老年颈动脉粥样斑块患者血清MMP－9，TIMP－1与hs－CRP水平变化

杨 华 王全懂

（连云港市第一人民医院 老年医学科，连云港 222002）

炎性反应成为动脉粥样硬化形成的主要机制之一，超敏C反应蛋白（High－sensitivity C－reactive protein，Hs－CRP）为炎性反应的重要标志物，缺血性脑血管事件多源于颈动脉粥样硬化斑块破损，薄纤维帽是易损斑块的特征之一，而细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）降解增加，是导致纤维帽变薄内在原因。基质金属蛋白酶－9（Matrix metallopro－teinase－9，MMP9）在降解细胞外基质方面起关键作用，而MMP－9表达主要受基质金属蛋白酶组织抑制 剂（Tissue inhibitors of metalloproteinase 1，TIMP－1）的调节。本研究抽取患者外周血，利用ELISA 试验检测血清MMP9、TIMP－1、Hs－CRP 的含量；利用彩色多普勒血流显像检查手段检测颈动脉粥样斑块厚度及及斑块声像特性，探讨MMP9、TIMP－1、Hs－CRP表达水平与颈动脉粥样斑块稳定性的关系。

1 材料与方法

1.1 病人选择

入住我科的住院患者，临床表现、颈动脉血管超声、经颅多普勒超声（TCD）及相关检查证实存在颈动脉粥样硬化患者90例。其中男50，女40，年龄：75岁～90岁，中位年龄：男性81.8岁，女性80.7岁。

1.2 颈动脉粥样硬化的检测

利用颈动脉超声检测方法检测双侧颈总动脉、颈总动脉分叉处、颈内动脉测量并记录颈内动脉内膜中层厚度（IMT）、IMT＞1.2mm 定义为斑块。根据斑块的回声特性将病例分为内膜毛糙组；稳定斑块（回声强度与外膜组织相似或超过外膜组织）和易损斑块组（斑块回声低于外膜组织回声）。

1.3 血清指标测定每位受试者均于清晨空腹抽取静脉血，严格按照试剂盒说明操作，采用夹心酶联免疫吸附（ELISA）试验检测血清基质金属蛋白9（MMP－9）、基质金属蛋白酶抑制剂－1（TIMP－1）、超敏C反应蛋白（hs－CRP）等指标，试剂盒由武汉博士德生物技术公司出品。

1.4 相关性分析

采用SPSS 13.0统计软件进行统计处理数据，计量资料以均数±标准差表示；组间比较采用单因素方差分析；P＜0.05认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 颈动脉超声结果

颈动脉血管超声显示：颈动脉存在动脉粥样硬化斑块者90例，其中内膜毛糙组28例、稳定斑块32例、易损斑块30例（见图1）。

图1 颈动脉超声结果

2.2 一般临床资料组间

三组间年龄、收缩压、舒张压、血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白无统计学差异（P＞0.05）；三组间胆固醇比较有统计学差异（P＜0.05）（见表1）。

表1 一般资料的比较（）

表1 一般资料的比较（）

2.3 血清各MM P－9TIMP－1，Hs－CRP表达

易损斑块组血清MMP9、Hs－CRP 表达显著高于稳定斑块组及无斑块组（P＜0.05），稳定斑块组及无斑块组无显著差异（P＞0.05）；损 斑 块 组TIMP－1表达显著低于稳定斑块组易及内膜毛糙组（P＜0.05），易损斑块组及内膜毛糙组两组无显著差异（P＞0.05）（见表2）。

表2 三组病例血浆MM P－9TIMP－1，Hs－CRP比较（）

表2 三组病例血浆MM P－9TIMP－1，Hs－CRP比较（）

3 讨论

脑血管事件多源于颈动脉粥样硬化斑块破损，颈动脉粥样硬化是一个动态过程，往往从脂纹开始，逐渐形成动脉粥样硬化斑块，动脉粥样硬化进展表现为稳定期与不稳定期交替过程，使颈动脉粥样硬化斑块形态学呈现多样性，因此临床上对颈动脉斑块形态学易损性的评估可在急性脑血管事件发生前早期识别易损斑块，并给予有效干预。

近年来研究证实，炎症在动脉硬化的发生、发展过程及动脉硬化斑块由稳定向不稳定发展上起着极为重要的作用［1］。hs－CRP 为公认的炎症反应的生物学标志物，而且是参与动脉粥样硬化形成的重要炎性因子［2］；其可通过经典的激活补体系统产生大量的末蛋白及复合物诱导内皮功能损伤，从而损伤血管。斑块内炎症反应和免疫反应增强使斑块的纤维帽变薄，斑块易损。本研究显示易损斑块组血清hs－CRP水平明显高于稳定斑块组及无斑块组，提示易损斑块存在活跃的炎性反应，进一步证实炎症与颈动脉斑块不稳定之间的关联性，作为不稳定斑块的密切相关的炎性标志物hs－CRP水平增高可以预示急性脑血管事件发生的危险性增加。

