EM技术对提高种公牛饲养管理水平和精液品质影响的研究

徐峥嵘

（甘肃省动物疫病预防控制中心，甘肃 兰州 730000）

EM是一种复合微生物菌及相关技术，EM中包含了以乳酸菌、酵母菌、光合菌为主的多种多样有益微生物，通过独特的培养技术，将这些性质不同（好氧、厌氧）的微生物有机地整合在一起，各微生物之间形成互生共长的依存关系，形成一个有机整体，发挥“有益分解”作用、“抗氧化”作用［1］。微生物EM菌的主要成分 ：光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群（好气性）、革兰氏阳性放线菌群（好气性）、发酵系的丝状菌群（嫌气性）等，各类微生物都各自发挥着重要作用，核心作用是光合细菌和嗜酸性乳杆菌为主导，其合成能力支撑着其他微生物的活动，同时也利用其他微生物产生的物质，形成共生共荣的关系，保证EM状态稳定，功能齐全，发挥出集团军作战的强大能量。

EM的主要功能是造就良性生态。只要施用恰当，它就会与所到之处的良性力量迅速结合，产生抗氧化物质，清除氧化物质，消除腐败，抑制病原菌，形成适于种公牛吸收的有益物质，如氨基酸、有机酸、多醣类、各种维生素、各种生化酶、促生长因子、抗生素和抗病毒物质等，提高动植物的免疫功能，促进健康生长.可治疗消化系统、循环系统、能有效防止疾病，促进生长［2］。我们用EM技术技术处理的种公牛饲料进行饲喂可起到事半功倍的效果。

1 试验地点

甘肃省武威市某种公牛场。

2 材料与方法

2.1 前期EM饲草料的准备

将用于饲喂种公牛的精料和饲草用EM技术进行发酵，优质微贮饲料拿到手里感到很松散，质地柔软湿润。发粘或粘到一块，以及虽松散，但干燥粗硬，均属不良饲料。优质微贮青玉米秸秆饲料色泽呈橄榄绿，麦稻秸秆呈金黄褐色。具有醇香和果香气味，并具有弱酸味，若有强酸味，表明醋酸过多，这是由于水分过多和高温发酵造成。若有腐臭、发霉味不能饲喂。

2.2 试验设计及有关指标的测定

2.2.1 种公牛为家畜繁育中心种公牛站饲养的西门塔尔种公牛 从采精种公牛中随机抽出20头，年龄与体况相近，分为两组，第一组10头，（牛号从001至010）为对照组按照正常的饲喂方式进行饲喂，第二组10头（牛号从011至020）用经过EM技术处理的饲草料进行饲喂，60d以后将量化管理的饲养结果和采得的精液的鲜精活率、密度、精液量、冻后活率、生产冻精数、顶体完整率进行对比（见表2和表3）。依据冷冻精液生产GB4143－2008。

2.2.2 内容和方法 精液的采集：当公牛性欲旺盛时采精，采精员右手持假阴道，站在公牛右后方，当公牛起跳，前肢爬上台牛后左右手配合将公牛阴茎自然地引入假阴道内，公牛向前一冲即完成射精动作，待公牛前肢落地，缓慢地把假阴道脱出［3］。打开活塞放气，小心取下集精管，迅速转移至精液检测室进行检测。

精液的检查：先对所采得的精液进行感官评定，新鲜精液应呈乳白稍带黄色或奶油色不透明液体，杂质太多的精液要废弃。取一滴原精液加盖玻片后在400倍的恒温（37℃）可视显微镜下观察呈直线运动精子的百分数，活率≥65%可进行稀释封装（GB 4143－2008）。精液密度的测定目前常用精子密度测定仪（法国MIV公司生产），密度测定仪根据分光光度计测定原理和计算功能，能迅速测定出每毫升精液中精子密度，并且可以提供相关的数据如应加的稀释液量、可封装细管量等［4］。

精液的稀释 目前普遍采用的是进口稀释液（德国minitube公司生产），一步稀释法，认为对精液冷冻后活力影响不大［5］。将稀释液按照1∶4的比例进行稀释，加稀释液要缓慢、轻轻摇匀，稀释液温度与精液温度要等温。凡是精液一降温、平衡，其温度不允许再回升［6］。

