PAC－1、CD62p和D－Dimer含量与急性脑梗死患者梗死体积的相关性

黄 涛 王海侨 (广州中医药大学附属佛山中医院神经内科，广东 广州 528000)

血小板活化和纤溶系统的激活是急性脑梗死(ACI)微血栓形成的核心病理环节〔1，2〕，在ACI缺血以及缺血-复流脑损害的发生、发展过程中均起着十分关键的作用〔3〕。纤维蛋白原受体(PAC-1)和P选择素(CD62p)是目前检测早期和晚期血小板活化程度和功能状态的特异性标志物〔4〕。D-二聚体(D-Dimer)是体内纤溶亢进和高凝状态的交联纤维蛋白降解产物，是反映体内纤溶亢进和高凝状态的敏感指标〔5〕。本研究拟探讨PAC-1、CD62p和D-Dimer表达水平与ACI患者梗死体积的相关性。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选择2009年1月至2011年1月广州中医药大学附属佛山中医院神经内科收治的ACI患者58例，男30例，女28例，年龄40～84〔平均(67.2±7.24)〕岁。发病到就诊时间为4 h～6 d，所有患者均符合1995年全国第四届脑血管病会议制定的ACI诊断标准，均经过头颅CT或者MRI确诊，并排除其他存在的凝血性疾病以及血栓。

1.2 PAC-1、CD62p和D-Dimer表达的检测 所有患者于入院后1 d以及治疗后14 d清晨空腹采集静脉血3管，每管各4 ml，其中1、2管为对照管和实验管，每管先抽取5 μl全血，剩余全血分别置入FL1及FL2的补偿管中。加入异硫氰酸荧光素(FITC)-IgM、巯基抗体(PE)-IgG1及 PerCP-CD61单抗各20 μl。另将剩余的全血中分别加入 FITC-IgM、PerCD62p及 PerCPCD61单抗各20 μl。实验管分别加入 FITC-PAC1、PE-CD62p及PerCP-CD61单抗各20 μl。剩余的 FL2补偿管中加入 FITCPAC1、PE-IgG1 及 PerCP-CD61 单抗各 20 μl。避光 20 min 后1%PFA 250 μl固定 10 min，流式细胞仪 FACS Calibur(美国B.D公司)检测PAC-1和CD62p的阳性表达率。第3管用于测定D-Dimer水平(日本SYSMEX全自动血栓/止血分析仪)。

1.3 梗死灶体积的计算 采用Pullicino公式计算梗死灶体积公式:梗死灶体积=长×宽×CT或MRT扫描阳性层数/2。

1.4 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行分析，数据资料采用s表示，多组间的对比采用单因素方差分析，两组对比采用t检验，并用直线分析行相关性分析。

2 结果

2.1 梗死体积大小与ACI患者PAC-1、CD62p和D-Dimer含量的关系 PAC-1和CD62p水平与梗死体积大小有明显的直线关系，梗死体积越大，PAC-1和CD62p水平越高。而ACI患者血浆D-Dimer水平只有在大面积梗死的ACI患者中才显著升高。见表1。

表1 梗死体积大小与ACI患者PAC-1、CD62p和D-Dimer含量的关系(s)

表1 梗死体积大小与ACI患者PAC-1、CD62p和D-Dimer含量的关系(s)

与小体积梗死组比较:1)P＜0.01;与中体积梗死组比较:2)P＜0.01

组别 n(男/女)年龄(岁)PAC-1(%)CD62p(%)D-Dimer(μg/L)小体积梗死组 32(17/15)66.189 1±17.004 1 0.490 1±0.298 2 3.299 4±1.082 2 331.880 2±169.004 9中体积梗死组 15(6/9)58.444 0±14.300 8 0.959 8±0.375 01) 5.639 1±0.868 41) 298.779 2±282.396 0大体积梗死组 11(7/4)70.122 1±11.826 9 1.649 8±0.611 62) 7.107 2±1.692 42) 579.247 7±217.550 62)

2.2 梗死体积与ACI患者PAC-1和CD62p含量的相关性分析 经直线分析，PAC-1和CD62p水平均与梗死体积存在明显相关性，梗死体积越大，ACI患者PAC-1和CD62p水平也越高，血小板活化也越强。见表2。

