正交试验法优选血管康袋泡茶的最佳服用方法*

陈耀章，张小华，李宪奎

(甘肃省中医院药剂科，甘肃兰州730050)

血管康袋泡茶是以槐米为主要成分制备的中药茶剂，具有降低血管脆性、恢复血管弹性、维持血管抵抗力、扩张冠状动脉、增加冠脉流量、降血压、降血脂、清除自由基的作用［1］，用于预防和治疗动脉粥样硬化、脑溢血、心脑血管疾病及高血压等病。现为我院制剂并广泛用于临床，长期服用效果良好，无不良反应。本实验以血管康袋泡茶不同用法的芦丁体外溶出度为考察指标，测定其不同服用方法时的体外溶出情况，为选择最佳的服用方法提供实验依据。

1 药品、试剂与仪器

血管康袋泡茶，为甘肃省中医院院内制剂，批准文号为甘药制字Z04000831，由甘肃省中医院提供。芦丁对照品，中国药品生物制品检定所提供，批号100080－200707；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。LAMBDA35型紫外 －可见分光光谱仪，美国PerKin Elmer公司产品；METTLER AE240电子分析天平，赛多利斯公司产品；HS6150型超声波清洗器，上海楚定分析仪器有限公司产品。

2 实验方法与结果

2.1 方法学考察

2.1.1 对照品溶液的制备

精密称定芦丁对照品0.121 4g，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解后定容至刻度。精密量取10.0 mL标准溶液，移至100 mL容量瓶中，加蒸馏水定容到刻度，作为芦丁对照品储备液备用。

2.1.2 供试品溶液的制备

取袋泡茶10 g，加水煎煮后，浓缩至50 mL，精密量取供试液5.0 mL，转移到50 mL容量瓶中，用蒸馏水定容到刻度，摇匀；精密量取 2.5 mL，置25 mL容量瓶中，加水至6 mL；加50 g/L的亚硝酸钠溶液1 mL，混匀，放置6 min；加100 g/L的硝酸铝溶液 1 mL，摇匀，放置 6 min；加氢氧化钠试液10 mL，加水至刻度，放置 15 min，备用［2］。

2.1.3 检测波长的确定

参照文献方法［3］，于200～800 nm波长范围扫描吸收光谱，确定在500 nm波长处有最大吸收；同时参照2010版《中国药典》一部，确定在500 nm测定吸收度。

2.1.4 标准曲线的绘制

精密量取 2.1.1 项下芦丁储备液 1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00 mL，分别置于 25 mL 容量瓶中；各加水至6 mL；加50 g/L的亚硝酸钠溶液1 mL，混匀，放置 6 min；100 g/L的硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min；加氢氧化钠试液10 mL，再加水至刻度，摇匀，放置15 min。按2010版《中国药典》一部附录VA紫外－可见分光光度法，在500 nm波长处测定吸光度(A)。以质量浓度为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=0.009 44+0.376 01X，(r=0.998 0)。见表1。

表1 不同对照品溶液所测吸收度

2.2 样品体外溶出度的测定

2.2.1 不同用法样品制备的正交试验

根据血管康袋泡茶的服用方法，取10g袋泡茶进行实验，根据表2的 L9(34)正交试验条件煎煮后，将各供试液浓缩至50 mL，精密量取5.0 mL，按照2.1.2项下供试品溶液的制备和测定方法进行比色测定。对加水倍数(A)、煎煮次数(B)及煎煮时间(C)3个因素进行考察［4］，以主要成分芦丁的体外溶出度作为评价指标，优选最佳服用方法。因素水平见表2。

表2 不同用法样品制备的正交试验表

2.2.2 正交试验结果与分析

对结果进行分析，水提取正交试验结果见表3，方差分析结果见表4。

表3 水提取工艺正交试验结果

表4 正交试验方差分析表

直观分析表明：对芦丁体外溶出影响因素程度为B＞A＞C，即影响程度最大的是煎煮次数，其次是加水倍数，再次是提取时间。由方差分析可得：以芦丁体外溶出度为指标，提取次数对其有显著影响，加水倍数和提取时间对观察指标的影响较小。综合分析，从实际出发，为了服用方便，同时节省人力物力，确定服用方法条件为：A1B3C1，即加8倍量水，煎煮3次，每次5 min。

2.3 验证试验

为验证实验的可靠性，在上述优选的条件下，对3 个批次(20120312，20120315，20120322，n=3)的样品进行了试验，芦丁的平均含量分别为0.564，0.524，0.598 mg/g。验证试验表明该优选工艺稳定可行。

3 讨论

芦丁是一种具有广泛生理活性的天然植物药有效成分，可用于预防与治疗心血管疾病。由于疗效确切，芦丁在国内外市场上的需求呈逐年上升的趋势［5］。目前，芦丁主要从槐米、苦荞等含量丰富的植物中提取获得。血管康袋泡茶是以槐米为主要原料精制而成的院内制剂。故本文将其主要成分芦丁的体外溶出作为指标考察，实验采用正交法对其最佳服用方法进行筛选。

本文采用正交试验法优选出的血管康袋泡茶的服用方法，验证试验结果显示，该方法合理、稳定可行。此为其优选最佳服用方法提供了理论依据。

［1］罗燕梅，李喜香.血管康袋泡茶抗氧化机理探讨［J］.时珍国医国药，2006，17(1)：36.

［2］罗燕梅，焦正花.RP－HPLC法测定血管康袋泡茶中芦丁的含量［J］.中国中医药信息杂志，2007，14(7)：52－53.

［3］国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部［M］.北京：中国医药科技出版社，2010，333.

［4］屈蓉.精制银翘解毒片中对乙酰氨基酚的溶出度测定［J］.中国药房，2012，23(7)：613 －615.

［5］颜军，甘亚，苟小军，等.星点设计－效应面法优化槐米中芦丁提取工艺［J］.中药材，2011，34(4)：628 －631.