小叶苦丁茶的研究进展△

易帆，彭勇*，许利嘉，肖培根

(1.中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所，北京 100193；2.国家教育部中草药物质基础与资源利用重点实验室，北京 100193)

中药文化

小叶苦丁茶的研究进展△

易帆1，2，彭勇1，2*，许利嘉1，2，肖培根1，2

(1.中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所，北京 100193；2.国家教育部中草药物质基础与资源利用重点实验室，北京 100193)

对我国别样茶(non-Camelliateas)中小叶苦丁茶的应用历史以及现代研究等方面进行整理综述。小叶苦丁茶在我国南方地区具有悠久的饮用历史，具有典型的别样茶特征，其原植物来源主要为木犀科女贞属植物粗壮女贞Ligustrumrobustum(Roxb.)Bl.及其同属植物丽叶女贞LigustrumhenryiHemsl.、总梗女贞LigustrumpriceiHayata及光萼小蜡Ligustrumsinensevar.myrianthum。小叶苦丁茶具有清热解毒、消肿止痛、除湿化痰及减肥等功效。对小叶苦丁茶的现代研究表明，其主要化学成分为萜类、苯丙素类及黄酮类，其主要药理活性包括改善心脑血管系统，降糖降脂，抗菌消炎，抗氧化，保肝等方面。

小叶苦丁茶；别样茶；化学成分；药理活性

苦丁茶在我国民间广泛应用已有2000年以上的历史，就产量及应用程度而言，在我国是仅次于茶以外的植物饮品，是别样茶(non-Camelliateas)中最为出色的品种[1]。苦丁茶在民间因原植物来源不同分为大叶苦丁茶及小叶苦丁茶。大叶苦丁茶的原植物来源为大叶冬青I.latifoliaThumb.ex Muray及苦丁茶冬青I.kudingchaC.J.Tseng。而小叶苦丁茶的原植物来源为木犀科女贞属的粗壮女贞Ligustrumrobustum(Roxb.)Bl.及其同属植物丽叶女贞LigustrumhenryiHemsl.、总梗女贞LigustrumpriceiHayata及光萼小蜡Ligustrumsinensevar.myrianthum。小叶苦丁茶在我国西南地区广泛使用，尤其在贵州、四川、云南等省资源量较大，分布较广。小叶苦丁茶因其味苦性寒，具有清火解毒、消炎杀菌、降压降脂、抗氧化、减肥利尿等药用保健功能而受到大众的青睐[2，3]。本文在前人研究进展的基础上，对小叶苦丁茶的历史应用及现代研究等方面展开综述，为小叶苦丁茶的进一步开发提供科学依据。

1 小叶苦丁茶的历史记载及基源考证

《四川中药材标准》记载四川苦丁茶为木犀科植物总梗女贞LigustrumpriceiHayata、粗壮女贞Ligustrumrobustum(Roxb.)Bl.或丽叶女贞LigustrumhenryiHemsl.的叶；《贵州省中药材质量标准》收载的苦丁茶来源为日本毛女贞LigustrumjaponicumThunb，日本毛女贞后经昆明植物所吴征镒先生修订为光萼小蜡Ligustrumsinensevar.myrianthum(Diels)Hofker.《中国植物志》(1992)将紫茎女贞LigustrumpurpurascensY.C.Yang 归并于粗壮女贞名下。故有关紫茎女贞的文献文内均为粗壮女贞，有关文献记载详见表1。

