p53和Ki67在胃癌中的表达及其临床意义

叶 斌王西川雷 蕾游莉斯

（1 成都市第六人民医院肿瘤科，四川 成都 610051；2 成都市第六人民医院病理科，四川 成都 610051）

p53和Ki67在胃癌中的表达及其临床意义

叶 斌1王西川2雷 蕾1游莉斯1

（1 成都市第六人民医院肿瘤科，四川 成都 610051；2 成都市第六人民医院病理科，四川 成都 610051）

目的 探讨p53蛋白、Ki67在慢性胃炎和胃癌中的表达及意义。方法 采用免疫组化法分别对58例胃癌，20例胃炎，进行了p53蛋白和Ki67的检测。结果 ①胃癌组织中p53蛋白、Ki67的阳性表达率分别为31.03%（18/58）、70.69%（41/58），均显著高于胃炎组织，差异均有统计学意义（P=0.042，P=0.005）。②在胃癌组织中p53蛋白的阳性表达与胃癌的临床分期、浸润深度、和淋巴结转移有关（P＜0.05），与组织学分化程度无关(P ＞0.05)；胃癌中Ki67的表达阳性率与胃癌的临床分期和浸润深度有关（P＜0.05），与组织学分化程度和淋巴结转移无关(P＞0.05)。③p53蛋白和Ki67共同阳性者14例，共同阴性者14例，相关性分析显示，二者之间呈正相关（r=0.372，P =0.004）。结论 p53蛋白和Ki67在胃癌中的表达明显升高，可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要参考指标。

胃癌；p53蛋白；Ki67

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一。胃癌标志物的检测可反映肿瘤的生物学特性，对诊断、治疗及预后具有重要意义。p53基因是重要的抑瘤基因，分为野生和突变两种亚型，是细胞增生的主要负调控子，该基因的突变或缺失是导致许多肿瘤发生的原因。Ki67是1种细胞增殖核抗原，其表达与多种肿瘤的发生、发展、浸润、转移有关。本研究采用免疫组化方法检测慢性胃炎和胃癌组织中p53蛋白和Ki67表达情况，以探讨其临床意义。

表2 胃癌组织中p53和Ki67蛋白表达与临床病理特征的关系[n（%）]

表1 胃癌组织和胃炎组织中p53和Ki67蛋白的表达[n（%）]

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集我院普外科2007年4月至2012年4月的58例胃癌手术标本，其中男性33例，女性 25例，年龄32～84岁，中位年龄60岁；同时收集慢性胃炎手术标本20例用于对照，其中男性11例，女性9例，年龄37～81岁，中位年龄63岁。标本均经组织病理确诊；患者术前均未接受过放化疗。胃癌患者临床分期按2007版AJCC颁布的胃癌TNM分期标准：Ⅰ期9例，Ⅱ期20例，Ⅲ期22例，Ⅳ期7例。胃癌分化程度：高分化腺癌5例，中分化腺癌19例，低分化腺癌34例。胃癌浸润深度：浸润达浆膜层者28例，浸润未达浆膜层者30例。周围淋巴结转移情况：发生淋巴结转移者39例，未发生淋巴结转移者19例。

1.2 方法

采用免疫组化PV-9000法。所有抗体均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。石蜡包埋，制成4µm厚的切片。脱蜡、水化组织切片；高压锅抗原热修复；3%H2O2去离子水孵育以阻断内源性过氧化物酶；滴加一抗，4℃过夜；PBS冲洗，滴加聚合酶辅助剂，37℃孵育20 min；PBS冲洗后滴加辣根酶标记山羊抗小鼠IgG多聚体，37℃孵育30 min；应用DAB溶液显色；自来水冲洗、复染、脱水、透明、封片。

1.3 结果判断

于显微镜下观察，每例观察2张切片，每张切片随机选择10个高倍视野，每个视野计数100个肿瘤细胞，取其平均值为细胞的阳性率。p53的结果判断：细胞核呈现清晰的棕黄色颗粒为阳性，按阳性细胞所占的比例及显色深度分为，阳性细胞数所占比例＜10 %为阴性(-)；10 %～25 %为弱阳性(+)，显色浅，颗粒细；26%～50%为中度阳性(++)，显色较深；＞50%为强阳性(+++)，显色深，颗粒粗。Ki67的结果判断：与p53同。

1.4 统计处理

采用SPSS 13.0统计软件进行χ2检验和相关性分析。

2 结 果

2.1 癌组织与胃炎组织中p53和Ki67的表达及比较

免疫组化结果显示，p53蛋白和Ki67主要表达于细胞核。 58例胃癌标本中p53蛋白和Ki67表达阳性率分别为31.03%（18/58）和70.69%（41/58）；20例慢性胃炎标本中p53蛋白和Ki67表达阳性率分别为5.0%（1/20）和35.0%（7/20）；两者比较，差异有统计学意义（表1）。

2.2 胃癌组织中p53和Ki67蛋白表达与临床病理特征的关系

58例胃癌中，p53蛋白的阳性表达与临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关（P＜0.05），与组织学分化程度无关（P＞0.05）。Ki67的阳性表达与组织学分化程度和淋巴结转移无关（P＞0.05）；但与临床分期和浸润深度有关（P＜0.05）（表2）。

