研究已见于报道[6-12]。Lin[13]等制备了β-CD/百里香酚包合物，并对其包合进行了表征研究。目前，还没有盐酸克伦特罗与各种CD之间相互作用的文献报道。

本文以盐酸克伦特罗和CM-β-CD用超声溶解，通过冷冻干燥的方法制成盐酸克伦特罗/CM-β-CD的包合物，采用显微熔点测定、差示扫描量热分析、紫外光谱、红外光谱及扫描电镜的方法对包合物进行表征，初步判定盐酸克伦特苯环包含于主体空腔中，验证了包合物的形成，为以后用毛细管电泳，以CM-β-CD为手性添加剂拆分盐酸克伦特罗提供了理论依据，为提高盐酸克伦特罗检测灵敏度提供了可能。

图1 盐酸克伦特罗

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

显微熔点测定仪（上海物理光学仪器厂）；DSC-60A差示扫描量热（日本岛津公司）；UV-2550紫外分光光度仪（日本岛津公司）；红外光谱仪（美国Thermo公司）；S-3700扫描电子显微镜（日本日立公司）；-80℃超低温冰箱（美国Thermo公司）。

盐酸克伦特罗（中国药品生物制品检定所）；CM-β-CD（湖北远成药业有限公司）。

1.2 实验方法

取盐酸克伦特罗1.56 mg(10.0 mmol)和CM-β-CD 7.7 mg(10.0 mmol)，加入0.5 ml超纯水，超声30 min，冷冻干燥，制成冻干粉即得盐酸克伦特罗包合物。

2 结果与讨论

2.1 显微熔点测定

盐酸克伦特罗：熔点(mp)160～162 ℃；CM-β-CD：mp＞300 ℃；物理混合(盐酸克伦特罗∶CM-β-CD 1∶1，mol/mol)：154～157 ℃部分熔化，其余固体mp＞300 ℃；包合物：mp＞300℃。

在物理混合物中，盐酸克伦特罗于154～157℃熔化，说明仍以晶体形式存在，但由于盐酸克伦特罗与CM-β-CD之间存在较弱的相互作用，熔点稍有下降。在包合物中，盐酸克伦特罗可能通过疏水作用以分子形式进入CM-β-CD空腔，失去了晶体的特征。

2.2 差示扫描量热分析

用差示扫描量热计对“2.1”节中4种样品进行扫描，扫描速度为10℃/min。结果表明，盐酸克伦特罗单体在161℃有强吸热峰（熔点峰）；CM-β-CD在300℃有宽吸收峰（熔点峰）。物理混合在161℃有强吸热峰（盐酸克伦特罗熔点峰），在300℃有宽的吸收峰（CM-β-CD熔点峰）；包合物在161℃无吸热峰。与显微熔点测定的结果相符。

2.3 紫外光谱

取适量盐酸克伦特罗和包合物分别溶于水，然后进行紫外全波长扫描，结果见图2。从图2可以看出，盐酸克伦特罗单体紫外吸收在242 nm和296 nm，包合物紫外吸收在245 nm和299 nm，盐酸克伦特罗在形成包合物后吸收峰位置发生红移现象，且强度明显增大，而相同波长范围内CM-β-CD无吸收峰。说明盐酸克伦特罗已被CM-β-CD包合形成包合物。

图2 紫外吸收

2.4 红外光谱

测定“2.1”节中4种样品红外光谱，结果见图3。在图3中可以看出物理混合既有盐酸克伦特罗的吸收特征，又有CM-β-CD的吸收特征，而包合物只有CM-β-CD的吸收特征，盐酸克伦特罗的苯环的特征吸收峰已经消失，说明盐酸克伦特罗苯环部分通过疏水作用以分子形式进入CM-β-CD空腔，失去了盐酸克伦特罗的红外特征。

图3 红外图谱

2.5 扫描电镜

测定“2.1”节中4种样品扫描电子显微镜图片，结果见图4。从图4可以看出物理混合既有盐酸克伦特罗的形态，又有CM-β-CD的晶型，而包合物中盐酸克伦特罗被包裹在CM-β-CD的内部，几乎看不到药物的形态。说明盐酸克伦特罗通过疏水作用以分子形式进入CM-β-CD空腔，失去了盐酸克伦特罗的形态。

图4 扫描电镜

3 结论

本文通过冷冻干燥的方法制备了盐酸克伦特罗/CM-β-CD包合物，采用显微熔点测定、差示扫描量热分析、紫外光谱、红外光谱及扫描电镜的方法对包合物进行表征，结果表明盐酸克伦特罗通过分子形式进入CM-β-CD内部，为以后使用手性添加剂法拆分盐酸克伦特罗，提供了理论基础，为提高盐酸克伦特罗检测灵敏度提供了可能。