2 小叶苦丁茶的开发应用

目前苦丁茶市场上小叶苦丁茶的主流商品来自于粗壮女贞的代茶制品。小叶苦丁茶在西南地区得到了广泛的开发及应用，主要分布在贵州乌江沿岸和苗岭山区[4]以及四川省筠连县。贵州省遵义市余庆县因其来源自粗壮女贞制成的“余庆小叶苦丁茶”产量较大、质量较优，已被授予“中国小叶苦丁茶之乡”、“中国小叶苦丁茶示范基地”等称号。(余庆小叶)其加工产品主要销往东南沿海一带，并出口到北美、西欧及东南亚市场[5-7]。筠连县2010年全县苦丁茶种植12万亩，产量达17 300万担，产值上亿元，成为全国最大的小叶苦丁茶基地县，占全国苦丁茶市场销售份额的50%以上。产品销售全国各大中城市，成为筠连农民增收的支柱产业和产业结构培养的特色产业。2009年，筠连苦丁茶获得了四川省第九届“四川名牌产品”荣誉称号。2010年，“苦丁茶之乡”通过国家质检总局审定，列入国家地理标志产品保护目录[8，9]。

表1 小叶苦丁茶的历史记载及基源考证

3 小叶苦丁茶的化学成分

小叶苦丁茶茶中含有多种化学成分，主要为萜类、苯丙素类及黄酮类化合物(详见图1及表2)。

图1 小叶苦丁茶植物中的主要化学成分

序号英文名来源植物参考文献萜类1Linalool-a总梗女贞[10]2Linalool-b总梗女贞[10]3LipedosideB-Ia总梗女贞[10]4LipedosideB-IIa总梗女贞[10]5LipedosideB-IIIa总梗女贞[10]6LipedosideB-Ib总梗女贞[10]7LipedosideB-IIb总梗女贞[10]8LipedosideB-IIIb总梗女贞[10]9LipedosideB-IV总梗女贞[10]10LipedosideB-V总梗女贞[10]11LipedosideB-VI总梗女贞[10]12Anatolioside总梗女贞[10]13LigurobustosideA粗壮女贞[11]14LigurobustosideB粗壮女贞[11]15LigurobustosideC粗壮女贞[11]16LigurobustosideD粗壮女贞[11]17LigurobustosideE粗壮女贞[12]18LigurobustosideF粗壮女贞[12]19LigurobustosideG粗壮女贞[11]20LigurobustosideH粗壮女贞[11]21LigurobustosideI粗壮女贞[12]22LigurobustosideJ粗壮女贞[12]23LigurobustosideK粗壮女贞[12]24LigurobustosideL粗壮女贞[11]25Oleanolicacid粗壮女贞[11]

续表2

3.1 萜类

从总梗女贞叶中分离得到 Linalool-a、Linalool-b、Lipedoside B-Ia、Lipedoside B-IIa、Lipedoside B-IIIa、Lipedoside B-Ib、Lipedoside B-IIb、Lipedoside B-IIIb、Lipedoside B-IV、Lipedoside B-V、Lipedoside B-VI、Anatolioside[16]。

从粗壮女贞叶中分离得到 Ligurobustoside A、Ligurobustoside B、Ligurobustoside C和 Ligurobustoside D[19]；Ligurobustoside E、Ligurobustoside F、Ligurobustoside I、Ligurobustoside J和Ligurobustoside K[20]；Ligurobustoside G、Ligurobustoside H和Ligurobustoside L[16]；Ligupurpuroside F、Ligupurpuroside K[17]、Ligurobustoside O[21]和Oleanolic acid[16]。

从光萼小蜡叶中分离得到 Oleuropein、Ligstroside、Ligustaloside A、Ligustaloside B、10-Hydroxyoleuropein、Nüzhenide[13]；Methyl glucooleoside和8-Epikingiside[22]。

3.2 苯丙素类

云南昭通的粗壮女贞苦丁茶叶中分离得到Ligupurpuroside A、Ligupurpuroside B、Acteoside、2-(3，4-dihydroxy-phenyl)ethyl(3-O-α-L-rhamnopyranosyl)(4-O-coumaroy)-O-β-D-glucopyranoside、Ligupurpuroside C、Ligupurpuroside D、Osmanthuside B[21]、cis-Ligupurpuroside B、Isoacteoside[18]、Ligurobustoside M、Ligurobustoside N、Osmanthuside B6[12]。

