牛布鲁氏菌病血清学检测报告

顾冬花 （青海省大通县桦林畜牧兽医站 810100）

本次牛布鲁氏菌病血清学检测结果表明，2010年大通县年布病感染抗体阳性率为0.25%，2011年阳性率为0.18%，2012年阳性率为0.14%；牛布病阳性率逐年有所下降，说明大通县在牛布病防控上，通过采取监测、及时淘汰阳性奶牛等综合性防治措施后，已取得了一些成效。不同养殖户中牛的感染抗体的阳性率各不相同，2010年散养户的阳性率0.26%，贩运户0.18%，规模场0.28%；2011年散养户的阳性率0.19%，贩运户0.11%，规模场0.21%；2012年散养户的阳性率0.13%，贩运户0.07%，规模场0.18%；牛布病的阳性率规模场最高，散养户次子，贩运户最低。

布氏杆菌病(Bruellosis简称布病)是由布氏杆菌引起的人畜共患的一种急性或慢行传染病，本病一年四季均可发病，临床上以母畜流产、公畜睾丸炎、暂时或永久性不育及产奶量下降为主要特征。本病在各地均有不同程度的流行，给畜牧业生产和人类健康造成了严重危害。像澳大利亚已根除了奶牛布病，其成功经验是，定期检测，淘汰阳性畜，此外还对畜群的流动实行了严格的限制措施以确保健康牛群远离布病⑷。因此，为了全面掌握本县布病的感染和发病情况，分析发病特点和传播风险因素，笔者于2010年3月至2012年10月进行了牛布病感染抗体的检测，现就其结果报告如下：

1 材料

1.1 被检血清 采自农户、规模场(户)、贩运户的牛血清18415头份，分离血清，-20℃保存备用。

1.2 检测试剂 虎红平板诊断抗原、试管凝集抗原、阴、阳性血清，虎红平板凝集试验(RBPT)抗原购自青岛易邦生物工程有限公司，批号20110426；试管凝集试验(SAT)抗原购自青岛易邦生物工程有限公司，批号20110 403。

2 检测方法

2.1 虎红平板试验方法 参照国标(GB/T 18646-2002)执行[1]。将玻璃板上各格标记受检血清号，然后加相应血清0.03ml.在受检血清旁滴加抗原0.03ml，用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合，每次试验应设阴阳性血清对照。

2.2 试管凝集试验方法 按照操作规程进[1,2]。

2.3 检测程序 奶牛血清用虎红平板凝集试验进行初筛，阳性者用试管凝集试验复检、确诊。

3 结果判定标准

3.1 虎红平板试验 等量的被检血清和虎红平板抗原混匀后2～3min出现肉眼可见的凝集颗粒，判为阳性，无凝集现象判为阴性。

3.2 试管凝集试验 被检血清1:100稀释，通过与比浊管对比，标记出现“＋ +”以上的凝集现象时判为阳性血清，1:50稀释，标记出现“+ +” 以上的凝集现象时判为可疑，可疑反应的奶牛经3～4周后，重新采血检验，如仍为可疑，在判为阳性。

4 结果

（详见表1、表2、表3）。

表1 不同年份牛布病检测结果 (头、%)

表2 不同养殖户牛布病检测情况 (头、%)