斑块核心的大小、成分和纤维帽的厚度是决定斑块稳定性的重要因素。薄纤维帽是易损斑块的特征之一，研究证实纤维帽厚度＜0.7 mm 者易于破裂［3］，而ECM 合成减少和降解增加，是导致纤维帽变薄内在原因。MMPs是降解细胞外基质（ECM）的重要酶类，，对ECM 的降解是动脉粥样斑块不稳定的重要因素。基质金属蛋白酶－9（MMP9），由中性粒细胞、单核巨噬细胞、血管内皮细胞等多种细胞合成，MMP9在降解细胞外基质及增加斑块破裂方面起关键作用［4］。Loftus等［5］分析斑块内MMPs表达水平对临床和经颅多普勒超声微栓子检测结果的关系，发现斑块内MMP9水平越高，微栓子检测的阳性率越大。此外又对75例行颈动脉内膜切除术患者切取的粥样斑块进行研究发现，曾有过栓塞或组织学证明易损性斑块的患者动脉斑块中MMP9明显升高［6］。多项研究均表明，MMP9表达水平和颈动脉斑块的易损性密切相关［78］，本研究显示易损斑块组血清MMP－9水平明显高于相对不稳定组P＜0.05，相对稳定组MMP－9 水平明显高于稳定组及无斑块组，这提示MMP－9 参与了动脉粥样硬化斑块形态学不稳定性的转化过程，测定血清MMP－9水平可作为评价颈动脉粥样斑块稳定性的有力依据。

MMP－9表达主要受TIMP－1和基因表达的调节。TIMP－1是MMP 的天然抑制物，具有N 端和C端两个蛋白质结构域，其中C端结构域由65个氨基酸残基组成，与MMP 结合形成TIMP－MMP 复合物，阻断MMP 与底物结合，抑制ECM 降解。TIMP主要从两个方面抑制MMP 的激活：一是在酶原活化阶段，TIMP与MMP形成稳定的复合体，阻碍MMP的酶原自我激活；二是在活化的MMP阶段，TIMP可直接与活化的MMP 形成紧密的复合体，抑制其活性［9］。测定血浆TIMP－1水平可作为评价颈动脉粥样斑块的另一个可靠指标。

颈动脉斑块形态学稳定性与多种因素有关，那么从多角度联合评估颈动脉斑块的形态学易损性。血清MMP一9、hs－CRP、MCP－1水平与颈动脉斑块易损性相关，其检测简便易行检测血清水平并结合颈动脉斑块的超声影像学改变，对于临床上及早发现易损斑块，及时采取干预措施进而降低缺血性脑卒中危险性可能会有一定的帮助。

［1］Ross.Atherosclerosis－an inflammatory disease ［J］.Engl J Med，1999，340（2）：115－126.

［2］Labat C，Temmar M，Nagy E，et al.Inflammatory mediators in saliva associated with arterial stiffness and subclinical atherosclerosis［J］.Hypertens.2013；31（11）：2251－2258.

［3］Ge J，Chinllo F，Schwedtmann J，et al.Screening of ruptured plaques in patients with coronary artery disease by intravascular ultrasound［J］.Heart，1999，81（6）：621－627.

［4］Pauly RR，Passaniti A，Bilato C，et al.Migration of cultured vascular smooth muscle cells through a basement membrane barrier requires type IV collagenase activity and is inhibited by cellular differentiation［J］.Circ Res，1994，75141－95154.

［5］Loftus IM，NaylorA R，Goodall S，et a1.Increased matrixmetalloproteinase－9activity in unstable carotid plaques A potential role in acute plaque disruption［J］.Stroke，2000，31（1）：40－47.

［6］Loftus IM，Naylor AR，Bell PR，et.a1.Plasma MMP－9：a marker of carotid plaque instability［J］.Eur J Vasc EndovascSurg，2001，21：172－179.

［7］Jiang XB，Yuan WS，Wang JS，et al.Matrix metalloproteinase－9expression in carotid atherosclerotic plaque and contrastenhanced MRI in a swine model［J］.Neurointerv Surg.2012，7：112－119.

［8］Xu X，Wang L，Xu C，Zhang P，et al.Variations in matrix metalloproteinase－1，－3，and－9genes and the risk of acute coronary syndrome and coronary artery disease in the Chinese Han population［J］.Coron Artery Dis.2013，24（4）：259－265.

［9］Nenseter MS，Narverud I，Graesdal A，et al.Elevated serum MMP－9／TIMP－1ratio in patients with homozygous familial hypercholesterolemia：effects of LDL－apheresis.［J］.Cytokine.2013Jan；61（1）：194－198.