日粮赖氨酸水平对12～18周龄雌性临武鸭血液生化指标的影响

2014-01-20戴求仲蒋桂韬王向荣

家畜生态学报 2014年10期

林谦，戴求仲＊，张旭，蒋桂韬，王向荣，李闯，黄璇

（1.湖南农业大学动物科学技术学院，湖南长沙410128；2.湖南省畜牧兽医研究所动物营养与饲养技术研究室，湖南长沙410131）

临武鸭俗称“钩嘴鸭”，是中国八大名鸭之一，属肉蛋兼优型品种，亦是中国地理标志性产品，因其产蛋多、适应性强、饲料报酬高、肉质细嫩、皮下脂肪沉积良好、味道鲜美而深受生产者和消费者喜爱［1－2］。而赖氨酸作为家禽的第二限制性氨基酸，主要参与机体蛋白质合成，同时与动物生长、发育密切相关，可见准确评估赖氨酸的需要量对家禽营养的研究与生产实践至关重要。但是目前，还未见有关于后备期雌性临武鸭赖氨酸需要量的研究报道。

本试验选用12～18周龄（后备期）雌性临武鸭为试验动物，饲喂不同赖氨酸水平日粮，研究其对试鸭血液生化和激素指标的影响，同时从血液营养代谢指标和激素方面探讨该阶段雌性临武鸭赖氨酸需要量的适宜水平，为临武鸭饲养及营养标准的制订提供一定的参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物与设计

选取健康、体重接近的84日龄雌性临武鸭210羽，随机分为5个处理（即0.55%、0.65%、0.75%、0.85%、0.95%五个赖氨酸水平处理），每个处理设6个重复，每个重复设7只鸭来进行试验，试验全期试鸭为84～126日龄。

1.2 试验饲粮及营养水平

试验饲粮参照NRC（1994）及本研究室对雌性临武鸭粗蛋白质需要量的研究结果，采用单因子试验设计，设5 个赖氨酸水平，即0.55%（Ⅰ组）、0.65%（Ⅱ组）、0.75%（Ⅲ组）、0.85%（Ⅳ组）、0.95%（Ⅴ组）。饲粮以小麦、玉米、豆粕、次粉为主要原料配合而成，试验饲粮组成及营养水平见表1。试验鸭采用颗粒料饲喂，饲粮由湖南省畜牧兽医研究所饲料厂生产。

1.3 饲养管理

试验在湖南省畜牧兽医研究所试验鸭场进行，采用网上平养。试鸭自由饮水和采食，24h 光照；舍内自然通风，保持正常温度，相对湿度60%±5%。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 血清生化指标在饲养试验结束时，每重复随机选取体重相近的试验鸭1只，空腹12h后，翼静脉采血8mL，注入10mL 离心管倾斜放置，让血液自然凝固。在血凝0.5h 后以3000r／min 离心15min分离血清，收集离心管上层血清分装，于－20 ℃下保存，以测定相关生理生化指标。

表1 试验（12～18周龄）日粮组成和营养水平（风干基础）Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets（air－dry basis，12～18w）

血清中葡萄糖（GLU）采用葡萄糖氧化酶法测定，甘油三酯（TG）采用甘油氧化酶法测定，总胆固醇（CHO）采用胆固醇氧化酶法测定，尿酸（UA）采用酶联比色法测定，尿素氮（BUN）采用尿素酶法测定，肌酐（Cr）采用苦味酸法测定，碱性磷酸酶（ALP）采用AMP 缓冲液法测定，谷丙转氨酶（ALT）采用乳酸脱氢酶法测定，谷草转氨酶（AST）采用苹果酸脱氢酶法测定，总蛋白（TP）采用双缩脲法测定、白蛋白（ALB）采用溴甲酚绿法测定，尿酸测试试剂盒由浙江东欧医疗诊断产品公司生产，其余指标都使用由桂林优利特医疗电子有限公司产的相应试剂盒测定，所有检测均在URIT－8000全自动生化分析仪（桂林优利特医疗电子有限公司生产）上进行；而球蛋白（GLO）含量通过计算获得，即GLO含量＝TP含量－ ALB含量。

1.4.2 血清激素指标利用步骤1.4.1获得的血清样本采用放射性同位素免疫法（RIΑ），使用由北京北方生物技术研究所生产的相应试剂盒在GC－300型γ－放免仪（安徽中科中佳科学仪器有限公司生产）上测定生长激素（GH）、胰岛素（Ins）、胰高血糖素（GIU）、三碘甲腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）和皮质醇（Cor）含量，并计算T3／T4。

1.5 数据处理与统计分析

试验数据用Excel 2003软件进行初步处理后，采用SPSS 13.0 统计软件进行单因素方差分析（one－way ANOVA），若组间差异显著，则采用Duncan氏法进行多重比较，显著水平为P＜0.05。试验结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 日粮不同赖氨酸水平对12～18周龄雌性临武鸭血液生化指标的影响

