“乳菌宝”益生菌剂对断奶仔猪肠道生理生化指标的影响

王 华，张淑梅，钟颖婷，林标声，沈绍新*，邱丰艳

（1.龙岩学院生命科学学院，福建 龙岩 364012；2.福建省预防医学与兽医生物技术重点实验室，福建 龙岩 364012）

肠道健康对断奶仔猪生产性能的影响极为显著[1]，而益生菌剂具有良好的生物学功能，能调节动物消化道微生物菌群的区系平衡，改善动物体内消化酶活性，促进食物消化吸收，提高饲料的利用率，促进仔猪生长发育[2]。益生菌剂还具有调节仔猪机体抵抗疾病能力，减少猪粪排出、改善饲养环境、降低生猪饲养污染等优点[3]，对解决日益严重的抗生素耐药性和药物残留问题起到重要作用[4-6]。

本文通过研究断奶仔猪日粮中添加不同浓度的含高活性、高营养物质的乳酸菌、酵母菌、维生素的“乳菌宝”益生菌菌剂，考查其对仔猪排泄粪便、肠道内容物的氨浓度、pH、消化酶活性、微生物总数、腹泻指数等生理生化指标影响，探讨益生菌剂对断奶仔猪肠道作用机理和影响作用，为其在仔猪生产中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 益生菌剂与培养基

“乳菌宝”，市场购买，含乳酸菌、酵母菌等益生菌和单体维生素、载体等，每千克产品含：乳酸菌1.0×1011cfu·mL-1、酵母菌1.5×1012cfu·mL-1、VA 2.4×106IU、VD34.5×105IU、VE 6 400 mg、VK 520 mg、VB1570 mg、VB22 650 mg、VB6650 mg、VB128 mg。

微生物培养基[5]：细菌总数：平板计数琼脂（PCA）培养基；大肠杆菌，麦康凯培养基；沙门氏菌：SS琼脂培养基；乳酸菌：MRS培养基；酵母菌：YPD培养基。

1.2 试验猪场

福建省龙岩市龙马原种猪场。

1.3 动物与设计

实验动物：选取体重（约8～10 kg）相近，健康状况良好的杜×长×大三元杂交断奶仔猪120头，公母各半，随机分为4组，每组10头，3个重复。其中一组为对照组，饲喂基础日粮；另三组为试验组：Ⅰ组饲喂基础日粮+0.1%益生菌剂；Ⅱ组饲喂基础日粮+0.15%益生菌剂；Ⅲ组饲喂基础日粮+0.2%益生菌剂。试验期间，仔猪自由采食与饮水，做好饲养环境卫生和疾病防控。试验时间28 d，试验开始和结束时分别测定各组仔猪的体重，记录所消耗的饲料总量，分析仔猪的日均采食量、日均增重及料肉比。试验期间注意观察和记录仔猪健康状况，于第28天试验结束时的当天早上8点前采集各组样品，用于生理生化指标和微生物数量的测定。

1.4 样品采集与预处理

粪便及肠道内容物的取样[6]：分别从各试验组中采集新鲜粪便、每组随机抽取4头试验仔猪的盲肠、结肠、十二指肠、空肠和回肠的肠道内容物，-20℃密封冷冻保存待用。其中盲肠、结肠肠道内容物用于测定氨浓度和pH；十二指肠、空肠和回肠肠道内容物用于测定肠道酶活力和绒毛长度；盲肠、回肠和粪便用于测定微生物总数。

肠道内容物酶活力测定溶液的准备：将各肠道内容物减碎，取10 g样品用0.14 moL·L-1KCL溶液溶解，匀浆，定容至50 mL，4℃4 000 r·min-1离心10 min，取上清液-20℃低温保存待用。

1.5 样品测定[7-8]

氨浓度测定：纳氏试剂比色法测定。pH测定：pH仪测定（型号FE.20）。

消化酶活性测定：淀粉酶活性采用碘-淀粉比色法测定；总蛋白酶活性采用福林-酚试剂法测定。

微生物总数测定：采用平板菌落计数法测定所采集样品的细菌总数、大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸菌和酵母菌。

腹泻指数：腹泻指数的统计方法及评分标准参照Barnet等[7]方法，硬粪便为1级，严重腹泻，不成形，水分高的为5级。

1.6 数据分析

采用SPSS 10.0 One-Way ANOVA中Waller-Duncan多重比较对所得的数据进行分析。

2 结果与分析

2.1 益生菌剂对断奶仔猪生长性能的影响

益生菌剂对断奶仔猪生长性能的影响见表1。结果表明，与对照组相比，添加不同浓度益生菌剂的三个试验组的采食量、日增重、料重比均优于对照组，其中试验Ⅱ、Ⅲ组各项指标差异达到显著水平（P＜0.05)，但试验Ⅱ、Ⅲ组间各项指标差异不显著（P＞0.05)，说明基础日粮中添加0.15%益生菌剂（试验Ⅱ组）即可促进仔猪生长，且对仔猪生长影响效果显著。

