实验用大白鼠蛲虫感染状况调查

王 菲，曹淑祯，崔立云，张霄霄，杨毅梅

（大理学院基础医学院，云南大理 671000）

实验动物被誉为“活的试剂”〔1〕，常用于医学、药学、生物学、兽医学等的研究。动物感染寄生虫后，除了被夺去营养影响生长、发育和繁殖外，还会产生机械损害、毒性损害等，使动物机体的生理、生化及免疫学指标发生变化，再用于精密的现代生命科学研究时，有可能干扰实验的正常结果，也可能降低实验的可重复性、准确性及可信度。有些鼠类寄生虫还可传染给人〔2〕。这就要求我们对实验动物质量进行控制，而质控的重点就是对其携带的微生物和寄生虫进行控制〔1〕。

为初步了解某校实验大鼠寄生虫感染情况，我们对部分开放系统饲养的大白鼠做了调查。现将结果报道如下：

1 材料和方法

1.1 材料 SD大白鼠，自制颗粒饲料开放饲养于有不锈钢丝网盖的塑料盒中，垫料为清洁刨木屑，每天定量添加饲料和清洁饮水，每周更换塑料盒、垫料。

1.2 方法 按国家质量技术监督局检验标准〔3〕中“对于100～500只生产繁殖单元大鼠，取样数量不能少于10只”要求进行取样。本次共随机抽取大白鼠69只，其中2月龄大白鼠33只，雄性14只，雌性19只，离乳大白鼠（1月龄）36只，雄性19只，雌性17只。每只大鼠用小动物专用秤称重（二月龄大白鼠体重48～138 g，平均90.8 g；初离乳大白鼠28～51 g，平均40.9 g）。提起大鼠尾部，收集新鲜粪便1～3颗，分别装入一次性带盖塑料管中，用记号笔在管壁记录性别、体重等。带回实验室采用生理盐水直接涂片法〔4〕检查，每份粪便涂两张涂片，当日检完。

2 结果

2.1 大白鼠蛲虫感染状况 69只大白鼠，检出蛲虫鼠17只，阳性率25%。其中雄性31只，阳性10只，阳性率32%；雌性36只，7只检出幼虫，阳性率19%。雄性和雌性大白鼠阳性率的差异无统计学意义。见表1。

表1 雌雄大白鼠鼠蛲虫粪检情况

2月龄大白鼠33只，8只检出幼虫或成虫，阳性率24%。1月龄大白鼠36只，9只检出幼虫，阳性率25%，差异无统计学意义。见表2。

表2 不同月龄大白鼠鼠蛲虫粪检情况

2.2 虫种鉴定 测量虫卵20个，见图1，平均大小82.6 μm×31.9 μm，与国家标准〔4〕中鼠管状线虫（Syphacia.muris）75 μm×29 μm类似。成虫长约1.4 mm，宽约126 μm，颈翼膜清晰，食道球呈圆形，阴门位置靠近身体前端，尾部尖细，据文献描述〔5-6〕，初步判定本次检到的虫体为鼠管状线虫。另外我们还在部分鼠粪内观察到了雌性成虫排卵的整个过程，见图2，尽管已有文献做过描述〔7〕，但不如图片直观。图2中可以清晰看到雌虫阴门突出，镜下虫卵随子宫收缩不断冲击阴门并排出。粪便生理盐水涂片法检查整个涂片，虫体有1-6条不等。

图1 鼠管状线虫虫卵（40×10）

图2 排卵中的雌性成虫（10×10）

3 讨论和建议

科研常用的实验动物有大白鼠、小白鼠、地鼠等，根据不同目的，选用适宜的动物。此次调查大白鼠蛲虫感染率较文献报道〔8〕低，可能与每周更换垫料和笼具并严格消毒以及本次调查虫种单一有关。鼠蛲虫分隶2属（无刺属Aspiculuris及管状属Syphacia）4种（四翼无刺线虫A.tetraptera、隐藏管状线虫S.Obvelata、鼠管状线虫S.muris及地鼠管状线虫S.mesocriceti）。

Syphacia muris宿主为实验用大鼠，生长于结肠与盲肠肠道黏膜，一般并不引起临床症状，严重感染时可引起下痢、生长迟缓、皮毛粗刚，肠阻塞、肠套叠，使动物品质低落且不适于营养学、免疫学、血液学研究。生活史为直接型，虫卵直接或间接被动物食入而造成感染，进入鼠体后以其头部附着于肠粘膜上。10～11 d后，发育成熟的雌虫与雄虫交配后爬到肛周皮肤产卵，故在肛周用透明胶纸法能查到虫卵。虫卵可在空气中漂浮，并可在动物房条件下存活数周。蛲虫的虫荷数与动物的年龄、性别和免疫状态有关。对鼠蛲虫感染的控制，以预防为主，定期进行健康监测，严格消毒，保证饲料与垫料的清洁，增加换笼的频度都可以有效的控制蛲虫症的感染。85℃干烤20 min以上或70%酒精全面喷洒才可完全杀灭虫卵。一般不主张对实验动物用药治疗。彻底净化时，可用肠虫清，治疗量为10 mg/只，加250 mL水，3 d用完，2周为1疗程，连用3个疗程〔9〕。

国家标准规定〔3〕在实验鼠的等级分类中取消普通级，而分为清洁级、无特定病原体级（SPF）和无菌级。清洁级鼠中必须排除体外寄生虫、弓形虫和全部蠕虫感染，但文献回顾发现清洁级、SPF级均有不同程度的寄生虫感染〔10-12〕。因为安全防护不到位，已有实验动物致人感染的报道〔13-15〕。医药院校学生进行动物实验时，应充分认识到动物安全的重要性。此外，部分文献用SPF级鼠建立寄生虫感染动物模型等实验时〔16-17〕未见有关对实验用鼠进行体检的描述。笔者认为，实验动物的质量不仅要靠动物房工作人员控制，也需要广大科研人员积极参与，发现问题及时沟通，而且实验前对动物进行体检了解其健康状态对于提高实验的准确度、严谨性、可重复性还是十分有帮助的。

〔1〕李学勇，李根平，贺争鸣，等.2006—2008年北京地区常用实验动物微生物和寄生虫检测结果分析〔J〕.实验动物科学，2009，26（5）：35-38.

〔2〕Tanideh N，Sadjjadi SM，Mohammadazadeh T，et al.Helminthic Infections of Laboratory Animals in Animal House of Shiraz University of Medical Sciences and the Potential Risks of Zoonotic Infections for Researchers〔J〕.IRCMJ，2010，12（2）：151-157.

〔3〕GB14922.1-2001，实验动物寄生虫学等级及监测方法〔S〕.

〔4〕GB/T18448.1～18448.10-2001，实验动物寄生虫学检测方法〔S〕.

〔5〕National Research council.Infectious Diseases of Mice and Rats〔M〕.Washington,D.C.:National Acadmies Press，1991：156-158.

〔6〕Stahl W.Studies on the life cycle of syphacia muris，the rat pinworm〔J〕.The Keio Journal of Medicine,1963，12：55-60.

〔7〕邱华峰，吴食.鼠管状线虫虫卵孵化过程观察〔J〕.中国寄生虫病防治杂志，1990，3（4）：301.

〔8〕刘伟铭，洪花，刘兆铭.啮齿类实验动物蛲虫活虫体的简易收集法〔J〕.白求恩医科大学学报，2000，26（2）：141.

〔9〕陈国怀，宁磊，景志忠，等.兰州地区实验动物寄生虫携带情况调查〔J〕.中国兽医科技，1997，27（12）：26-27.

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