从总梗女贞叶中分离得到Lipedosides A-I、LipedosidesA-II、2-{2-[2-(3，4-Dihydroxy-phenyl)-ethoxy]-3，5-dihydroxy-6-hydroxymethyl-tetrahydro-pyran-4-yloxy}-6-methyl-tetrahydro-pyran-3，4，5-triol、Osmanthuside B[16]、Osmanthuside D、Isosyringalide 3′-α-L-rhamnopyranoside[16]。

3.3 黄酮类

粗壮女贞叶中分离得到Luteolin-7-glucoside、Cosmosiin、Rhoifolin[15]和 Apigenin[20]。

3.4 挥发油

从粗壮女贞的叶中得到的挥发成分主要为单萜和倍半萜[23]。从丽叶女贞嫩梢、粗壮女贞嫩梢和老叶的挥发油中分离出87个化合物，鉴定出了82种成分[24-28]。

3.5 其他类

从粗壮女贞叶中分离得到β-固甾醇[26，29，30]。

对贵州粗壮女贞叶的可溶性糖进行研究后发现可溶性总糖中主要含有蔗糖和果糖[31-35]。

从粗壮女贞的叶中分离得到Mannitol[36]、D-sorbitol和cis-Roseoside[37]。

4 小叶苦丁茶的药理作用

近十年来小叶苦丁茶各种药理活性作用被报道，总结来说，主要有以下几个方面：

4.1 降血压降血脂及对心脑血管系统的作用

将粗壮女贞中的阿克苷(acteisude)，作用于肠系膜动脉，发现阿克苷(3-50 μmol/L)可以增强去氧肾上腺素诱导的动脉收缩，而并不影响最大反应值，当内皮细胞缺失时，此作用消失。提示阿克苷的作用靶点可能为内皮细胞。另外，阿克苷可抑制四乙胺敏感的NO依赖型通道，而不影响鸟苷酸环化酶和腺苷酸环化酶的活性[38]。贵州省独山县产光萼小蜡为当地人群常年饮用植物代用茶，其高血压及心脑血管疾病发生率明显低于其他地区，提示其有预防心脑血管疾病的作用[39]

将粗壮女贞的提取物(ELR)对于正常麻醉大鼠、Wistar大鼠及SHR大鼠进行股静脉注射，均有显著降压作用[40]。粗壮女贞对于消化道和静脉给药麻醉犬均有一定的降压效应，但其降压作用机理还需进一步深入研究，以便更好地加以利用[41]。其醇、水提取液对高脂血症大鼠降血脂灌胃实验结果显示，给药组动物血清胆固醇、甘油三酯水平明显降低，其中水提取液组血清胆固醇及甘油三酯接近正常动物水平，说明其对高脂血症大鼠血脂有明显改善作用[41-42]。

用光萼小蜡制成的苦丁茶醇提取物的干浸膏对分组日本大耳鼠进行降血脂作用研究并检测[43]，于实验前、实验后1、2、3月检测血总脂(TL)、总胆固醇(TC)、β-脂蛋白(β-LP)、甘油三酯(TG)；于实验后1月、2月测定过氧化脂质(LPO)；于实验3个月后股动脉放血处死动物，取心、脑、肾、肝做组织病理检查，观察动脉粥样硬化及其他病理学变化。结果显示，苦丁茶给药后对食高胆固醇诱发的血TL、TC、LPO值升高具有降低作用，并可使动脉粥样硬化斑块面积明显减少，但对TG及甘油三酯和β-LP无明显影响。由此可知，小叶苦丁茶不仅可有效降低血脂，减少动脉粥样硬化的发生，还具有抗脂质过氧化作用。另有实验证明，贵州产光萼小蜡叶提取物与安妥明有类似的降脂效果，因而具有抗动脉粥样硬化斑块形成的生物活性，还提示贵州光萼小蜡叶提取物能降低红细胞压积HCT和过氧化脂质LPO，说明在一定程度上能调节血液粘稠性，改变血液流变学状态，减少脂质过氧化产物含量[39]。

