HPLC测定不同批次藏茵陈胶囊中齐墩果酸的含量

王有明

(青海鲁抗大地药业有限公司，青海 西宁 810000)

藏茵陈为传统藏药，其主要功能为清热消炎、利胆退黄，主治各种热病，尤其对肝胆实热性疾病具有独特疗效［1－2］。藏茵陈胶囊的原料主要为川西獐牙菜 Swertia mussotii Fracnch，川西獐牙菜分布在青海、云南、四川、西藏等地。生长于海拔3500～3900m的山坡、河滩地中。全草入药;清肝利胆，退诸热［3］。本文采用超声提取法对藏茵陈胶囊中齐墩果酸进行提取，采用HPLC对不同批次藏茵陈胶囊中齐墩果酸进行了含量测定。

1 实验部分

1．1 仪器与试剂:Agilent高效液相色谱仪;G1379A在线脱气机;G1311A四元泵;G1329A标准型自动进样器;G1316A柱温箱;Agilent1200色谱工作站;AG204电子分析天平;超声提取仪。

齐墩果酸对照品(110709－200505，中国药品生物制品检定所);乙腈(色谱纯，山东禹王试剂公司);水为纯净水，其余试剂为分析纯。实验中藏茵陈胶囊为青海鲁抗大地药业有限公司提供。

1．2 色谱条件及系统适用性试验:色谱柱Agilent C8柱(250 mm ×4．6 mm，5μm);流动相:乙腈 － 水(80:20，v/v);流速为1．0 mL/min，柱温:40 ℃;检测波长:210 nm;理论塔板数按齐墩果酸峰计算不低于3000。

1．3 对照品溶液的制备:精密称取齐墩果酸对照品4．08mg置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀，得到浓度为0．408 mg/mL－1的齐墩果酸对照品溶液，过0．45μm的微孔滤膜过滤后作为对照品溶液，对照品色谱图如图1。

1．4 供试品溶液的制备:取藏茵陈胶囊内容物约0．8g，精密称定，置100 mL平底烧瓶中，加入30 mL80%乙醇，置于超声提取仪中，超声提取20 min，冷却至室温，滤过，滤液收集到50mL的容量瓶中，用80%乙醇定容至刻度，摇匀后，0．45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液，供试品色谱图如图2。

图1 齐墩果酸对照品色谱图

图2 齐墩果酸对照品色谱图

(其中A为齐墩果酸)

2 结果与讨论

2．1 线性关系考察:分别精密吸取上述对照品溶液2，4，6，8，10μL，在上述色谱条件依次进样，以进样的对照品含量(X)为横坐标，相当应峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为:Y=384．3X －0．4，r=0．9999。

2．2 精密度实验:分别精密吸取上述对照品溶液8μL，按上述色谱条件连续进样5次，记录齐墩果酸的峰面积与出峰时间。计算得到峰面积RSD为0．25%，峰时间RSD为1．24%。表明仪器精密度良好。

2．3 重复性实验:按样品溶液制备方法处理同一藏茵陈胶囊样品5份，批号为20100801，各吸取10μL，按上述色谱条件测定，记录齐墩果酸的峰面积。计算出齐墩果酸含量，计算RSD为0．83% ，表明实验方法的重复性良好。

2．4 稳定性实验:按样品溶液制备方法处理样品批号为20100801 藏茵陈胶囊，分别在h，5h，10h，15h，20h，24h，按上述色谱条件测定，记录齐墩果酸的峰面积，计算样品中齐墩果酸含量。结果表明，计算齐墩果酸峰峰面积稳定，计算RSD为0．26%，表明样品溶液至少在24 h内稳定。

2．5 加样回收率实验:采用加样回收法，精密称取已知含量的藏茵陈胶囊适量，批号为藏茵陈胶囊20120301，分别精密加入一定量的齐墩果酸对照品，在上述色谱条件下，平行做5组，结果测得其平均回收率为101．7%，RSD为1．55%。数据见表1。

表1 加样回收率实验

2．6 样品测定:按样品溶液制备方法处理10批，按上述色谱条件测定，记录齐墩果酸的峰面积。计算出齐墩果酸含量，数据见表2。

表2 藏茵陈胶囊中齐墩果酸的含量

3 讨论

本实验流动相采用乙腈:水(80:20，v/v)，该方法能够使藏茵陈胶囊中的齐墩果酸得到较好的分离效果，而且出峰快，时间短，峰对称性好。现用药典测定藏茵陈胶囊中齐墩果酸含量方法是采用“薄层扫描法”，液相方法测定藏茵陈中齐墩果酸含量准确方便，为藏茵陈胶囊质量标准的修订提供了理论依据。

本实验测定了10批藏茵陈胶囊中齐墩果酸的含量，藏茵陈胶囊中齐墩果酸的含量均高于药典中规定的含量，说明这10批藏茵陈胶囊符合国家药典要求。

［1］中国科学院西北高原生物研究所．青海经济植物志［M］．青海，西宁:青海人民出版社1987．646

［2］杨永昌．藏药志［M］．青海人民出版社，1991，III

［3］中国科学院西北高原生物研究所．藏药志(修订版)［M］．第3版．西宁:青海人民出版社，1996，114－116