MTA1和FLIP在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

西安市中心医院心胸外科（西安710003） 刘晨旭 周 斌

食管癌是消化道最常见肿瘤，在我国发病率较高，严重威胁着人民的健康［1］。近年来，许多与肿瘤浸润、转移有密切关系的基因已相继被克隆出，其中肿瘤转移基因（MTA1）是进几年来发现的和信号传导及基因调节有关的肿瘤转移相关基因。大量研究表明［2－3］，MTA1和许多种恶性肿瘤的浸润和转移有着密切的关系。FLIP（FLICE－inhibitory protein）是近年来发现的一类含有死亡效应结构域的凋亡、抑制蛋白，它广泛存在于病毒、真核生物和哺乳动物等许多物种中。目前可证实FLIP与炎症、肿瘤及自身免疫性疾病的发生、发展有密切的关系。本实验对人类食管癌组织中MTA1、FLIP的表达情况及两者间的关系进行分析，以探讨MTA1和FLIP蛋白的表达与食管鳞癌的侵润、转移和分化程度之间的关系，以及它们两者之间的相关性。

材料与方法

1 材 料 选取81例食管癌患者的癌组织作为研究对象，31例距癌组织边缘＞5cm的正常食管组织作为对照组。标本均为西安交通大学第二医院胸外科手术切除的组织，入选的患者术前均未行放疗、化疗和其他激素免疫治疗，术后病理诊断均为鳞癌。其中男65例，女16例，年龄42～72岁。病理类型、分期及淋巴结的转移情况，经病理科医师确定。

2 方 法 使用SP法进行抗MTA1和抗FLIP免疫组织化学染色。阴性对照则使用PBS代替一抗。结果判定：阳性表达的细胞核内见棕黄色的颗粒。光学显微镜下每张切片在诊断确切的食管癌组织中随机选取5个高倍视野，每高倍视野计数100个细胞。切片内的阳性细胞数＞10%做为MTA1或FLIP阳性表达。

3 统计学方法 所有数据经SPSS 11．0软件进行处理，使用χ2检验，变量之间的关系分析则采用spearman等级相关分析，P＜0．05差异有统计学意义。

结 果

MTA1蛋白、FLIP蛋白在食管癌组织中阳性率均高于正常组织中阳性表达率（P＜0．05）。MTA1、FLIP蛋白在食管癌组织阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤的长度均无关。MTA1表达与肿瘤的组织分化程度、T分期和淋巴结转移有明显相关性。FLIP的表达与肿瘤的组织分化程度无关，与肿瘤的T分期、淋巴结转移有明显相关性。MTA1和FLIP阳性表达存在明显正相关。见表1～5。

表1 两组MTA1、PLIP表达比较

表2 MTA1、FLIP在食管癌患者中表达与肿瘤长度关系比较

表3 MTA1、FLIP在食管癌患者中表达与年龄、性别的关系比较

表4 MTA1、FLIP在食管癌患者中的表达与临床病理因素的关系

表5 MTA1、FLIP在食管癌中的表达相关性

讨 论

1 MTA1在食管癌组织中的表达及意义 本组资料食管鳞癌组织中MTA1的阳性表达率为72．84%，正常的组织为6．45%。这两者比较有显著差异性（P＜0．05），提示MTA1在食管癌的发生中起到重要的作用，可以作为诊断食管癌的一种重要的生物学指标。本研究发现，MTA1蛋白的阳性表达和患者的年龄、性别及肿瘤长度均无关系（P＞0．05）；MTA1蛋白在中、高分化组中的阳性表达率为60．00%，低分化组为88．89%，二者比较有显著差异性（P＜0．05），这说明MTA1蛋白的阳性表达和肿瘤的组织学的分级有关系，并随着其分级的降低阳性表达水平明显的升高；MTA1蛋白的阳性表达和肿瘤的T分期、淋巴结转移有显著的相关性（P＜0．05），说明MTA1蛋白在肿瘤的浸润、转移中起着显著的作用。推测其机制可能是因为在MTA1阳性表达的癌细胞中，MTA1蛋白可以和组蛋白去乙酰化酶结合，募集组蛋白去乙酰化酶到目的基因启动子的区域，通过除去组蛋白的乙酰基重塑染色质结构，使目的基因变得更加得紧密而不利于继续转录［4］。进而MTA1可通过这种功能直接或间接的作用于某些可以抑制肿瘤浸润、转移基因，下调其转录过程，使肿瘤抑制基因的数量下降，从而促使肿瘤的发生、发展。综上所述，MTA1基因在食管鳞癌的、增殖、侵袭和转移及临床进展中可能起着重要的调节作用。

