阳桃根中化学成分类型的试验研究
2013-06-14温庆伟郑妮陈春霞梁杏梅黄仁彬
温庆伟,郑妮,陈春霞,梁杏梅,黄仁彬
阳桃根为酢浆草科植物杨桃Averrhoa carambola L.的干燥根,分布于云南、广东、广西、福建及台湾、马来西亚、巴西、菲律宾等国家和地区[1]。广西作为杨桃的主产地之一,资源相当丰富。在民间,阳桃根主要用于治疗风湿痹痛,骨节风,瘫痪不遂,慢性头风,心胃气痛,遗精,白带等。到目前为止,对阳桃根化学成分的了解较少,仅见报道它含有β-谷甾醇,羽扇豆醇和1,5-二羟基-6,7-二甲氧基-2-甲基蒽醌-3-O-β-吡喃葡萄糖苷[2~3]。阳桃叶中主要含有脂肪酸类、脂肪烷烃类及萜类等挥发性成分,carambolaflvone, isositexin[4~5]。我们的前期药理学研究表明:它的醇提取物、水提取物的多糖及其醇提液的三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等萃取部位,均具有明显降低动物血糖水平的作用[6~7]。因此,进行阳桃根化学成分类型的试验研究,将会对了解它的物质组成及确定其单体化合物分离、纯化方法提供有力的依据,也为今后明确它的降血糖药效物质奠定一些基础。
1 实验材料
1.1 材料
阳桃根在2010年6月收集于广西灵山县。经过广西中医药研究院赖茂祥教授鉴定为酢浆草科植物杨桃Averrhoa carambola L.的干燥根。晒干,粉碎后,备用。
石油醚(60~90℃)、95%乙醇、乙酸乙酯、甲醇、氢氧化钠、醋酐、三氯甲烷、浓硫酸、溴酚蓝、三氯化铁、铁氰化钾、明胶、氯化钠、碘化汞钾、碘化铋钾、硅钨酸、浓盐酸、镁粉、氢氧化钾、三氯化铝、浓氨水、硼酸、醋酸镁、盐酸羟胺、吡啶、亚硝酰铁氰化钠、3,5-二硝基苯甲酸、苦味酸、茚三酮、硫酸铜、氯化钠、酒石酸钾、α-萘酚均为国产分析纯。精密试纸(0.5-5.0,上海三爱思试剂有限公司)。
1.2 仪器
CAMAG薄层色谱仪(瑞士);电子天平(余姚市金诺天平仪器有限公司)。
2 方法与结果
2.1 样品溶液制备流程
图1 样品溶液制备流程图
2.2 样品溶液制备方法
按2.1样品溶液制备流程(见图1)进行样品溶液的制备,具体方法如下。
⑴石油醚提取液
取药材粉末10 g,加石油醚(60~90 ℃)100 mL,索氏提取4小时,滤渣挥去石油醚,备用;滤液放在表面皿上挥发,残留物进行三萜类、甾体、挥发油与油脂等成分的检查。
⑵乙醇提取液
取步骤⑴滤渣,加95%乙醇100 mL,用水浴加热回流提取2小时,滤过,滤渣备用;直接取部分滤液进行酚类、鞣质、有机酸等成分的检查;将剩余滤液减压浓缩至浸膏状,置于蒸发皿中,加少量5%盐酸搅拌萃取,得萃取液A;分取稀盐酸溶解部分进行生物碱的理化试验。萃取后的残渣分为两部分:
一部分以少量乙醇(约10 mL)溶解,得溶液B,进行黄酮、蒽醌、苷等类成分的检查;另外一部分溶于少量乙酸乙酯(约15 mL)中,得溶液C,并转移至分液漏斗中,加5%NaOH 15 mL振摇,使酚性物质、有机酸等溶入下层碱水溶液中,分取乙酸乙酯层,用蒸馏水洗掉碱性,进行香豆素、萜类及萜类内酯化合物等成分的检查。
⑶水浸液
取步骤⑵所得的滤渣,加水50 mL,50~60 ℃水浴加热1小时左右,滤过,滤液进行糖类、皂苷、氨基酸、多肽、蛋白质等成分的检查。
2.3 结果
取按2.2样品溶液制备方法所制得的六种样品溶液按文献的方法[8~10],进行试验,结果见表1-3。
表1 石油醚提取液化学反应试验结果
表2 乙醇提取液化学反应试验结果
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表3 水提取液化学反应试验结果
3 讨论
本研究的结果表明:阳桃根中石油醚(60~90℃)提取液含有油脂、甾体或三萜类(可能是苷元),不含挥发油;乙醇提取液中含有酚类、有机酸、鞣质、香豆素、萜类或萜类内酯、甾体和三萜类成分,但生物碱、黄酮类成分反应现象不明显;水提取液中皂苷类成分反应明显,并含糖、多糖、苷类、氨基酸、多肽等,只有蛋白质、多肽类化学成分反应现象不明显。由此可见,阳桃根的化学成分基本与阳桃叶的成分一致[11]。
甾体、有机酸、酚类及多糖等少数几类化学成分的反应现象比较明显,它们在该植物中的含量可能较高;而其他各类成分的反应现象均不是十分显著,含量可能很低。因此,在对这些单体化学物的富集、分离及纯化时,一定要注意选择好色谱柱(或填料)、洗脱剂的类型,这样才能达到更好的分离效果。
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