表2 梗死体积与ACI患者PAC-1和CD62p含量的相关性分析

3 讨论

PAC-1是反映血小板活化的早期标志物〔4〕，血小板膜糖蛋白在血栓形成过程中及受损血管血小板黏附过程中均起着重要的作用〔6〕。对血小板表面PAC-1表达的检测能够反映血小板早期活化的情况。CD62p是血小板α颗粒释放后的标志物，血小板在组胺、肿瘤坏死因子、氧自由基、凝血酶等因子刺激时会被激活，从而使原来存在于血小板胞质内的糖蛋白CD62p得以迅速表达于血小板活化后的内皮细胞上，最终成为晚期血小板活化的特异性指标〔6〕。D-Dimer为纤维蛋白降解产物中最小的片段，是体内纤溶亢进的分子标志物以及高凝状态的标志物，是反映机体凝血/纤溶系统的敏感指标之一〔5〕。近年来研究表明血栓溶解与D-Dimer水平的降低存在直接相关性〔5〕。当机体处于凝血状态时，凝血酶会促进纤维蛋白转变成为交联纤维蛋白，纤溶系统同时被激活、降解，最终形成D-Dimer的碎片。D-Dimer水平上升表明机体凝血系统以及纤溶系统被双重激活，从而反映全身或局部血管内凝血和继发性纤溶亢进〔5〕。因此，检测ACI患者的D-Dimer水平变化对判定溶栓治疗疗效及血栓形成均有重要的意义。

李军等〔7〕研究表明脑梗死急性期患者的PAC-1、CD62p表达水平，大梗死灶组＞中梗死灶组＞小梗死灶组。显示PAC-1、CD62p表达水平与梗死灶的大小呈显著正相关。陈军等〔8〕研究也显示PAC-1和CD62p的表达水平与梗死灶面积呈密切相关性，表明梗死灶面积越大，患者体内PAC-1和CD62P的表达水平就越高，血小板活化的程度也越强。葛京平等〔9〕对脑梗死患者急性期血小板行透射电镜扫描显示，梗死灶面积大的患者α颗粒数量显著高于梗死灶面积小的患者，提示血小板活性增强导致线粒体被消耗，从而使α颗粒被激活，α颗粒等活性物质释放会加重缺血性损害，从而最终导致脑梗死症状的进一步恶化。

本组研究也显示，ACI患者的PAC-1和CD62p表达水平与梗死灶体积呈密切相关性，梗死灶体积越大，患者的PAC-1和CD62p表达水平越高，可能因为血小板活化后α颗粒分泌产物能够通过血脑屏障，造成脑组织损害，导致脑卒中恶化，并能够促进各种炎性物质生成，从而加重炎症、水肿，并扩大梗死灶的面积。而本组研究表明D-Dimer的表达水平与梗死灶体积增大无相关性，只有在ACI患者中存在大体积梗死者，其血浆DDimer水平才会存在较为明显的升高，与许多学者的报道不同〔10〕。其原因在于ACI早期中小体积梗死患者的纤溶系统并未完全激活，使D-Dimer水平表达不明显;当梗死灶体积增大时，血中纤溶系统被完全激活，从而导致交联纤维蛋白降解产物D-Dimer增加。

综上所述，PAC-1、CD62p和D-Dimer参与了ACI血栓形成和脑缺血后再灌注损伤，三者不仅在ACI发生发展过程中起着关键作用，而且与ACI患者梗死体积大小关系密切。PAC-1和CD62p含量随着ACI患者梗死体积的增大逐渐增高，呈明显的正相关。由于病例数偏少，本实验只粗略地评估了PAC-1、CD62p和D-Dimer含量与ACI患者梗死体积之间的线性关系，更全面、系统、客观评估期待今后更大规模的实验研究。

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7 李 军，沈志梅，马 莉，等.脑梗死患者活化血小板的检测及其临床意义〔J〕.实用临床医药杂志，2006;10(7):52-5.

8 陈 军，孙恒芳，张旭东.急性脑梗死与活化血小板因子相关性的研究〔J〕.中国社区医师，2007;23(3):26.

9 葛京平，孟德润.活化血小板与脑梗塞〔J〕.哈尔滨医科大学学报，1999;33(5):416.

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