4.2 减肥作用

将昆明种小鼠(18～22 g，♀♂各半)随机分成空白对照(常规颗粒饲料)和肥胖模型组，肥胖组于饲营养饲料2周后继续造模，同时分别灌胃给予总黄酮(10、5 g/kg)和水煎液(25、12.5 ml/kg)另设预防给药组(于造模同时给予药物)，剂量同治疗给药组。阳性药选择盐酸酚氟拉明片(6 mg/kg)，连续给药4周。肥胖小鼠实验证明粗壮女贞总黄酮部位及水煎液均具有较为明显的减肥作用，表现在用药后肥胖指数和脂肪组织湿重明显下降，营养性肥胖小鼠体重受到明显抑制，各项指标与模型组比较有显著性差异[28]。

4.3 抗氧化作用

从粗壮女贞中分离出三种芳香族配糖体化合物阿克苷(acteisude)以及紫茎女贞苷A和B(ligupurosideA and B)[44]。通过高效液相色谱测定苦丁茶总苷中60%为阿克苷。取SD大鼠(250～300 g)断头致死，用冷生理盐水经门静脉灌流肝脏，迅速取肝，低温下制备肝微粒体，Lowry法进行微粒体蛋白定量。用Fe2+-半胱氨酸反应系统(Cys)产生氧自由基激发脂质过氧化反应，取微粒体1.5 ml加入Cys0.5 mmol/L及FeSO45 μmol/L，37 ℃温育30 min，用0.61 mol/L三氯醋酸1 mL终止反应，观察对脂质过氧化过程中MDA生成的影响。结果显示3种芳香族配糖体均可显著抑制肝微粒体脂质过氧化产物MDA生成，抑制率与同浓度维生素E相当并随浓度增加而提高。

直至苏轼被贬岭南，仍然“九死岭南吾不悔”，坚持“以民为本”的政治主张。他在海南写下《论商鞅》一文，借批评商鞅用过度、失度、无度的反人道、反人性的“流血刻骨”的强硬而残酷的办法来推行变法，并联系宋朝的社会现实，明褒司马光，暗贬王安石“阴夺民利”导致“破国亡宗”的严重后果。

研究发现粗壮女贞皂苷部分有很强地阻止人类低密度脂蛋白氧化的作用。阿克苷、异构化阿克苷和紫茎女贞苷A有保护人类LDL的作用，同时这三种苯乙醇苷抗Cu2+介导的氧化损伤作用呈剂量依赖性。阿克苷、异构化阿克苷和紫茎女贞苷A具有很强的保护人类LDL中维生素E的作用，此作用同样呈现剂量依赖性[18，43，45]。

粗壮女贞的水提物有明显的抗氧化作用，并呈剂量-效应依赖关系，粗壮女贞的醇提取物也能够剂量依赖性清除超氧自由基，抑制脂质过氧化，抑制AAPH介导的溶血。粗壮女贞的水溶部分和不溶于水的部分都有剂量依赖性地清除超氧自由基的作用，但水溶部分要比不溶水部分在抑制脂质过氧化、抑制AAPH介导的溶血方面效果更好[46]。

研究发现从总梗女贞分离所得的lipedoside A-I，lipedoside A-II，lipedoside B-V，and lipedoside B-VI能阻止人类LDL由Cu2+介导的氧化，与维生素E进行比较，同样具有DPPH清除作用，这四种苯乙醇苷类或单萜皂苷对人类LDL和维生素E氧化的抑制作用一定浓度范围内呈剂量依赖性[47]。

