大豆黄酮在蛋鸡饲料中的安全性评价：生产性能、蛋品质和繁殖器官发育

蔡 娟 顾 欢 常玲玲 邹剑敏 施寿荣＊

（1.扬州大学动物科学与技术学院，扬州 225009；2.中国农业科学院家禽研究所，扬州225125）

大豆黄酮（daidzein，DA）属异黄酮类植物雌激素，广泛存在于豆类、牧草、谷物等天然植物中。其化学结构与17β－雌二醇类似，生物测定它的雌激素活性约占17β－雌二醇的10－2～10－3倍［1］。近年来，大豆黄酮在人医临床保健及动物饲料添加剂方面越来越受到重视，研究发现，它具有抗氧化、抗癌、降低胆固醇、提高机体免疫力等生物学功能［2－4］。在家禽上的研究结果表明，大豆黄酮对家禽的生产性能有很好的促进作用，添加5～10mg/kg大豆黄酮可以提高蛋鸡、蛋鸭、鹌鹑的产蛋率，降低料蛋比，增加平均蛋重等［5－8］。但其长期高剂量添加是否具有副作用及关于其安全性问题目前尚未见报道。因此，本试验旨在研究饲粮中长期添加高剂量大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质和繁殖性能器官发育安全性的影响，从而为饲料生产企业和养殖场（户）科学使用大豆黄酮提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料与动物

大豆黄酮（4，7－二羟基异黄酮，含量＞97.5%）。试验动物为56周龄海兰褐蛋鸡。

1.2 试验设计

选取体重、产蛋率相近的56周龄海兰褐蛋鸡640只，随机分为4组，每组8个重复，每个重复20只鸡。Ⅰ组（对照组）饲喂基础饲粮，试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲喂在基础饲粮中分别添加10（最高推荐有效量）、50（5倍最高推荐有效 量）、100mg/kg（10倍最高推荐有效量）大豆黄酮的试验饲粮。预试期3周，试验期12周，从59周龄到70周龄。基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet（air－dry basis） %

1.3 饲养管理

试验鸡采用3层阶梯式笼养，每天定时饲喂2次（08：00和15：00），自由采食及饮水。各组饲养管理条件保持完全相同，参考美国海兰公司推荐的饲养方法饲养管理。

1.4 指标测定及方法

1.4.1 生产性能

每天15：00准时收蛋，以重复为单位每天记录产蛋数、蛋重，每周统计耗料量和和鸡只死亡数，计算全期产蛋率、采食量、料蛋比、产蛋量。

1.4.2 蛋品质

在试验开始、第4周、第8周、第12周（试验结束时），每个重复选取8只蛋测定蛋品质，包括蛋重、蛋壳颜色、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋形指数、蛋白高度、蛋黄颜色以及蛋壳、蛋白、蛋黄的重量等参数。测定仪器包括多功能蛋品质测定仪、蛋壳厚度测定仪、蛋壳强度测定仪（以色列ORKA公司）、CM－2300d分光测色计（日本 MINOLTA公司）、电子数显卡尺（广陆数字测控股份有限公司）。

1.4.3 繁殖器官发育

将鸡颈部放血致死，称取输卵管、子宫、卵巢、小黄卵泡等脏器重量并计算各器官与体重的比值；量取输卵管长度；数排卵前卵泡（直径＞10mm）、小黄卵泡（直径＞4～10mm）、大白卵泡（直径2～4mm）个数。

1.5 数据处理

数据经Excel 2003整理后，用SPSS 16.0统计软件进行分析，单因子方差分析（one－way ANOVA）检验组间差异显著性。P＜0.05表示差异显著。

2 结 果

2.1 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响

由表2可知，大豆黄酮显著影响了全期蛋鸡死亡率（P＜0.05）。全期未见鸡只出现不适症状。

大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡产蛋率、采食量、产蛋量和料蛋比的影响见表3、图1、图2、图3、图4。大豆黄酮显著影响全期平均产蛋率、产蛋量和料蛋比（P＜0.05），且产蛋率（P＝0.029）、产蛋量（P＝0.003）和料蛋比（P＝0.019）与大豆黄酮添加量呈二次曲线关系；大豆黄酮对采食量没有显著影响（P＞0.05）。从第4周开始，50mg/kg组的产蛋率、产蛋量和料蛋比与对照组维持在显著水平（P＜0.05）。平均产蛋率、产蛋量和料蛋比（y）与大豆黄酮添加量（x）的二次曲线关系分别为：y＝83.994＋0.145x－0.001x2、y＝54.282＋0.093x－0.001x2、y ＝2.181－0.004x ＋0.000 033 6x2，依此模型推算，达到最佳平均产蛋率、产蛋量和料蛋比的大豆黄酮添加量分别为72.50、46.50和59.52mg/kg。

表2 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡死亡率的影响Table 2 Effects of daidzein on mortality of hens during the late laying period（n＝8） %

表3 大豆黄酮对产蛋后期生产性能的影响Table 3 Effects of daidzein on performance of hens during the late laying period（n＝8）

图1 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡产蛋率的影响Fig.1 Effects of daidzein on egg production of hens during the late laying period

图2 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡采食量的影响Fig.2 Effects of daidzein on feed intake of hens during the late laying period

图3 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡产蛋量的影响Fig.3 Effects of daidzein on egg mass of hens during the late laying period

图4 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡料蛋比的影响Fig.4 Effects of daidzein on ratio of feed to egg of hens during the late laying period