2.3 胃癌组织中p53和Ki67蛋白表达之间的关系

58例胃癌中，p53和Ki67蛋白同为阳性者14例，同为阴性者14例，二者之间呈显著相关（r=0.372，P=0.004），见表3。

表3 p53和Ki67在胃癌组织中表达的相关性分析(例)

3 讨 论

P53基因是1个非常重要的抑癌基因。它与细胞周期蛋白（cyclins）结合形成复合体，抑制依赖细胞周期蛋白的相关激酶（CDKs）活性，使细胞停滞在G1期或引起细胞程序性死亡[1]。P53基因大约有50%[2]的突变率，当P53基因发生突变时，可导致稳定的蛋白质不能完成抑制细胞增殖的作用，并且促进细胞恶性转化，使P53基因由抑癌基因转为原癌基因[3]。Kamal等[4]研究发现，突变型P53的表达与患者的预后有关。

本研究结果显示，P53蛋白在胃癌组织的阳性表达率为31.03%，明显高于胃炎组织，结果与古吉敏等[5]相符。陆晓峰等[6]报道，P53蛋白与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移呈不同程度的正相关（P＜0.05），本研究结果与上述报道相符。而且蛋白P53在Ⅲ、Ⅳ期的阳性表达显著高于Ⅰ期和Ⅱ期(P＜0.05)。上述结果提示P53突变与肿瘤的发生、发展，恶性细胞的侵袭、转移密切相关。

Ki67是应用最广泛的增殖细胞标志之一，在细胞凋亡中S、G2、M期均有表达，主要定位于细胞核，在有丝分裂中起着维持DNA结构的重要作用[7]。Ki67与胃癌细胞凋亡和增殖相关，可作为胃癌患者一个独立的预后因素，Ki67高表达的胃癌患者存活率较低[8]。

本组病例中，结直肠腺癌Ki67的阳性表达率高于胃炎（P ＜0.05）。Ki67的阳性表达在不同临床分期和浸润深度的胃癌标本中差异有统计学意义（P＜0.05）。而在胃癌的不同组织学类型组、有无淋巴结转移组，差异无统计学意义（P＞0.05）。提示Ki67对鉴别诊断腺癌和胃炎有重大意义。有学者研究指出：癌细胞分化程度越低，以及伴有淋巴结转移者Ki67表达越强[9,10]。本结果似有不同，有待进一步研究。

综上所述，胃癌中P53及Ki67基因表达上调，与胃癌的发生、发展密切相关，将两者作为生物标志物进行联合检测，有利于对胃癌患者恶性程度及预后的评估。

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[4] Kamal EB,Nidal MA,Yousf SK,et al.Combined evaluation of expressions of cyclin E and p53 as prognostic factors for patients with gastric cancer[J].Clin Cancer Res,2005,11(4): 1447-1453.

[5] 古吉敏,华平,简友丽.PTEN及P53蛋白在胃癌中的异常表达及临床意义[J].肿瘤预防与治疗,2010,23(4): 280-282.

[6] 陆晓峰,陈刚.胃癌组织中PCNA、COX-2、p53及EGFR的表达及其与预后的关系[J].山东医药,2012,52(41): 39-41.

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[10] 林静,项锋钢,杨文荣,等.PTTG、c-Myc及Ki67在胃癌中的表达及相关性研究[J].胃肠病学与肝病学杂志,2007,16(6): 528-531.

Expression of p53, Ki67 in Gastric Carcinoma and Clinical Significances

YE Bin1, WANG Xi-chuan2, LEI Lei1, YOU Li-si1
(
1 Department of Oncology, Sixth People's Hospital of Chengdu, Chengdu 610051, China; 2 Department of Pathology, Sixth People's Hospital of Chengdu, Chengdu 610051, China)

Objective To investigate the expression of protein p53 and Ki67 in gastric carcinoma and its prognostic significance. Methods The expression of p53 and Ki67 in gastric carcinoma of 58 cases and chronic gastritis of 20 cases were detected through immunohistochemistry, respectively. Results ①The expression rate of protein p53 and Ki67 in 58 cases of gastric carcinoma were 31.03%(18/58)and 70.69%(41/58), respectively, which were significantly higher than that in chronic gastritis.(P=0.042, P=0.005). ②Ingastric carcinoma, the expression of protein p53 was significantly associated with the.depth of invasion(P=0.000), lymph node metastasis(P=0.018) and clinical staging(P=0.001). It was not associated with the degree of differentiation(P＞0.05). The expression of Ki67 was significantly associated with the depth of invasion(P=0.015) and clinical staging(P=0.043). But it was not associated with the degree of differentiation and lymph node metastasis(P＞0.05). ③The positive expression of protein p53 and Ki67 were 31.03% and 70.69%, respectively, in which co-positive in 14 cases and the co-negative in 14 cases. The protein p53 was correlated with the Ki67 expression(r=0.372, P=0.004). Conclution The expression of p53 and Ki67 were higher in the gastric carcinoma than that in chronic gastritis. Therefore, the detection of protein p53 and Ki67 expression could be used as biomarkers to predict the degree of malignancy and prognosis of gastric carcinoma.

Gastric carcinoma; Protein p53; Ki67

R735.2

B

1671-8194（2013）20-0069-03