抑癌基因PTEN在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义

张玉朝

（河南省南阳市中心血站，河南 南阳 473004）

抑癌基因PTEN在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义

张玉朝

（河南省南阳市中心血站，河南 南阳 473004）

目的 探讨抑癌基因PTEN在肾透明细胞癌中的表达及发生、发展中的意义。方法 采集自医院的肾透明细胞癌组织（60例）及正常肾组织（20例），用免疫组织化学法检测抑癌基因PTEN的表达情况。结果 PTEN在肾透明细胞癌组织和正常肾组织中的阳性表达率分别为96.7%和5%（P＜0.05），差异显著具有统计学意义。结论 PTEN可作为评价肾透明细胞癌发生的生物学指标。

PTEN；肾透明细胞癌；免疫组化

肾癌是泌尿系统恶性肿瘤中常见的疾病之一，研究表明，引起肾癌的因素较为复杂，抑癌基因PTEN(phosphotase and tensin homolog deleted from chromsome 10，PTEN)是较为重要的一种[1-3]，该基因编码的蛋白具有磷酸酶的活性，在周期阻滞和细胞凋亡过程中起到非常关键的作用[4]。本研究运用免疫组织化学的方法，检测肾透明细胞癌及正常肾组织中抑癌基因PTEN的表达情况，探讨PTEN在该病的发生、发展中的意义及对患者预后的影响。

1 材料与方法

1.1 标本

病例样本取自南阳市第三人民医院2008年至2012年经手术切除并经病理学证实的原发性肾透明细胞癌组织标本60例，术前均未接受化、放疗。

1.2 试剂及仪器

兔抗人PTEN多克隆抗体（上海亿欣生物科技有限公司）；生物素二抗、DAB显色试剂盒（碧云天生物技术公司），Olympus BH-2显微镜照相系统；Leica Q570c真彩图像分析仪(Leica)。

1.3 免疫组化法检测PTEN

常规石蜡包埋并切片。然后脱蜡，脱水，抗原修复，封闭30min后，滴加适当稀释(1∶100)后的兔抗人PTEN多克隆抗体，4℃过夜，洗脱后滴加二抗，反应1h，DAB显色、脱水、透明、封片。阳性和阴性对照的设定：用已知的阳性组织切片作为阳性对照，缓冲液代替一抗作为阴性对照。用Olympus BH-2显微镜照相系统进行照相后进行分析。

1.4 结果判定

阳性结果的判定标准：参考已发表文献[5]的评分方法，阳性细胞数计分标准：阳性细胞数＜5%判定为0；阳性细胞数＞5%，但≤35%判定为1；阳性细胞数＞35%，但≤70%判定为2；阳性细胞数＞70%判定为3。着色强度计分标准：完全没有着色判定为0，着色很弱判定为1，呈明显的棕黄色判定为2。阳性分级标准：上述两项积分相加，0～1分之间为(-)，2分为(±)，3分为(+)，4分为(++)，5分为(+++)：+～+++判定为阳性，- ～±判定为阴性。

1.5 统计学分析

应用统计学软件SPSS 13.0，采用Krusca-Wallis进行非参数检验。P＜0.05表示差异显著，具有统计学意义。

2 结 果

2.1 免疫组织化学染色结果

免疫组化结果显示，正常肾脏组织中PTEN蛋白阳性表达率为5%(1/20)，明显低于肾透明细胞癌组织96.7%（58/60）的表达率（P＜0.05），见表1、图1。

表1 PTEN在正常肾组织、肾透明细胞癌组织中的表达

图1 PTEN在肾透明细胞癌组织中的表达

2.2 PTEN表达与肾透明细胞癌患者临床病理特征之间的关系

结果显示组织的浸润深度、淋巴结转移、临床分期等与PTEN的表达有较为密切的关系（表2）。

表2 PTEN基因的表达情况与肾透明细胞癌患者临床病理特征之间的关系

3 讨 论

抑癌基因PTEN又称为MMAC1（mutated in multiple advanced cancers 1)，是研究者后来发现的一种抑癌基因，参与肿瘤细胞的浸润及肿瘤转移的调节等过程[6]。

本实验用免疫组化的方法检测了抑癌基因PTEN在肾透明细胞癌组织和正常肾脏组织中的表达情况。结果发现，与正常肾组织相比，在肾透明细胞癌患者的组织内有较强的PTEN的表达。本实验还发现，部分肾透明细胞癌组织中还有PTEN的异常表达或者表达缺失或表达减弱现象，本研究结果显示，PTEN在正常肾脏组织中基本无表达，说明PTEN能选择性的表达于肾透明细胞癌组织中，具有一定的组织嗜性，分析认为其表达可能是诱发肾透明细胞癌发生的重要因素之一。进一步的分析PTEN表达情况与肾透明细胞癌之间的主要参数的关系，发现PTEN的表达与病理分期没有明显关系，与组织的浸润深度、淋巴结转移、临床分期有明显的关系。

综上所述，PTEN是继p53基因之后另外一个与肿瘤的发生密切相关的一个抑癌基因。研究其作用机制对肿瘤的诊断及其基因治疗具有重要意义。

[1] Li J,Yen C,Liaw D,et al.PTEN,a putative protein tyrosine phosphatase gene mutated in human brain,breast,and prostate cancer[J]. Science,1997,275 (5308): 1943-1947.

[2] Li DM,Sun H.TEP1,encoded by a candidate tumor suppressor locus,is a novel protein tyrosine phosphatase regulated by transforming growth factor beta[J].Cancer Research,1997,57(11): 2124-2129.

[3] Steck PA,Pershouse MA,Jasser SA,et al.Identification of a candidate tumour suppressor gene,MMAC1,at chromosome 10q23.3 that is mutated in multiple advanced cancers[J].Nature Genetics,1997, 15(4): 356-362.

[4] Chu EC,Tarnawski AS.PTEN regulatory functions in tumor suppression and cell biology. Medical science monitor: international medical[J].J Expe Clin Res,2004,10(10): RA235.

[5] Shimizu M,Saitoh Y,Itoh H.Immunohistochemical staining of Haras oncogene product in normal,benign,and malignant human pancreatic tissues[J].Human Pathology,1990,21(6): 607-612.

[6] Keniry M,Parsons R.The role of PTEN signaling perturbations in cancer and in targeted therapy[J].Oncogene,2008,27(41): 5477-5485.

R737.11

B

1671-8194（2013）23-0185-02