2.2 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响

由表4可知，大豆黄酮仅对蛋壳厚度、蛋壳比例和蛋壳强度有显著影响（P＜0.05），对其余指标均没有显著影响（P＞0.05）。从第4周开始，蛋壳厚度受到大豆黄酮的显著影响（P＜0.05，线性P＜0.05），随着大豆黄酮添加量的升高而升高。从第8周开始，蛋壳比例和蛋壳强度受到大豆黄酮的显著影响（P＜0.05，线性P＜0.05），随着大豆黄酮添加量的升高而升高。

表4 大豆黄酮对产蛋后期鸡蛋蛋品质的影响Table 4 Effects of daidzein on egg quality of hens during the late laying period（n＝8）

续表4

2.3 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡繁殖器官的影响

由表5可知，大豆黄酮仅对输卵管指数有显著影响（P＜0.05，线性P＜0.05），输卵管指数随着大豆黄酮添加量的升高而降低；其他指标组间差异均不显著（P＞0.05）。小黄卵泡数和大白卵泡数在数值上呈现出随着大豆黄酮添加量升高而先升高后降低的趋势。

表5 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡繁殖器官的影响Table 5 Effects of daidzein on reproductive organs of hens during the late laying period（n＝8）

3 讨 论

3.1 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响

大豆黄酮具有抗氧化、提高机体免疫功能的作用［9］。朱新建等［10］研究发现，饲粮中添加大豆黄酮可在一定程度上提高老龄蛋鸡机体的抗氧化能力。本试验研究结果表明，大豆黄酮显著降低了成年蛋鸡的死亡率，这也进一步证实了大豆黄酮提高免疫功能的作用。

本研究结果显示，全期平均产蛋率与大豆黄酮呈现显著二次曲线关系，这表明产蛋率随着大豆黄酮含量升高（0、10、50、100mg/kg）呈现先提高后降低的趋势。本试验低剂量部分研究结果与Zhao等［6－7］在 蛋 鸭 （5mg/kg），Ni等［5］、Liu等［11］在蛋鸡（10mg/kg）上得出的大豆黄酮可显著提高产蛋率的结论一致。这可能由于适宜剂量大豆黄酮具有雌激素受体激动剂，增强雌激素作用，上调了促性腺激素受体mRNA的表达量，从而促进了产蛋后期蛋鸡卵泡的发育［11－12］；同时过高剂量的大豆黄酮起抗雌激素的作用，与雌激素竞争雌激素受体，降低雌激素作用［13］，这点由本试验中100mg/kg大豆黄酮组产蛋率、产蛋量和料蛋比低于50mg/kg大豆黄酮组得到进一步证实，同时此部分与前人研究结果存在差异主要原因是之前对高剂量添加大豆黄酮（＞50mg/kg）的研究很少。

3.2 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响

大豆黄酮在蛋壳形成过程中起到重要作用，这主要由于大豆黄酮降低了破骨细胞细胞内钙浓度，从而增加壳腺形成过程中钙的数量［14－16］。本试验中3个与钙代谢相关的蛋品质指标（蛋壳厚度、蛋壳比例、蛋壳强度）均受到了大豆黄酮的显著影响。这与Ni等［5］研究发现大豆黄酮显著增强蛋壳厚度、降低破壳率结论一致。Sahin等［8］研究报道，大豆黄酮可显著改善产蛋后期日本鹌鹑骨密度和血清骨钙素、血清维生素D、血钙和血磷水平及碱性磷酸酶活性。

3.3 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡繁殖器官的影响

雌禽的生殖系统包括卵巢和输卵管2部分。禽类卵巢上聚集着数量庞大的卵泡，卵泡的生长发育与产蛋性能密切相关［17］。刘红云［18］研究发现，大豆黄酮未显著影响52周龄伊莎蛋鸡排卵前卵泡数，这与本试验结果一致，这可能是由于排卵前卵泡已进入排卵队伍，数量相对恒定（6～7个），每天其中1个进入输卵管形成鸡蛋；同时，其研究结果显示大豆黄酮（10mg/kg）显著增加了小黄卵泡数和大白卵泡数，而本试验研究得出小黄卵泡数和大白卵泡数未受大豆黄酮显著影响，这可能是因为用于本试验的蛋鸡周龄（59周龄）高于其试验蛋鸡周龄（52周龄），卵泡发育相对成熟，可调控程度相对较低。小黄卵泡数和大白卵泡数作为影响产蛋性能的重要因素，其本身不受大豆黄铜影响，为何产蛋率被显著提高，大豆黄酮与其的调控关系有待进一步研究。

禽类输卵管不仅是运送卵子和受精的场所，同时也是形成蛋的卵白、壳膜、蛋壳、角质薄膜的场所，并且它还具有能较长时间贮存精子的功能［17］。本试验研究发现，大豆黄酮未显著影响输卵管长度，但显著降低了输卵管指数（输卵管相对重量），显著提高了产蛋率，胡顺勇等［19］指出，输卵管变粗变重会影响蛋鸡产蛋率，可能是由于输卵管变粗变重影响了卵泡在其中的运输。

4 结 论

① 产蛋后期蛋鸡长期饲喂高剂量大豆黄酮对采食量、蛋品质和繁殖器官发育没有副作用。

② 大豆黄酮可以改善产蛋后期蛋鸡蛋品质。

③ 大豆黄酮对产蛋后期蛋鸡产蛋率、产蛋量和料蛋比的最高限量建议值为72.50、46.50和59.52mg/kg。

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