4.4 抗菌抗炎镇痛作用

粗壮女贞是广西民间常用中草药之一，当地人用于消肿、止痛、抗风湿、治疗疥疮、痹症等，也有研究报道用其挥发油及水煎液有抗炎作用[48-50]。粗壮女贞的干燥叶片4g，加水100 mL，100 ℃沸水浸泡15 min，重复三次，取上清过滤、煮沸、浓缩，制备成4%(w/v)浓度进行牙周致病菌抑制作用试验。采用试管内肉汤二倍稀释法，在微孔稀释板各孔内顺序加入二倍稀释药液50 μL，再分别加入48 h菌体培养物50 μL(细菌量80万个/mL)，同时做药物及细菌培养物对照试验。粗壮女贞的干燥叶片牙周致病菌抑制作用实验证明其茶浸液对放线菌和二氧化碳噬纤维菌有一定抑制作用，提示苦丁茶可能对龈上菌斑的抑制作用优于龈下菌斑，这种对龈上菌斑内细菌的抑制作用会影响龈下菌斑内细菌的生长繁殖，从而达到防治牙周病的效果。但其抑菌作用机制不甚清楚，推测可能与粗壮女贞苦丁茶所含鞣质为多酚类物质，具有收敛性，且与凝固细菌蛋白质有关，因此表现出一定的杀菌和消毒作用。粗壮女贞苦丁茶浸液的抑菌作用较扑龋香漱口液、洗必泰、四环素的抑菌能力弱，但苦丁茶没有明显副作用，可作茶饮，作为口腔用药安全方便，在龋齿病、牙周病的防治有进一步研究的必要。有研究证实，女贞叶有效部位皂甙有良好的抗炎和促进机体免疫功能的作用，其主要有效成分为熊果酸。

Wistar大鼠腹腔注射给药实验证明粗壮女贞提取物ELR有较好的抗炎镇痛作用，可能与减少5-HT、组胺等致炎因子释放或影响PGE合成和释放有关[52，53]。粗壮女贞醇、水提取液给小鼠口服，末次给药后30 min，i.p0.6%醋酸0.2 mL/只，记录小鼠出现扭体的时间和15 min内扭体次数，结果与生理盐水对照组比较，苦丁茶给药组可明显延长小鼠扭体时间的潜伏期(P<0.001)，减少扭体次数(P<0.05)。实验结果显示粗壮女贞苦丁茶给药后，与生理盐水对照组比较，动物舔足潜伏期明显延长(P<0.05)，舔足次数显著减少(P<0.05)。表明苦丁茶用药后有止痛作用，并可提高疼痛阈值[41]。

通过小鼠耳肿胀实验、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验及大鼠棉球肉芽肿实验证明，女贞叶总皂甙ZD小剂量对急性炎症(小鼠二甲苯耳肿)有良好的抑制作用，大剂量对亚急性炎症(大鼠角叉菜足跖肿和棉球肉芽肿)有较好治疗作用。

4.5 其他作用

4.5.1 免疫调节作用 通过实验证明木犀科女贞叶有效部位皂苷(ZD)具有对植物血凝素(PHA)作用从而刺激淋巴细胞转化的影响。用昆明种小鼠随机分组，分别给予1%阿拉伯胶溶液(对照)，ZD(110、220、440 mg/kg)，盐酸左旋咪唑(TLH，阳性对照药)，连续给药13 d，从第14 d起每日在小鼠左后腿肌注PHA10 mg/kg，连续3 d，第20 d剪尾采血涂片，瑞氏染色，双盲法由专人在油镜下计数转化的淋巴细胞和计算淋巴细胞转化率，ZD各剂量可提高PHA刺激的淋巴细胞转化率，与对照组相比，差别具有显著性(P<0.01)，且作用随剂量增加而增加，这说明ZD可提高机体特异性免疫功能的细胞免疫能力，促进淋巴细胞的转化[50]。