表3 虎红平板实验与试管凝集试验

5 结果分析

（1）三年牛布病共监测牛18415头，阳性34头，年度间平均阳性率0.18%，2010年监测牛4726头，阳性12头，阳性率0.25%。2011年监测牛6538头，阳性12头，阳性率0.18%，2012年监测牛7151头，阳性10头，阳性率0.14%；牛布病阳性率逐年有所下降，说明大通县在牛布病防控上，通过采取监测、及时淘汰阳性牛等综合性防治措施后，已取得了一些成效。（2）不同养殖户中，牛布病感染情况各不相同，其阳性率以规模场最高，散养户次之，贩运户最低。究其原因是多方面的，但主要与以下因素有关：①规模场饲养密度过大，消毒不太严格，造成疾病多发和传播便捷。多数中小养殖场在场址选择，房舍布局，舍内设计等都不太科学，饲养密度过大，单位面积上承载量增加，舍内卫生状况不良，再加上没有严格执行消毒程序，消毒药物选择不当，消毒剂量不足，消毒面积不彻底等遗留死角，对病畜的排泄物清除不够彻底，造成环境污染，病源微生物滋生，加快了布病的传播。②散养户养殖分散、数量少，饲养时间长，主要以家庭为单位，养殖观念落后，其养殖目的不是为了获得经济效益，因此对布病的危害认识不足，对布病的防治知识了解甚少，一旦感染布病，造成长时间的传播，最后为了挽回经济损失，将病牛低价出售給贩运户，成为新的传染源。③对贩运户而言，虽着个体养殖户不断增多，集市交易开放，牲畜流通加快，但贩运户收购数量少，来源分散，饲养时间短，布病传播有限。但这些牛大多来自养殖户的病牛，这种方式也成为了布病的传染源。（3）年度检出的阳性畜没有得到及时淘汰，以往检测以母畜及幼龄畜为主，且检测面有限，忽视对成年公畜的检测，缺乏阳性畜无害化处理措施和经济补偿机制。（4）试管凝集试验(SAT)是我国布病诊断的法定方法，是一种比较经典的布病检测方法。特异性和敏感性高，检测较准确，判定上更精确，具有较高的诊断价值；但操作繁琐，费时费力，不适用于现场采用和大规模的筛选检测。而虎红平板凝集试验(RBPT)操作方便，快捷，适于大规模的筛选检疫；而特异性不高，结果判定受反应时间长短影响大，判定结果不够精确。但两种试验的符合率较高，所以在实际检测过程中应把两种方法结合起来运用，互补优劣。先用RBPT筛选，阳性样品再用SPT复核以作出比较准确的判断。

6 对策

（1）加大规模养殖场的监管力度，加强养殖场的环境卫生，制定严格的消毒程序，引导养殖场沿着正规化、合理化、科学化的轨道发展；加大科普宣传力度，加强领导、提高认识，奶牛调运严格按照《中华人民共和国动物防疫法》和国家有关规定，严格实行奶牛调运检疫审批和“准调”制度。（2）对重点发病地区母牛实施计划免疫，对阳性牲畜实施扑杀无害化处理，对一般发病地区采取以检测处理阳性畜为主的净化措施，对可疑牛和检测阳性牛扑杀前的牛奶，均需高温等无害化处理。可疑牛及检测阳性牛的胎儿、胎衣、排泄物均需深埋等无害化处理。为了巩固布病防治效果，防止疫情回升，还要做好布病疫情的监测工作，加大检疫次数和力度，及时检测布病抗体，随时掌握疫情动态，采取相应措施，对种畜实行检疫淘汰制度 ，减少传染源，稳定控制疫情。（3）县级动物防疫监督机构应加强对奶牛的检疫，发放健康证，养牛户凭健康证出售牛奶，乳品加工场凭健康证收购牛奶，起到追溯调查和“净化”奶源的作用。（4）加大赔偿力度，经费落实到位，及时扑杀。由于奶牛价格高、流动性大，如不及时处理，易造成疫源的扩散。如果畜群中传染源不彻底清除，病畜长期保菌、排毒，将会严重威胁健康畜群和人，感染的布病牛和羊仍是人间布病的主要传染源[3]。（5）布病防制是一项长期而艰巨的工作，在工作中要坚持采取，以监测、检测、检疫、隔离、封锁、消毒、阳性畜扑杀综合防治措施，控制传染源，切断传播途径。只要每年严格检疫，按省级下达的布病监测任务，合理采样、规范监测，阳性畜严格扑杀深埋，做到加强联防、畜间检疫，注意疫情动态，及时发现并扑杀病畜，将疫情消灭在萌芽中，达到预警预报、净化畜群的目的，直至成为无病畜群。

[1]动物布鲁氏菌病诊断技术(Diagnostic techniques for animal brucellosis)》GB/T 18646-2002, 北京: 2009(11).

[2]中国农业标准汇编《动物布鲁氏菌病诊断技国家质量监督检验检疫局，《SN/T 1090-2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程》[M].北京: 2003.

[3]张士义, 马汉维, 江森林.我国近年来布鲁氏菌病监测资料分析[J].中国人畜共患病杂志, 1999,15(1): 59-60.

[4]罗伯特.勒韩著《澳大利亚根除牛布氏菌病和结核病纪实》[M].农业部兽医局/中国动物卫生与流行病学中心.1996-4.