冠心病合并慢性心力衰竭患者血清CF-6水平及意义

陈峰，庞继恩，刘志涛，杨志宏，孙强，盛斌，甄玉改，崔静

线粒体偶联因子-6（mitochondrial coupling factor-6，CF6）是由76个氨基酸残基组成的ATP合酶的亚单位，主要参与能量转运过程[1]，在急性心肌梗死、肺动脉高压、睡眠呼吸暂停综合征患者体内均有明显增高[2]，在心肌缺血、血管内皮损伤等细胞坏死和凋亡的情况下，CF6可大量释放进入血液循环[3]。由于心力衰竭（CHF）患者也存在严重的心肌和内皮细胞受损以及神经体液因子的激活，因此本研究将重点分析CF6在心力衰竭患者体内的变化。

1 资料与方法

1.1 研究对象与分组 纳入2009年3月～2012年

10月青岛解放军401医院冠心病（CHD）合并CHF者53例纳入CHF组，所有患者左室射血分数（LVEF）＜50%，其中男38例，女15例，年龄56岁～84岁，平均（63±12）岁，进一步按照美国心脏病协会（NYHA）标准分级，分为心功能Ⅱ级（n=28），Ⅲ级（n=15），Ⅳ级（n=10）三个亚组；另纳入30例心功能正常患者作为对照组，其中男22例，女8例，年龄56岁～77岁，平均（61±10）岁，LVEF＞50%。两组年龄、性别、危险因素、主要病史、血管病变情况等差异无统计学意义。排除标准：风湿性心脏瓣膜病、心肌炎、扩张性心肌病、心包疾病、感染性疾病、活动性风湿免疫疾病、严重肝肾功能不全、其他脏器炎症性疾病、恶性肿瘤等。

1.2 检测方法 所有患者均于入院后次日空腹采集静脉血3 ml，血样本加10%EDTA（1mg/ml），抑肽酶 500 ku/ml，3000 r/min 、4℃离心后，血浆标本置入-70℃冰箱中保存。

采用放免分析法测定CF6：试剂盒由美国Phoenix Pharmaceuticals Inc提供。CF6多克隆抗体与人CF6交叉反应性为100%，与人内皮素-1、血管紧张素Ⅱ、C-型脑钠肽-22等均无交叉反应。CF6放免的半数抑制浓度（IC50）为8pg/tube，敏感性为（10～100）pg/tube，待测样本经酸化后，按照试剂说明书操作要求及仪器操作规程进行样本检测。

电化学发光免疫分析法测定BNP：采用上海罗氏公司的E2010电化学发光仪，试剂购自罗氏公司，严格按照试剂操作要求进行。

1.3 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行数据处理，计量资料用均数±标准差表示，多组间均数比较采用单因素方差分析，两组间比较采用q检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

与对照组相比，CHF组血清BNP和CF-6浓度明显升高，且随心衰程度加重而增加，差异有统计学意义（P＜0.05，表1）。

表1 CHF组与对照组血清BNP、CF6浓度浓度比较

3 讨论

CHF是一种以神经内分泌激活为主要特征的复杂临床综合征，而造成CHF最常见的原因是CHD，而且近年来在我国的发病率和病死率呈逐年上升态势。

BNP是一种主要由心室合成和分泌的心脏神经内分泌激素，心力衰竭时随着室壁张力增加，心肌细胞受到牵拉刺激，BNP合成释放增加，因此可用来观察心力衰竭的变化[4]；同时，血浆BNP还与肺毛细血管楔嵌压呈正相关，与LVEF呈负相关[5]，是左室收缩功能不全的最强标志物，可作为心力衰竭的早期指标，且与NYHA心功能分级相关，即心力衰竭程度越重，血浆BNP的水平越高。

CF6是线粒体ATP合酶（又称H+-ATP合酶）的一个亚单位[6]，普遍存在于体内各种细胞线粒体中，但含量最高的是心肌，其次为肝脏、肾脏、脑、肺等[7]。日本学者Osanai等[7]2001年发现CF6亦存在于血管内皮细胞膜，并且能释放进入血液循环。循环中的CF6具有强烈的血管收缩效应，能够抑制磷脂酶A2的活性，减少质膜花生四烯酸释放，从而影响前列腺素（prostacyclin，PGI2）合成，是迄今所知的体内唯一的内源性PGI2合成抑制因子[8,9]。现已明确CF6受肿瘤坏死因子和剪切力调控，CF6不仅能够导致细胞内酸中毒，还可通过增加二甲基精氨酸和减少血小板及内皮粘附分子抑制一氧化氮合成酶的活性[10]。

近年来发现，CF6也同时存在于血管内皮细胞的细胞膜和细胞浆中（非活性形式），而血管内皮细胞在剪切力的作用下也可分泌和释放CF6，且与剪切力的强度和作用时间正相关[11]，推测可能是循环中CF6的主要来源之一。另外，组织损伤（缺血、缺氧及内皮细胞损伤）以及细胞凋亡[12]也可引起CF6释放入血。

本研究发现CF6浓度随CHF程度的加重而明显升高，其机制可能是缺氧导致心肌细胞内酸中毒和血管内皮细胞受损，细胞膜通透性增加，引起全身多系统的血管内皮细胞损伤，导致CF6释放入血。因此，我们认为CHF患者体内产生的CF6，很有可能作为一种内源性损伤因子参与心衰发生发展过程，提示CF6与BNP一样，可作为心衰严重程度的评价指标用于CHF的诊断、治疗及预后分析。

综上所述，本研究证实了CHF时血浆CF6、BNP浓度升高，提示两者在冠心病心力衰竭的病理生理改变中具有一定意义，其峰值高低主要决定于心衰的严重程度[13]，心力衰竭程度愈重，神经体液激活愈久、愈明显，但CF6的产生是以血管内皮细胞释放为主，还是以心肌细胞严重损伤后漏出为主，目前尚无文献可借鉴，值得进一步深入研究。

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