中草药合生元对早期断奶仔猪免疫力的影响
2013-11-24刘艳丽陈永刚黄大鹏
刘艳丽,陈永刚,黄大鹏
(1.大庆禾丰八一农大科技有限公司,大庆 163319;2.黑龙江八一农垦大学动物科技学院)
合生元是指益生素(Probiotics) 与益生元(Prebiotics)混合使用的生物制剂,其特点是可以同时发挥益生素和益生元的双重作用[1-2]。Bailey 等[3]发现,寡聚果糖等可以促进肠道内乳酸菌等菌种的增殖,并通过有益菌的增殖来抑制有害菌,从而实现提高动物生长性能和免疫力的目的。目前,合生元的研究在我国已有一定的基础,王龙昌等报道,向仔猪日粮中添加合生元可提高日增重,降低料重比及腹泻率,并可改善血清生化指标,从而改善仔猪的健康状况[4]。试验通过在断奶仔猪日粮中添加以中草药提取物为益生元与益生素组成合生元,研究合生元对早期断奶仔猪免疫力的影响,为合生元的开发利用奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 试验设计与材料
选择来源和饲养管理条件相同的28 日龄断奶的杜×长×大三元断奶仔猪72 头,按体重、性别随机分为8 组,每组3 个重复,每个重复3 头猪,分别饲喂含不同组方的中草药合生元的日粮。试验所用合生元由2 个中药组方(组方1:黄芪、党参、麦芽、栀子、山楂、白术;组方2:黄芪、枳实、麦芽、陈皮、山楂、山茱萸)的提取物和益生素按一定比例构成。试验设计方案及添加量见表1。
表1 试验分组及中草药添加量Table 1 Experimental groups and additive amount of Chinese herbal medicine
1.2 试验日粮组成及营养水平
饲料中的营养物质含量及能量的测定参照杨胜主编的《饲料分析及饲料质量检测技术》进行。饲料配方按照1998 年NRC 标准及中华人民共和国农业行业标准(猪饲养标准(NY/T 65-2004))进行配制。试验日粮组成及营养水平见表2。
表2 试验日粮组成及营养水平Table 2 Experimental daily ration constitute and nutritional level
1.3 试验仔猪饲养管理
试验仔猪以重复为单位置于高床单栏饲养,自动饮水器供水,舍温控制在22~24 ℃,每日饲喂6次,每日清粪2 次,保持舍内清洁,随时观察仔猪生长发育、采食及腹泻等情况。仔猪进舍前3 d 对猪舍进行严格清洗、消毒。预饲期为7 d,仔猪进行正常免疫和驱虫,对患病仔猪给予适当治疗。
1.4 测定指标与方法
(1)T-淋巴细胞转化率(LTR%)的测定
淋巴细胞转化试验采用形态学检查法,应用非特异性有丝分裂原植物血凝素(PHA)作为刺激物。按公式计算:
(2)血清IgG、IgM、IgA 和补体C3、C4的测定
血清IgG、IgM、IgA 和补体C3、C4的测定采用免疫透射比浊法。
1.5 试验数据统计分析
试验数据统计利用SAS9.0 软件包中的平衡实验设计ANOVA 过程进行方差分析,采用Duncan 法进行均值的多重比较。
2 结果与分析
2.1 合生元对断奶仔猪血液淋巴细胞转化率的影响
由表3 可知,试验所用合生元可提高LTR%,对照二组、各试验组比对照一组分别提高1.28%、5.34%、9.80%、10.39%、1.78%、5.55%、6.80%,且试验三组显著高于对照一、二组(P<0.05);试验二组显著高于对照一组(P<0.05);其余各组间均无显著差异(P>0.05)。
表3 合生元对断奶仔猪血液淋巴细胞转化率的影响Table 3 Effect of synbiltics on blood lymphocyte transformation rate of weaned piglets
2.2 合生元对断奶仔猪血清免疫蛋白含量的影响