由表2可知，血清中血糖、总胆固醇、尿酸、尿素氮、肌酐和谷丙转氨酶分别以0.85%、0.95%、0.95%、0.65%、0.55%和0.55%Lys组最高，但均无显著差异（P＞0.05）。日粮赖氨酸水平显著或极显著影响试鸭血清甘油三酯（P＜0.01）、碱性磷酸酶（P＜0.01）和谷草／谷丙转氨酶水平（P＜0.05），其中，甘油三酯以0.95%Lys 组最高，为3.55 mmol／L，分别比0.55%、0.65%、0.75%和0.85%Lys组高出65.12%（P＜0.01）、65.89%（P＜0.01）、47.92%（P＜0.01）和40.87%（P＜0.01），而0.55%、0.65%、0.75%和0.85%Lys组间血清甘油三酯含量差异不显著（P＞0.05）；碱性磷酸酶以0.75%Lys 组最高，为396.00IU／L，分别比0.55%、0.65%、0.85% 和0.95%Lys 组高出89.02%（P＜0.01）、154.66%（P＜0.01）、185.92%（P＜0.01）和410.97%（P＜0.01），另外，0.55%Lys组血清碱性磷酸酶含量显著高于0.95%Lys组（P＜0.05），而0.55%、0.65%和0.85%Lys组间血清碱性磷酸酶含量差异不显著（P＞0.05）；谷草／谷丙转氨酶以0.85%Lys组最高，为1.49，比0.65%Lys组高出50.51%（P＜0.05）。谷草转氨酶以0.95%Lys组最高，为51.75IU／L，比0.55%Lys组高出26.22%（P＜0.05）。总蛋白以0.55%Lys组最高，为60.00g／L，比0.75%Lys组高出17.65%（P＜0.05）。白蛋白以0.95%Lys组最高，为24.33 g／L，比0.75%Lys组高出23.69%（P＜0.05）。球蛋白以0.55%Lys组最高，为39.00g／L，分别比0.85%和0.95%Lys组高出30.00%（P＜0.05）和30.74%（P＜0.05）。白球比以0.95%Lys组最高，为0.87，比0.55%Lys组高出58.18%（P＜0.05）。

表2 不同赖氨酸水平对12～18周龄周龄雌性临武鸭生长性能的影响Table 2 Effects of different Lys levels in diets on serum biochemical indices of 12～18wLinwu duck

2.2 雌性临武鸭血液激素指标的影响

不同赖氨酸水平对12～18周龄雌性临武鸭血清激素指标的影响见表3。由表3可知，日粮赖氨酸水平对血清生长激素、胰岛素、胰高血糖素、皮质醇、T3、T4和T3／T4影响均不显著（P＞0.05）。其中，血清中生长激素、皮质醇、T3、T4和T3／T4分别以0.75%、0.75%、0.75%、0.95%和0.75%Lys组最高，但均无显著差异（P＞0.05）；胰岛素以0.95%Lys组最高，为4.82μIU／mL，比0.55%Lys组高出100.83%（P＜0.05）；胰高血糖素以0.55%Lys组最高，为208.53 pg／mL，比0.65%Lys 组高出142.08%（P＜0.05）。

表3 不同赖氨酸水平对12～18周龄雌性临武鸭血清激素指标的影响Table 3 Effect of different Lys levels diets on serum hormonal indices of 12～18wLinwu duck

3 讨论

3.1 日粮赖氨酸水平对12～18周龄雌性临武鸭血液生化指标的影响

方勇军［3］选用3日龄樱桃谷肉鸭108羽，分别饲喂6 组不同精氨酸水平（0.620%、0.745%、0.850%、0.995%、1.120%和1.620%）日粮，结果发现，各试验组肉鸭血清中甘油三酯含量较之对照组均有不同程度的下降，其中日粮精氨酸水平为1.120%的试验Ⅴ组达到显著水平；张括等［4］对玉米－豆粕型日粮中不同色氨酸水平对后备蛋鸭营养代谢的影响进行研究，结果表明，适宜水平的色氨酸能显著提高血清中的白蛋白、总蛋白和碱性磷酸酶的水平，显著降低血清尿素氮、葡萄糖、胆固醇和和甘油三酯的水平，但对血清乳酸脱氢酶无显著影响，并以试鸭血清营养代谢指标为评价标准，认为后备蛋鸭色氨酸需要量为0.256%～0.270%。不过目前对后备期蛋鸭赖氨酸需要量的研究报道十分少见，更未见有对日粮不同赖氨酸水平对后备临武鸭血液生化指标的影响研究报道。而本研究结果显示日粮赖氨酸水平显著或极显著影响试鸭血清甘油三酯、碱性磷酸酶和谷草转氨酶／谷丙转氨酶水平（P＜0.05或P＜0.01），但对血糖、总胆固醇、尿酸、尿素氮、肌酐和谷丙转氨酶影响均不显著（P＞0.05）。王安等［5］报道，碱性磷酸酶在动物体内蛋白质合成方面起到重要的作用，其与机体蛋白质合成呈正相关。本试验中，0.55%Lys组和0.75%Lys组血清中ALP含量最高，说明0.55%赖氨酸水平日粮即可满足12～18周龄雌性临武鸭生长发育需要，而日粮赖氨酸水平在0.75%时最利于12～18周龄雌性临武鸭生长发育需要。