4.5.2止咳、祛痰、对支气管平滑肌的作用 女贞叶提取物分别给药1 200、600、300 mg/kg于ICR种系小鼠，发现女贞叶3个剂量组均能增加小鼠气管酚红排泌量，说明有祛痰作用；3个剂量组均能增加痰液量，说明对大鼠有促进排痰的作用。结果女贞叶提取物3个剂量组均可延长SO2致咳的潜伏期。目前熊果酸提取物大多为女贞叶所提取，用熊果酸进行对比性实验，结果表明，熊果酸是女贞叶提取物祛痰、镇咳的主要有效成分[54]。

4.5.3保肝作用 粗壮女贞的活性部位进行分离提取出得到了富含糖的组分，进行了对大鼠四氯化碳致急性肝损伤影响的研究。取雄性SD大鼠随机分为空白组，蒸馏水作为对照，益肝灵(25 mg/kg)，该组分(1.25、2.5、5 g/kg)，连续给药3 d，作为预防给药观察，末次给药后1小时，蒸馏水对照组腹腔注射 6 ml/kg橄榄油，各给药组腹腔注射6 mL/kg 含20%(v/v)CCl4的橄榄油。24h后将大鼠乙醚麻醉尾尖取血。结果证明该组分可有效降低四氯化碳致转氨酶升高，减轻肝脏脂肪堆积及坏死程度，具有稳定的保肝作用[53]。

5 讨论

小叶苦丁茶作为一种传统的药茶两用类饮品，在我国民间备受青睐。其气味微苦，性微寒，具有清热解毒、消肿止痛、抗风湿、烫伤，治疗头目疼痛、疔疮痹症等功效。小叶苦丁茶主要含有大量的萜类、苯丙素及黄酮类化合物，同时富含挥发油、有机酸及多糖类物质。现代药理研究表明其具有改善心脑血管系统，降糖降脂，抗菌消炎，抗氧化，止咳祛痰，减肥保肝等多种作用，且安全无毒。

小叶苦丁茶因其特殊的口感及丰富的药用功效，在我国南方具有悠久的应用历史。随着对其不断的开发，近年来，小叶苦丁茶已走出民间，以各种不同的代茶饮品及制品的形式在国内外市场上流通。

然而，对小叶苦丁茶的研究还不够深入，限制了其作为保健品及药品这一身份的推广及应用。需从其自身所具有化学成分的药理作用着手，深度开发其各种类型产品。从而使得这一别样茶瑰宝能更好地服务于人民健康。

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ResearchProgressonSmall-LeavedKudingcha

Yi Fan1,2, Peng Yong1,2*, Xu Li-jia1,2, Xiao Pei-gen1,2

(1.InstituteofMedicinalPlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicalScience,PekingUnionMedicalCollege,Beijing100093;2.KeyLaboratoryofBioactiveSubstancesandResourcesUtilizationofChineseHerbalMedicine,MinistryofEducation,Beijing100193)

In the present review, we summarized the application history of small-leaved kudingcha and the modern research progress as well. Small-leaved kudingcha is originated from the leave of severalLigustrumplants, which includingLigustrumrobustum(Roxb.) Bl.,LigustrumhenryiHemsl.LigustrumpriceiHayataandLigustrumsinensevar.myrianthum. It is one of the Chinese non-Camelliateas, and has been used in Southern region of China for a long history with the effects of detoxification, reducing swelling and pain, dehumidification, phlegm dissolving, losing weight and so on. Modern phytochemical research showed that the main constituents of small-leaved kudingcha were terpenoids, phenylpropanoids and flavonoids. And the pharmacological studies proved that the small-leaved kudingcha possess the activities such as improve cardiovascular system, hypoglycemic and hypolipidemic, , anti bacterial and anti-inflammatory, antioxidant, hepatoprotive and so on.

Small-leaved Kudingcha; non-Camellia teas; Chemical constituents; Pharmacology activities

2013-08-26)

国家自然科学基金面上项目(81274188)

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彭勇，Tel：(010)62894462，E-mail：ypeng@implad.ac.cn