2.2 益生菌剂对断奶仔猪肠道氨浓度及pH影响

pH影响动物体内消化环境，较低的pH有利于有益菌群生长，而病原微生物的生长则受到抑制。而肠道内的氨对动物有毒副作用，会破坏肠细胞表明，肠道内氨浓度的降低，有利于仔猪机体健康生长[5]。

益生菌剂对断奶仔猪肠道氨浓度及pH影响见表2。结果表明，添加不同浓度益生菌剂的3个试验组的肠道（盲肠、结肠）氨浓度及pH均与对照组差异显著（P＜0.05），说明添加益生菌剂能降低仔猪肠道氨浓度及pH的作用，且效果显著。

表1 益生菌剂对断奶仔猪生长性能的影响Table1 Effect of probiotics on growth performance of weaned piglets

表2 益生菌剂对仔猪肠道氨浓度、pH的影响Table2 Effect of probiotics on intestinal ammonia concentration and pH of weaned piglets

2.3 益生菌剂对断奶仔猪肠道酶活性的影响

益生菌剂对断奶仔猪肠道酶活性的影响见表3，结果表明，与对照组相比，添加不同浓度益生菌剂的3个试验组十二指肠、空肠的淀粉酶、总蛋白酶活性均显著提高（P＜0.05），但3个试验组组间差异均不显著（P＞0.05）；回肠的淀粉酶、总蛋白酶活性提高不显著（P＞0.05)，但也表现出更好的趋势性。表明益生菌剂中添加的乳酸菌、酵母菌等能分泌出相应的淀粉酶、蛋白酶，提高仔猪肠道消化酶的活性，帮助仔猪肠道消化，促进物质吸收。

表3 益生菌剂对仔猪肠道淀粉酶、总蛋白酶活性的影响Table3 Effect of probiotics on intestinal amylase and total protease activity of weaned piglets

2.4 益生菌剂对断奶仔猪肠道绒毛高度的影响

仔猪断奶后，饮食由液体乳汁变成固体饲料，其绒毛长度会受到固体物质的磨损而变短，影响仔猪的消化和吸收能力[10]。添加不同浓度的益生菌剂能改善受损肠粘膜的修复，提高仔猪肠道绒毛高度，从而促进小肠的发育成熟，促进其物质吸收。结果见表4。结果表明，3个试验组的十二指肠、空肠与回肠的绒毛高度均比对照组试验有所提高，其中试验Ⅱ、Ⅲ组与对照组的差异达到显著水平（P＜0.05）。

2.5 益生菌剂对断奶仔猪肠道、粪便微生物数量的影响

益生菌剂对断奶仔猪肠道、粪便微生物数量的影响结果见表5。

表4 益生菌剂对仔猪肠道绒毛高度的影响Table4 Effect of probiotics on intestinal villus height of weaned piglets（μm）

表5 益生菌剂对仔猪肠道、粪便微生物数量的影响Table5 Effect of probiotics on intestinal and dejecta microbial population of weaned piglets

由表5可知，添加不同浓度益生菌剂的3个试验组盲肠、回肠、粪便的致病菌（大肠杆菌、沙门氏菌数量要明显小于对照组，其中盲肠、粪便中的数量差异达到显著水平（P＜0.05)；各样品有益菌乳酸菌、酵母菌的数量也明显高于对照组，尤其是当益生菌添加量达到0.2%的Ⅲ组，其数量差异均达到显著水平（P＜0.05）。试验表明，添加乳酸菌、酵母菌的益生菌剂能起到改善仔猪肠道微生物区系平衡，增加有益菌数量、抑制有害致病菌生长的作用。

2.6 益生菌剂对断奶仔猪腹泻的影响

益生菌剂对断奶仔猪腹泻的影响见表6，结果表明：与对照组相比，添加不同浓度益生菌剂的3个试验组的腹泻情况均有所改善，其腹泻指数均降低，且均达到显著差异（P＜0.05）。说明益生菌剂对改善仔猪肠道平衡，提高仔猪肠道健康，减少腹泻有显著作用。

表6 益生菌剂对仔猪腹泻的影响Table6 Effect of probiotics on diarrhea of weaned piglets

3 讨论与结论

本文研究益生菌剂改善仔猪肠道健康、提高采食量、促进生长的作用机制，在断奶仔猪基础日粮中添加0.15%益生菌剂即可促进仔猪生长。与对照组组比，添加0.5%、0.1%、0.15% 3个不同浓度益生菌剂的试验组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组），其盲肠、结肠肠道氨浓度、pH下降显著（P＜0.05），十二指肠、空肠的淀粉酶、总蛋白酶活性提高显著（P＜0.05)、但回肠的淀粉酶、总蛋白酶活性提高不显著（P＞0.05)。三个试验组的肠绒毛高度均比对照组有所提高，其中试验组Ⅱ、Ⅲ组差异达到显著水平（P＜0.05)。三个试验组的盲肠、回肠、粪便的致病菌数量均比对照组降低、有益菌数量增多，其中试验组Ⅲ组各微生物数量与试验组相比差异均达到显著水平（P＜0.05)。3个试验组的腹泻指数均比对照组显著降低（P＜0.05)，仔猪肠道健康得到改善。

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