减肥类保健食品中非法添加盐酸西布曲明的快速检测

刘若冰 刘灿辉

（湖南省邵阳市食品药品检验所，湖南 邵阳 422000）

减肥类保健食品中非法添加盐酸西布曲明的快速检测

刘若冰 刘灿辉

（湖南省邵阳市食品药品检验所，湖南 邵阳 422000）

目的 建立检测减肥类保健食品中非法添加盐酸西布曲明的快速定性检测方法。方法 采用薄层色谱法、高效液相色谱-二极管阵列检测器法进行定性鉴别，并采用高效液相色谱法测定其中盐酸西布曲明的含量。结果 在试验的10种市售样品（含赠品）中，其中8个品种（含赠品）中被检测到掺有盐酸西布曲明。结论 该方法选择性强、灵敏度高，可作为分析检测减肥类保健食品中非法添加盐酸西布曲明的比较有效的方法。

减肥类保健食品；盐酸西布曲明；薄层色谱法；高效液相色谱法

盐酸西布曲明是一种非苯丙胺类食欲抑制剂[1]，抑制5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取，具有抑制食欲和增强代谢双重作用，其减肥的原理就是靠着代谢加快，产生热量、释放热量的加快，抑制人的食欲，让人厌食以达到减肥的目的，但是，盐酸西布曲明对人体有副作用，可出现心动过速、血压升高、头痛、失眠、易醒、口干、便秘、易激动、皮疹或皮肤干燥等。同时《食品安全法》规定：保健食品的功能、成分必须与标签、说明书相一致。但由于中药制剂所含成分复杂、质量标准不完善，一些制假者在生产过程中非法添加化学成分，夸大宣传疗效，高价销售弁取暴利，严重危害人民的身体健康。据有关资料显示，减肥类保健食品中非法添加的化学成分主要有盐酸西布曲明、酚酞、盐酸芬氟拉明和奥利司他等。因此，笔者建立了薄层色谱法和高效液相色谱法，可快速、准确地检测减肥类保健食品中非法添加的盐酸西布曲明。

1 仪器与试药

岛津LC-20A高效液相色谱仪：LC-20AT泵、SPD-M20A检测器、CTO-10AS柱温箱、SIL-20A自动进样器、CBM-20A系统控制器；AG-135电子天平、AB204-N电子天平（均为梅特勒（上海）有限公司）；硅胶G预制板（青岛海洋化工厂，批号20081211）。

甲醇、磷酸和三乙胺为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂均为分析纯；盐酸西布曲明对照品（批号100624-200401）由中国药品生物制品检定所提供；10种减肥类保健食品为市场上购买（均标示为纯中药制剂）。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱定性鉴别[2]

取供试品1次口服量（含囊壳或茶袋），加入甲醇25mL，超声处理（250W，40kHz）30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。取盐酸西布曲明对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述二种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-异丙醇-浓氨试液（12∶6∶3∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。结果供试品色谱中，在与盐酸西布曲明对照品色谱相应的位置上，显1个相同的橙红色斑点说明供试品中检出盐酸西布曲明（图1）。

2.2 高效液相色谱-二极管阵列定性鉴别

2.2.1 色谱条件

UltimateMXB-C18色谱柱（250×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-水（74∶26）；检测波长：223nm；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样量：10μL。

图1 1.2.3.4.6.7.8.9供试品；5.10盐酸西布曲明对照品

2.2.2 溶液的配制

2.2.2.1 对照品溶液的制备

称取盐酸西布曲明对照品约7.87mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀（储备液），精密吸取3mL，置10mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（0.04722mg/mL）。

2.2.2.2 供试品溶液的制备

取供试品1次口服量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理（250W，40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.2.3 流动相系统优化筛选

试验前我们查阅了有关文献和近几年的药学杂志，遴选出以下三个流动相系统。①甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾（用磷酸调值至pH3.0）（55∶45）[3]。②甲醇-水-三乙胺（75∶25∶0.1）[4]。③甲醇-水（74∶26）。取上述配制的对照品溶液，检测波长为223nm，分别以上述三种流动相系统，进样10μL进行检测，结果见图2～4。

显然以流动相系统③检出的色谱峰最理想，盐酸西布曲明色谱峰能达基线分离，色谱行为良好，出峰时间在20min以前，理论板数为8767，供试品盐酸西布曲明色谱峰与其他杂质峰分离度＞1.5，故选此系统作为流动相进行试验。

