肌酸激酶同工酶MB质量和活力方法学比较

陶青松，黄建军

(皖南医学院附属弋矶山医院 检验科，安徽 芜湖 241001)

近年来，心肌损伤指标肌酸激酶同工酶 MB(CKMB)作为心梗全套项目内容被推广应用，临床检测主要采用化学发光法，敏感性和特异性都有所提高。由于心梗全套和传统的心肌酶谱都包含CKMB指标，临床应用上常常因检测方法不同出现不一致的结果，给临床医生带来困惑。因此，本研究拟通过比对分析临床急性心肌梗死患者血清中CKMB的活力和质量的检测，比较结果一致性，为临床应用提供可靠的依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 收集2011年9月～2012年12月皖南医学院附属弋矶山医院心内科确诊为急性冠脉综合征患者91例，男性58例，女性33例，年龄45～94岁，平均年龄(74.8±19.3)岁。急性心肌梗死诊断标准参照2007年ACC/AHA指南［1］。

1.2 检测方法 CKMB质量检测法(化学发光法)，仪器为Beckman Access 2系统，单位为ng/ml;CKMB活力检测法(抗体抑制酶法)，仪器为日立7600全自动生化分析仪，单位为U/L。标本在心肌梗死患者收治后随机留取，标本无溶血、黄疸和脂血现象。标本留取后，一分为二，分别做CKMB质量和活力检测。

1.3 统计学分析 采用SPSS 13.0统计软件包进行数据处理，由于CKMB数据为不同单位资料，我们对两个指标进行线性回归分析，再对数据根据回归方程进行转换，数据采用s表示。组间均数比较采用配对t检验，构成比分析采用配对χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CKMB质量和活性的一致性比较 CKMB的活性和质量数据见表1，CKMB质量和活性分别为(8.77±10.27)ng/ml和(23.8±23.06)U/L，由于单位不同，数据不能直接进行比较，因此我们对数据进行回归分析［2］，回归方程为:CKMB活力=1.215×CKMB质量+25.248，根据回归方程，将CKMB质量转换为CKMB活力，转换后的数据采用配对t检验，t=6.415，P＜0.001，差异有统计学意义。

表1 91例急性心肌梗死患者CKMB质量和活力比较

2.2 CKMB质量和活力诊断价值比较 CKMB质量数据的正常人群的参考区间为0～4 ng/ml，CKMB活力的正常人群参考区间为0～24 U/L，为了方便比较，我们将CKMB数据超过正常参考区间的设定为阳性，处于参考区间内的为阴性;同理，将CKMB活力数据超过正常参考区间的设定为阳性，处于参考区间内的为阴性，数据见表2。配对χ2=16.531，P＜0.001，CKMB质量阳性率显著高于活力的阳性率。CKMB质量和活力受试者工作曲线见图1，CKMB质量曲线下面积为0.825±0.05，CKMB活力曲线下面积为0.692±0.04，CKMB质量的诊断效能高于活力的诊断效能。

表2 CKMB质量和活力的诊断价值比较

图1 CKMB质量和活力ROC曲线

2.3 CKMB质量和活力在体外的变化 为了比较CKMB质量和活力在体外随时间的变化趋势，我们将CKMB阳性标本混合在一起制成混合血清，将混合血清一分为二，分别做CKMB质量和活力检测;标本在室温下无菌环境中保存，每天检测两次，共检测5 d。CKMB质量和活力随时间的改变见图2。

3 讨论

CK在人体内存在三种类型，分别为CKMM、CKBB和CKMB，CKMM主要存在于骨骼肌和心肌，CKBB主要存在于大脑，CKMB主要存在于心肌中，是由M(肌肉)和B(脑)两个亚单位组成的二聚体，心肌组织损伤严重时释放入血。因此，CKMB是诊断急性心肌梗死的重要指标［3-4］。目前，临床上检测外周血CKMB的方法主要有传统的抗体抑制酶法和质量检测法，两者方法不同，酶法通过抑制M亚单位的活性，检测B亚单位酶的活力再乘以2作为结果来判断心肌梗死程度，而质量检测法直接检测CKMB蛋白质的含量，以此作为心肌损伤程度的指标，两者单位不同。然而，临床上常常出现两者检测结果不一致的现象，给诊断带来一定困难，本研究通过心肌梗死患者外周血CKMB质量和活力检测方法对比分析的一致性，为两者在临床上的使用提供实验室依据。

图2 CKMB质量和活力在室温下的变化趋势

我们对91例临床心肌梗死患者外周血检测的结果表明，CKMB质量和活力有显著性差异，由于单位不同，不能直接进行比较，转换后的数据并不能说明CKMB质量和活力的水平高低。为了方便比较，我们将定量数据转换成计数资料，人为地设定正常人群参考值范围以内的值为阴性，高于正常参考范围的值为阳性。结果显示，与Song等［5］的研究结果一致，CKMB质量的阳性率显著高于CKMB活力的阳性率，CKMB质量对于心肌梗死的诊断敏感性大于CKMB活力的敏感性。

CKMB质量的检测采用双抗体夹心法，两种特异性抗体分别针对M亚单位和B亚单位，排除了CKBB、巨CK和腺苷酸化酶的干扰［6］，特异性较抗体酶抑制法有了显著的提高［7］。由于酶的活力具有一定的衰减性［8］，为了进一步解释CKMB质量的诊断效能大于CKMB活力的诊断效能的现象，我们分析了CKMB质量和活力随时间变化的趋势。我们通过无菌手段收集心梗患者血清制成混合血清，常温下保存(模拟人体内环境温度)，每天分别检测CKMB质量和活力，连续检测5 d，绘制CKMB质量/活力变化曲线。结果显示CKMB质量检测法呈一条水平的直线，而CKMB活力检测法自第3天呈逐步下降趋势。由此我们可以认为，对于长期心肌损伤患者而言，外周血CKMB酶的活性在逐渐衰减，长期心肌损伤患者外周血CKMB活力的检测并不能反映外周血CKMB蛋白的真实浓度，诊断效能相应低于CKMB质量指标。由此我们认为，CKMB质量检测法优于CKMB活力检测法，是临床诊断心肌梗死患者优先参考的指标。

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