由表4 可知,试验所用合生元可在一定范围内提高仔猪血清免疫球蛋白含量。在IgG 方面,试验三组显著高于对照一组、试验四组(P<0.05);试验一、六组显著高于对照一组(P<0.05);其余各组之间相比均无显著差异(P>0.05)。在IgM 方面,试验三组显著高于对照一组、对照二组、试验一组、试验二组、试验五组、试验六组(P<0.05);其余各组间均无显著差异(P>0.05)。在IgA 方面,试验三组显著高于对照一、二组、试验五组(P<0.05);其余各组间均无显著差异(P>0.05)。
表4 合生元对断奶仔猪血清免疫蛋白的影响Table 4 Effect of synbiotics on serum immunity protein of weaned piglets
2.3 合生元对断奶仔猪血清补体含量的影响
由表5 可知,试验所用合生元可提高血清补体含量。在补体C3方面,试验三组显著高于对照一组(P<0.05);其余各组间均无显著差异(P>0.05)。在补体C4方面,试验三组含量显著高于对照一、二组、试验二、五组(P<0.05);试验二组显著高于对照二组(P<0.05);其余各组间均无显著差异(P>0.05)。
表5 合生元对断奶仔猪血清补体含量的影响Table 5 Effect of synbiotics on serum complement content of weaned piglets
3 讨论
试验所用合生元对提高免疫指数的机理在于:微生态制剂的免疫刺激作用主要与糖类有关,而党参、黄芪、山楂等中药可提供多糖成分。糖类作为生物机能调节分子,对巨嗜细胞和T 淋巴细胞、自然杀伤细胞等均有明显的刺激作用,使这些细胞的活性增强,刺激机体增强免疫力[5]。
血液淋巴细胞转化率(LTR%)常作为衡量机体免疫水平的指标,T 淋巴细胞转化率越高,表示淋巴细胞在外来因子的刺激下增殖率上升,机体的细胞免疫能力增强。研究发现,对照二组、各试验组的LTR%分别比对照一组提高1.28%、5.34%、9.80%、10.39%、1.78%、5.55%、6.80%,表明益生素和合生元加剂均可以提高仔猪机体细胞免疫力;并且随着中草药的添加比例的增加,T 淋巴细胞转化率也呈现增加的趋势。试验所用合生元在影响免疫机能时,主要决定因素在于中药与益生素混合比例。
IgG、IgM、IgA 是免疫球蛋白中重要的三大类,仔猪阶段血清IgA、IgM、IgG 的提高,在一定程度上可以减少仔猪疾病的发生。试验结果显示:各处理组IgA、IgM、IgG 含量较对照一组均有不同程度的提高,这与王丽辉的研究结果相一致[6]。这说明试验所采用的合生元对仔猪血清IgA、IgM、IgG 含量有提高的作用,在生产上即表现为腹泻率降低,抗病力增强。
补体是特异性免疫的主要组成成分,是类似酶活性的一组蛋白质,参与机体保护性的免疫应答和自身稳定功能,协助抗体和吞噬细胞杀灭病原微生物和加强细胞免疫功能,担负机体非特异性抗感染作用。研究显示:各组补体C3、C4均高于对照一组,说明试验所用益生素和合生元均能提高断奶仔猪血液补体C3、C4含量,并且其含量不随中草药添加比例的增减有显著的变化趋势。
从试验整体数据可以明显的看出,添加合生元要比单独添加益生素的效果更好,表现出中草药与益生素两者的协作性。中药提取物(寡糖、多糖)能减缓抗原的吸收时间,增加抗原的效价,而提高机体免疫功能(Newman)[7];中药提取物可提高胃肠道IgA 水平,这可能与寡糖竞争性吸附排除病原菌及特异性结合毒素有关;益生菌菌体结构、代谢产物和其调整微生物菌群的作用,可能是益生菌促进动物体免疫功能的原因[8]。
4 结论
合生元对LTR%、血清IgG、IgM、IgA、补体C3、C4水平有显著提高,即提高了断奶仔猪的免疫力和抗病力。其中各项免疫指标均以0.5%益生素加0.5%中草药组最优。
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