张婷等［6］选用1日龄金定蛋雏鸭180羽，分别饲喂5组不同赖氨酸水平（1.03%、1.10%、1.17%、1.24%和1.31%）日粮，结果发现，血清中的总蛋白、白蛋白和球蛋白含量均以Ⅲ组最高，且前二者含量显著高于对照组。血清总蛋白及白蛋白含量可反映机体蛋白质代谢状况，白球比则是衡量机体免疫水平的一项指标，白球比下降说明机体特异性免疫应答水平在提升［7］，本试验中，血清中总蛋白和球蛋白二者与日粮赖氨酸水平呈负相关，白蛋白和白球比与日粮赖氨酸水平则呈现出正相关，同时宋凯等［8］研究表明，谷丙转氨酶和谷草转氨酶在非必需氨基酸的合成和机体蛋白质代谢过程中扮演重要角色，同时与肝脏细胞的完整性也密切相关，本试验条件下，日粮赖氨酸水平对AST 影响趋于显著，对AST／ALT 影响显著，表明高赖氨酸水平日粮可造成后备期临武鸭肝细胞受损，综合说明日粮0.55%赖氨酸水平即可满足12～18周龄雌性临武鸭生长、免疫和机体发育需要。

血清甘油三酯能反映机体脂类代谢水平，其含量过高对机体健康不利［9］，本试验中，试鸭血清中甘油三酯含量随着日粮赖氨酸水平的增加而增加，且0.95%Lys组甘油三酯含量极显著高于其他各组（P＜0.01），而其他各组间血清甘油三酯含量差异不显著（P＞0.05），说明在本试验条件下日粮0.95%赖氨酸水平不利于12～18周龄雌性临武鸭机体健康。

3.2 日粮赖氨酸水平对12～18周龄雌性临武鸭血液激素指标的影响

陈志敏等［10］研究表明，不同赖氨酸添加水平（0.65%、0.80%、0.95%、1.10%、1.25%和1.40%）对0～3周龄雄性肉仔鸡血液中T3含量影响显著，且二者呈正相关，而血液中T4、生长激素和胰岛素含量没发现在各组之间存在显著差异。张括等［11］研究12～17周龄金定蛋鸭适宜色氨酸需要量时发现0.252%～0.269%的色氨酸能显著提高试鸭血清白细胞介素（IL－2）和免疫球蛋白G 含量（P＜0.05），显著降低血清皮质醇（Cor）和免疫球蛋白M 的含量（P＜0.05），0.242%～0.260%的色氨酸对试鸭促卵泡激素和雌二醇分泌影响不显著（P＞0.05），对血清中促黄体生成素和孕酮影响显著（P＜0.05）。本试验结果显示，随着日粮赖氨酸水平的增加，生长激素、T3和T4均呈先增后降趋势，这与陈伟等［12］研究结果相似，且T3和T4间呈负相关趋势，其原因可能是试鸭采食高赖氨酸水平日粮限制了脑垂体前叶嗜酸性细胞对激素的分泌，而生长激素又是一种由嗜酸性细胞分泌的激素，因此限制了生长激素的分泌；甲状腺激素方面，可能是由于T3的降低，导致T4向T3转化量下降，使T4的浓度增加［13］。

另有报道生长激素直接影响性腺发育，其在卵巢和子宫上有受体，可能直接或协同参与畜禽生殖机能调控［14－15］，皮质醇参与动物机体应激活动，能引起蛋白质、脂肪和糖原等的分解代谢，还能引发免疫抑制［16］，本试验中各组生长激素、皮质醇含量无显著差异（P＞0.05），但日粮0.75%、0.85%赖氨酸组血清GH 含量最高，日粮0.55%、0.85%赖氨酸组血清Cor含量最低，说明日粮0.55%赖氨酸水平即可满足12～18周龄雌性临武鸭生长发育需要，而日粮赖氨酸水平在0.75%～0.85%时对后备期临武鸭的机体生长发育最有利。

有研究报道胰岛素不仅是体内能量代谢的重要激素，同时其可主要通过早期生长应答蛋白－1 途径、胞外信号调节激酶途径和神经肽Y 途径三条通路对促性腺激素释放激素的分泌与活性进行调控［17］，同时本试验结果显示，日粮赖氨酸水平对试鸭血清胰岛素和胰高血糖素含量影响均不显著（P＞0.05），说明对后备期雌性临武鸭生长发育来说日粮0.55%赖氨酸水平即可满足其需要。