CTGF在急性氨中毒患者血清中的表达及意义

张洪明 何 平 陈 红

1.沈阳市第九人民医院，辽宁沈阳 110024；2.中国医科大学盛京医院，辽宁沈阳 110024；3.沈阳工业大学，辽宁沈阳 110024

职业性急性氨中毒是在职业活动中，短时间内吸入高浓度氨气后对呼吸道粘膜产生强烈的刺激作用，可表现为急性化学性气管、支气管炎，可出现喉头水肿、肺泡水肿或肺间质。损伤后的气道周围炎症细胞浸润，释放多种炎症介质,引起的以呼吸系统损害为主的全身性疾病，常伴有眼和皮肤灼伤,严重者可出现急性呼吸窘迫综合征，可以引起支气管、肺的永久性损害[1]。近年发现的结缔组织生长因（Connective －tissue growth factor ，CTGF）具有促进胞外基质合成、成纤维细胞有丝分裂等功能，在肺、肝、肾等器官纤维化过程中具有重要作用[2]，但是否参与急性氨中毒的炎症反应尚不清楚。本实验通过观察CTGF在急性氨中毒患者血清的表达变化，旨在初步揭示CTGF在急性氨中毒病理过程中的作用。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2009年我市发生16人氨气中毒事故，随后7例男患、9例女患均于该院进行抢救，年龄15～31岁，平均（25.2 ±5.2）岁，既往无病史。16例氨中毒患者按国家“职业性急性氨中毒诊断标准”分级[1]，刺激反应11例及轻度氨中毒组5例。对照组16例为健康者，从该院体检中心募集，其中男7例，女9例，年龄19～31岁，平均年龄（27.3±6.4）岁。

1.2 方法

氨中毒患者入院后，抽取3 mL空腹静脉血,放入试管中常温凝固后离心（3000转/分）10 min，分离血清,当日测定。正常对照组同上处理。ELISA法检测人血清CTGF，操作流程按说明书进行，试剂盒购自上海森雄生物试剂公司，使用sunrise（奥地利）全自动酶标仪检测，在波长450 nm测得O D值，根据样品O D值及标准曲线计算待测样品，操作流程按说明书进行。

1.3 统计学处理

统计学分析采用SPSS 11．0统计软件进行，血清CTG F水平以（±s）表示，两样本均数比较采用t检验，P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

氨中毒患者CTGF的峰值水平均比正常对照组高，差异有统计学意义（P ＜0.05）；如表1所示。

表1 病例组与对照组血清 CTGF含量比较

由表1显示接触氨气患者血清CTGF浓度均比对照组高，差异有统计学意义。CTGF随病情加重含量升高。

3 讨论

氨气属于碱性高溶解度气体，具有强烈的刺激性和腐蚀性，接触氨气急性期轻则引起皮肤及黏膜的刺激症状，重则引起肺部损伤及氨中毒[1]。刺激性气体导致肺泡1型细胞、内皮细胞损伤，肺泡内液体渗出，通气血流比例失调，气体交换功能下降，2型细胞增生肥大修复损伤的1型细胞，同时引起肺间质炎症改变并导致肺纤维化。肺纤维化是多细胞、多因子共同参与，经过成纤维细胞异常增殖和转化，导致肺组织结构重建失败的结果[3]。在参与肺纤维化的细胞因子中，CTGF是近年发现的一种新的可刺激成纤维细胞增殖和分泌胶原的生长因子[4]。本研究显示氨中毒病例组的CTGF水平高于对照组，提示CTGF参与了氨中毒的病情进展，与氨中毒纤维化的发生发展可能相关。在急性氨中毒发病过程中CTGF上升的机制尚不清楚。已有研究表明TGF－β1是一种作用广泛的生长因子，在某些炎症过程中过度表达，可能诱导其下游因子CTGF表达上调，并由后者作为下游效应介质作用于结缔组织和成纤维细胞，刺激成纤维细胞增殖和细胞外基质（ECM）合成最终导致组织器官纤维化[5]。

以往氨中毒诊断分级标准主要依靠皮肤、眼、呼吸系统临床表现及胸部X线征象[6]。本实验中诊断为刺激反应患者中只有2例CTGF值在定诊急性氨中毒患者的结果范围中，分别存在肝功能改变和CK升高，余诊断急性轻度氨中毒患者CTGF水平均高于刺激反应者。氨中毒是一个对多系统损伤的疾病。CTGF存在于心、脑、肺、肝、肾、子宫、胰腺、结缔组织等多种组织器官，其中肾脏含量最高。成纤维细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞、肾小球系膜细胞（MC）和某些肿瘤细胞等均可合成CTGF[7]。不同种类细胞产生的CTGF的功能不尽相同。其通过自分泌、旁分泌途径发挥下列生物学功能：①促进细胞增殖、分化。②介导细胞黏附和迁移。③提高细胞外基质(ECM)含量，诱导基质沉积，进而促进器官纤维化。④其他：促进血管形成以及胚胎发育，诱导细胞凋亡，创伤修复等。正常情况下体内的CTGF表达很低或无表达。在病理状态下，CTGF的过度表达则与某些纤维化或增殖性疾病的发生密切相关，如肾纤维化、动脉粥样硬化、肺纤维化、肝纤维化等[8]。CTGF测得值可能整体上反应损伤的严重程度。提示临床上应用血清CTGF含量的变化，对急性氨中毒的诊断、损伤程度评价可能有一定的参考价值。但其在其作用的信号转导途径、作用发生的阶段、早期干预能否预防氨中毒的损伤以及如何延缓其进展尚待进一步研究。

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