2 FLIP在食管癌组织中的表达及意义 本研究结果表明，FLIP在食管癌组织中的阳性表达率为76．54%，在正常肺组织为19．35%，两者比较差异有显著性（P＜0．05），说明FLIP在食管癌组织中表达明显上调。FLIP的表达与患者年龄、性别及肿瘤长度无相关性（P＞0．05）。FLIP与肿瘤的分化程度尽管无明显相关性（P＞0．05）。FLIP的表达与食管癌的T分期、淋巴结转移均有显著相关性（P＜0．05），并随着肿瘤临床分期的增加、淋巴结转移，其表达水平逐渐升高。这可能与以下机制有关：①FLIP的抑制凋亡作用。FLIP含量增加，食管癌细胞凋亡减少，食管癌细胞过度生长并易产生侵犯，同时过度生长的瘤体上癌细胞脱落，造成转移。②FLIP增多，癌细胞得以对抗T细胞的杀伤作用［5］。以上研究结果提示，FLIP蛋白的表达与食管癌的恶性转化密切相关，其在肿瘤中的高表达能够抑制正常的细胞凋亡过程，从而细胞异常增生和恶性转化，使癌细胞获得永生性。FLIP在肿瘤细胞中表达越强，癌细胞的生存能力和肿瘤的恶性程度也随之增高，癌细胞更容易侵袭周围组织而发生转移，从而增加治疗难度。表明FLIP蛋白的高表达是预示预后不良的标志。FLIP可成为肿瘤基因诊断性标志物和肿瘤治疗的新靶点［6－7］。

3 MTA1、FLIP在食管癌中阳性表达的相关性 恶性肿瘤的发生、发展、侵袭转移，是一种高度选择的非随机过程，是多个基因共同参与的结果，与多种分子水平密切相关。FLIP基因的增多能够使正常的细胞凋亡过程受到抑制。MTA1基因为肿瘤转移相关基因，通过此种功能直接或间接作用于某些抑制肿瘤浸润转移基因，下调其转录，使肿瘤抑制基因的数量减少，从而促使肿瘤的发生、发展，而与细胞凋亡过程无关。但是与细胞凋亡抑制基因FLIP存在明显的正相关。这可能是由于MTAI下调肿瘤抑制基因的数量，而其数量的减少也间接的影响细胞凋亡的过程，但其具体作用机制有待于进一步研究。联合检测MTA1、FLIP、表达对于临床高危复发病例，给予积极治疗，对提高预后具有重要意义，并可作为建立食管癌预后模型的重要指标。

［1］ 贺宇彤，侯 浚，陈志峰，等．河北省磁县近30年食管癌发病死亡趋势分析［J］．中华流行病学杂志，2006，27（2）：127－131．

［2］ Toh Y，Pencil SD，Nicolson GL．A novel candidate metastasis－associated gene，mta1，differentially expressed in highly metastatic mammary adenocarinoma cell lines．Cdna cloing，expression，and protein analyses［J］．J Biol Chem，1994，269（37）：958－963．

［3］ 李雪华，杨 茜．细胞调亡与肝癌［J］．医学理论与实践，2002，15（6）：623－624．

［4］ Salvesen GS，Duckett CS．IAP proteins：blocking the road to death＇s door［J］．Nat Rev Mol Cell Biol，2002，3（6）：401－410．

［5］ Di Somma MM，Somma F，Montani MS，et al．TCR engagement regulates differential responsiveness of human memory T cells to Fas（CD95）－mediated apoptosis［J］．J Immunol，1999，162（7）：3851－3858．

［6］ 梁 瑞，赵安虎，任 宏，等．MEK1在食管鳞癌中的表达及意义［J］．陕西医学杂志，2010，19（10）：1309－1310．

［7］ 杨志江，李桂红，蒲红伟，等．食管癌组织中bcl－2、c－myc、iNOS表达及其意义［J］．陕西医学杂志，2008，16（6）：686－688．