精液的分装：使用细管精液分装机（法国IMV卡苏公司生产），是一套在完成灌装与封口后即可进行喷墨印字的一体化设备，工作程序在尽可能不被外界污染的情况下完成，对细管精液卫生质量保证极为有利［7］。细管的容量为0.25mL。

精液的平衡：平衡是稀释后精子在降温和在低温下的一个适应过程，是精细胞重建离子平衡变化的过程［8］，这个过程是必须的，不能省略。将分装完毕的细管精液码放在平衡架上，放入4℃的平衡柜中降温平衡。平衡的时间一般为2～4h。

精液的冷冻：精子冷冻采用精液冷冻仪（法国IMV卡苏公司生产），是由计算机控制的全自动冷冻容器，其理论依据是在冷冻降温的过程中，因为精细胞内的冰晶的形成，使细胞内外发生一系列的物理变化［9］，不同程度损害精细胞，因此需要这个降温冷冻必须快速越过冰晶危险区域（－0～－60℃）进入玻璃化状态（－130℃以下）［10］这时可是一种非结晶的固态，其性质更接近于液态使精细胞免受冰结晶冻害。公牛精液冷冻过程降温如下表1［11］。

表1 种公牛精液冷冻降温对照表

表2 精液品质检测

3 试验结果

应用excel计算平均值和标准差，用SPSS13.0统计分析软件对各项指标进行分析。试验按照牛冷冻精液生产规则进行生产，由上表2、3可以看出，种公牛饲喂经过EM技术处理的饲料后精液品质有明显的改善，组1的鲜精平均活率63%低于试验组2的平均活率67.6%，经检验P＜0.05说明差异显著，精液密度16.85亿／mL与16.65亿／mL差异不显著，精液量对照组4.33mL，试验组7.06mL，差异显著，冻后活率25.35%与38.3%，P＜0.05差异显著，平均冻精数1组214.4剂，2组425.5剂。顶体完整率16.88%，14.5也差异显著。

表3 精液品质检测

4 结论

将种公牛饲草料用EM技术处理后，种公牛的精液品质有明显的改变，可使鲜精活率有明显的提高，种公牛的精液量增加，精子的耐冻能力（精子复苏率、冻后活率）提高，冻精产量增加，精子的畸形率下降。但对提高精液的密度没有大的改观。所以在现今饲草料价格比较昂贵，品种单一，质量较差的情况下将饲草料特别是粗饲料用EM技术发酵后进行饲喂，不失为一种较好的办法，可降低饲养成本，提高饲料报酬。

［1］ 李孝辉.饲用微生物酶制剂及其研究应用概况［J］.饲料工业，2001，22（1）：40－43.

［2］ 江 洁，刘晓兰，薛振磊，等.乳酸菌和酵母菌共生发酵茶饮料的研制［J］.食品科学，2001，36（1）：40－42.

［3］ 方 华.种公牛的采精和管理［J］.湖南畜牧兽医，2001，17（4）：18.

［4］ 周 明，马晓燕.牛精液精子密度简易测定方法的探讨［J］.四川畜牧，1995，21（4）：25－26.

［5］ 江中良，李青旺，胡建宏，等.不同稀释剂对猪冷冻精液精子活率的影响［J］.中国农学通报，2004，15（4）：15－17.

［6］ 渊锡藩，邢小军，吴继东，等.冷冻精液的温度控制［J］.黑龙江动物繁殖，2005，25（3）：4－6.

［7］ 杨时礼，丁 国.珠封式细管精液分装机与细管精液真空分装机试用观察报告［J］.贵州畜牧兽医，1980，8（2）：30－31.

［8］ 赵来珍，刘发理.牛冷冻精液精子复苏规律及其机理［J］.中国牛业科学，1994，12（2）：22－24.

［9］ 陈松林，刘宪亭.鱼类精液超低温冷冻保存的基本原理、研究现状及应用前景［J］.淡水渔业，1991，33（5）：45－48.

［10］ 门正明.精液冷冻技术的进展及其应用［J］.优生与遗传，1983，1：53－55.

［11］ 胡建宏，王立强，李青旺.小尾寒羊精液冷冻温度曲线初步研究［J］.西北农林科技大学学报，2002，30（1）：85－88.