利用SPSS19.0计算萝卜种子辐射诱变的L D5 0

2013-11-12张小康熊秋芳陈玉霞张雪清李徳超李世升

长江蔬菜 2013年22期

张小康，熊秋芳，陈玉霞，张雪清，李徳超，李世升

（1.武汉市蔬菜科学研究所，430345；2.湖北省农科院农产品加工与核农技术研究所）

辐射诱变育种是获得新种质资源和选育新品种的有效途径之一，其具有突变率高、突变谱宽、后代性状稳定快、育种周期短等优点，且方法简便，可在短时间内改变植物的某一性状。选择合适的辐照剂量是辐射诱变育种的关键[1，2]。萝卜（Raphanus sativusL.）是我国第二大蔬菜种植作物，年播种面积120余万hm2，辐射育种在萝卜中的应用国内外报道甚少，本研究以6个常规萝卜品种为试材，以60Co-γ射线为照射源，材料用不同剂量射线照射后在实验室培养24～144 h，并统计发芽率，并用SPSS（Statistical package for the social science）19.0 软件进行概率单位加权回归法（Bliss法）计算萝卜种子辐射诱变LD50[3]，最后通过田间种植比较试验进行数据对比验证。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验在武汉市蔬菜科学研究所十字花科研究室实验室进行。6个萝卜品种均为本研究室的高代自交系，品种名称及特征特性见表1。

1.2 试验方法

将萝卜种子装入牛皮纸袋内，于2012年9月在湖北省农科院农产品加工与核农技术研究所辐照中心进行辐射处理，辐射剂量共设18个处理，处理1（CK），0 Gy；处理 2，900 Gy；处理 3，1 100 Gy；处理4，1 300 Gy；处理 5，1 500 Gy；处理 6，1 700 Gy；处理7，1 900 Gy；处理 8，2 500 Gy；处理 9，3 000 Gy；处理10，3 500 Gy；处理 11，4 000 Gy；处理 12，5 000 Gy；处理 13，6 000 Gy；处理 14，7 000 Gy；处理 15，8 000 Gy；处理 16，9 000 Gy；处理 17，10 000 Gy；处理18，20 000 Gy。将辐射处理及对照种子播于10 cm×10 cm的培养皿内，以一层滤纸为发芽床，置于25℃的恒温恒湿培养箱内，每天通气并注意保湿，每个品种每个剂量处理种子100粒，重复3次，于发芽24 h统计发芽率。

表1 各品种特征特性

表2 不同处理剂量下各品种24 h的发芽率

为进行数据对比，田间以C品种为样本，将该萝卜品种各诱变剂量及对照于2012年12月25日播种于日光温室，按常规方法进行管理，观察并统计各剂量下的发芽率、成苗率和畸形率。

2 结果与分析

2.1 统计过程

输入表2数据的过程如下。运行SPSS 19.0软件，进入SPSS数据编辑器后，首先激活变量表定义变量，在变量名下输入“剂量”、“种子数”和“发芽率”，并将“剂量”的小数点位数设为“3”，“种子数”和“发芽率”的小数点位数设为“1”。然后进入数据表，根据表头提示，依次输入各组数据。在数据表主菜单中，选择分析→回归→Probit，调出Probit Analyze对话框，只需将“剂量”选入“协变量”栏中，“种子数”选入“总数”栏中，“发芽率”选入“响应频率”栏中，在“转换”栏中，选择“以10为底的对数转换”，其他保持默认选项。然后单击“OK”钮即可完成整个操作过程。

2.2 统计结果分析

通过SPSS回归软件分析会自动显示全部分析结果，其中包括回归方程参数表、不同剂量的试验值和预期值概率表、从0.01～0.99致死的剂量（包括0.50，即 LD50）(表3）及 95%可信区间表，以及对数单位与概率单位的关系曲线图。

经过 SPSS统计分析，791萝卜的LD50为2 459.298 Gy，大青头萝卜的LD50为1 602.770 Gy，短叶13萝卜的 LD50为1 494.662 Gy，黄州萝卜的LD50为1 431.329 Gy，扇子白萝卜的LD50为3 162.271 Gy，兰花子萝卜的 LD50为 1 693.110 Gy。6个萝卜品种种子的抗辐射能力依次为扇子白＞791＞兰花子＞大青头＞短叶13＞黄州。

2.3 田间试验验证

田间试验结果表明，C品种（短叶13）的LD50为1 300～1 500 Gy，与SPSS软件分析的 LD50=1 494.662 Gy吻合；另外，该辐照剂量区间处理下C品种的发芽率为60%～68%，成苗率为30%～54%，真叶畸形率为90%～100%，表明此剂量区间为最适诱变剂量区间，其既可以保证品种有大量的变异产生，同时也可以保证有足够的筛选群体，是进行萝卜辐射诱变育种的适合剂量。