ANA、DS-DNA抗体滴度与SLE活动期的关系研究
2013-08-20阮汝明张学宁
阮汝明张学宁
1.鹤庆县人民医院检验科,云南大理671500;2.昆明医学院第二附属医院检验科,云南昆明650101
系统性红斑狼疮(SLE)有多种自身抗体存在,一般认为抗核抗体(ANA),抗ds-DNA抗体对SLE诊断有着重要的价值[1]。为进一步探讨ANA与抗ds-DNA抗体的滴度高低与SLE的活动性的关系,该文报告了2007年6月—2012年6月21例SLE活动期患者与47例SLE非活动期患者的ANA与抗ds-DNA抗体的检测结果,探讨有关问题如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
21例活动期患者,全为女性。47例非活动期患者,其中男性患者5例,女性患者42例。全组患者年龄介于12~64岁之间。
1.1.1 病例选择标准 所选患者均为确诊的SLE患者。其分期标准符合JiangX,Chen,F的标准[2],即ANA、抗ds-DNA、ENA三项抗体均为阳性,且IgG>16.8 g/L,补体C3,C4降低的 患者为活动期患者。凡有一条不符合以上条件的为非活动期患者。
1.2 检测方法及操作步骤
1.2.1 ANA的检测方法及操作步骤 ①检测方法:用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA。采用ANA检测试剂盒,其每个反应测试区都有人上皮细胞(HEP-2)和灵长类肝冰冻组织切片。②操作步骤:将待测血清用 PBS-T ween缓冲液稀释为 1:100、1:1000等不同稀释度,然后加样25 uL于反应区上,在室温下温育30 min后,用PBS-T ween缓冲液冲洗并浸泡1 min以上,然后加20uL IgG荧光抗体至反应区上,同前温育及冲洗。最后滴加甘油-PBS封片,置于荧光显微镜下观察。
1.2.2 抗ds-DNA抗体的检测方法及操作步骤 ①检测方法:用金标免疫斑点法测抗ds-DNA抗体。采用抗ds-DNA抗体检测试剂盒。②操作步骤:加TBS缓冲液2滴于反应区→加样品4滴→去除滤盖→加胶体金标记抗体3滴→加 TBS缓冲液1~2滴→观察结果[3]。
1.3 统计方法
2 结果
2.1 ANA滴度与SLE活动期和非活动期的关系
21例活动期患者均ANA阳性,阳性率为100%。47例非活动期患者ANA阳性为27例,阴性20例,阳性率为57.4%。两组比较活动期阳性率明显高于非活动期(P<0.05),而且活动期患者抗体的滴度也明显高于非活动期患者,经比较,差异有统计学意义(P<0.01),见表 1。
表1 ANA滴度与SLE活动期、非活动期的关系
2.2 抗dsDNA抗体滴度与活动期与非活动期的关系
21例活动期患者抗ds-DNA抗体阳性为21例,阳性率为100%。47例非活动期患者抗ds-DNA抗体阳性为27例,阳性率为57.4%。两组比较活动期阳性率明显高于非活动期 (P<0.05),而且活动期患者抗体的滴度也明显高于非活动期患者,两者差异有统计学意义(P<0.01),见表 2。
表2 抗ds-DNA抗体滴度与SLE活动期、非活动期的关系
3 讨论
ANA是自身对各种细胞核成分产生相应抗体的总称,常见于SLE,类风湿性关节炎、硬皮病和干燥综合症等,在SLE中包含有抗糖蛋白抗体、抗脱氧核糖核酸(DNA)抗体和抗盐水可提取性核抗原(ENA)抗体。目前诊断SLE和观察SLE病情的常见检测为间接免疫荧光法测定ANA,ANA阳性率及阴性率,在活动期患者与非活动期患者之间有着明显的差异,且滴度变化也存在明显的差异[4]。故对患者ANA及抗ds-DNA滴度的检测可估计SLE患者的病情。但据谢红付等的报道[5],凭借单纯的ANA阴性既不能排除SLE的诊断,也不能否定病情的活动性。
抗ds-DNA抗体变化与ANA试验结果在一些方面存在一致性,但也不完全等同。抗ds-DNA阳性患者,ANA也为阳性,而抗ds-DNA阴性者,ANA可能为阳性[6]。该研究表明,SLE活动期组患者的抗体滴度显著大于非活动期组患者,同样也能用于估计患者的病情及预后。而徐世正等的报道[7]也指出了ANA、抗ds-DNA的消长同临床活动有着非常密切的联系,因而定期检查患者抗ds-DNA、ANA等,对于监察患者的病情变化,预测复发和指导治疗,提供实验室依据。
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[3] 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:655-660.
[4] Maddison PJ,Provost TT,Reichlin M.Serological findings in patients with “ANA-negative”systemic lupus erythematosus[J].Medicine,1981,60(2):87-94.
[5] 谢红付,刘稚然,朱武.抗核抗体对系统性红斑狼疮诊断与活动性的研究[J].湖南医科大学学报,1997,22(2):177-178.
[6] 林海青,龚燕,张红逵,等.抗核抗体测定诊断SLE的临床意义[J]山东医药,1991,31(5):29-91.
[7] 徐世正,李洪迥,王惠珍.抗双链DNA抗体、抗核抗体的消长同SLE临床表现的关系[J].中华皮肤科杂志,1983,16(3):138-142.