2.2.2.4 专属性考察

图2 流动相①HPLC图

图3 流动相②HPLC图

图4 流动相③HPLC图

图5 盐酸西布曲明对照品色谱图

图6 供试品色谱图

图7 盐酸西布曲明对照品光谱图

图8 供试品光谱图

取上述制备的对照品溶液和供试品溶液，照上述色谱条件，各精密进样10μL，依法测定，记录色谱图和光谱图，结果盐酸西布曲明色谱峰能达基线分离，出峰时间15.89min，理论板数为8767。供试品在与对照品色谱保留时间相同的位置检出色谱峰，且光谱图一致。说明供试品中检出盐酸西布曲明。见图5～8。

2.2.2.5 检测限考察

称取盐酸西布曲明对照品0.00787g，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，精密量取3mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度（4.722μg/mL），照上述色谱条件，进样5μL，记录色谱图，见图9。结果检测限为23.61ng（S/N=3）。

图9 信噪比检测色谱图（S/N=3）

2.3 高效液相色谱法定量测定

2.3.1 线性关系考察

精密吸取上述盐酸西布曲明对照品储备液（0.1574mg/mL）1、2、3、4、5mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，分别取10μL注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积积分值，以对照品浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程：A=16770C+5076，r=1.0000。可见盐酸西布曲明在0.1574～0.7870μg范围内具有良好的线性关系。

2.3.2 精密度试验

取同一浓度的柚皮苷对照品溶液，在上述色谱条件下测定，连续进样5次，测定峰面积积分值，平均值为1751194，RSD=0.25%。结果表明本法精密度良好。

2.3.3 稳定性试验

分别精密吸取同一供试品溶液（X牌减肥胶囊）10μl，于0、1、2、4、8、16h进样，测定其盐酸西布曲明峰面积积分值，平均值为1895620，RSD=0.51%。结果表明，供试品溶液在16h内峰面积积分值基本稳定。

2.3.4 重复性试验

取同一样品（X牌减肥胶囊，批号2009030181）5份，分别按上述含量测定方法测定其盐酸西布曲明含量，平均含量为1.0699mg/g，RSD=1.56%。结果表明，本法重现性良好。

2.3.5 回收率试验

取已知含量的样品（X牌减肥胶囊，批号2009030181，含量：1.0699mg/g）6份，精密称定，按低、中、高剂量分别加入盐酸西布曲明对照品溶液（0.1574mg/mL）适量，按供试品溶液的制备方法处理，依法测定，结果见表1。

表1 盐酸西布曲明回收率试验结果

2.3.6 样品测定

按上述条件和方法测定各样品中盐酸西布曲明的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果

3 讨 论

试验中曾考察过甲醇、乙醇和乙酸乙酯三种溶剂，结果以甲醇作溶剂的效果为最佳；在超声时间考察时，超声30min和60min没有明显的区别，故采用超声30min。同时考察过各样品的内包装，结果发现1号样的囊壳和2号样的茶袋中均含有较多的盐酸西布曲明。

在试验中发现10个减肥类样品中，有8个样品中检出盐酸西布曲明，1个样品的赠品中检出盐酸西布曲明，但该样品的正品中有一个很大的可疑峰，有待进一步研究[4]。

由于对保健食品的监管（尤其是技术监管）还未完全到位，目前保健食品市场上鱼龙混杂，非法添加的现象令人触目惊心，且花样繁多，手段越来越高明。笔者通过薄层色谱法和高效液相色谱法，可以快速地检测出减肥类保健食品中非法添加的盐酸西布曲明，该方法专属性强、灵敏度高、准确、可靠，能有效地控制减肥类保健食品的质量，保障人民的身体健康。

[1] 陈国章,吴琳.减肥药“轻身减肥片”中非法加入西药盐酸西布曲明的薄层色谱鉴别[J].中华中西医学杂志,2006,4(9):64.

[2] 刘吉金,李军.减肥食品或保健品中非法添加盐酸西布曲明、盐酸芬氟拉明、盐酸西布曲明快速检测方法研究[J].药物分析杂志,2006,26(6):793.

[3] 郑国钢,方宇谨,杜加秋.RP-HPLC测定盐酸西布曲明片的含量[J].西北药学杂志,2001,16(5):195.

[4] 王金生.HPLC-PDA法检验保健食品中的盐酸西布曲明[J].中国卫生检验杂志,2007,17(3):462.

R155.5

B

1671-8194（2013）21-0100-03