LDH-5在非霍奇金淋巴瘤诊断与疗效监测中的作用

复旦大学附属肿瘤医院检验科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海200032

LDH-5在非霍奇金淋巴瘤诊断与疗效监测中的作用

江铭磊 陈祝俊 卢仁泉 郭林

复旦大学附属肿瘤医院检验科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海200032

背景与目的：乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)是糖酵解中主要的酶，能够催化乳酸变成丙酮酸。本实验主要探讨乳酸脱氢酶同工酶-5(lactate dehydrogenase-5，LDH-5)在非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma，NHL)患者血清中的表达量及在疗效监测中的作用。方法：利用琼脂糖凝胶电泳法，测定了105例NHL患者与185例健康对照者的血清LDH-5水平，对其中28例化疗患者进行血清LDH-5随访，并对数据进行统计学处理。结果：NHL患者血清LDH-5水平为(10.38±3.52)%，明显高于健康对照者的(7.89±2.67)%，差异有统计学意义(P＜0.01)。化疗有效的NHL患者，化疗前后测定结果显示，血清LDH-5水平呈递减趋势，不同疗效组间的结果差异有统计学意义(P＜0.05)。LDH-5含量与NHL预后指标具有相关性。结论：LDH-5在NHL诊断与疗效监测中有较好的临床应用价值。

乳酸脱氢酶同工酶-5；非霍奇金淋巴瘤；琼脂糖凝胶电泳

非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma，NHL)是一组异质性的淋巴细胞异常增殖性疾病，起源于B淋巴细胞、T淋巴细胞或NK细胞。NHL居新发肿瘤病例的第7位，占新发肿瘤病例的4%和肿瘤相关死亡的3%。NHL也居男性肿瘤死亡原因的第9位及女性肿瘤死亡原因的第7位［1］。近年来，恶性淋巴瘤的发病率逐年上升，成为目前发病率增长最快的恶性肿瘤之一。

乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)是糖酵解中主要的酶，能够催化乳酸变成丙酮酸。LDH包括LDH1至LDH5共5种同工酶，由于其在体内的分布广泛，血清LDH总酶活力的组织特异性差，其同工酶具有一定的组织特异性。乳酸脱氢酶同工酶-5(lactate dehydrogenase-5，LDH-5)主要存在于骨骼肌中［2］，不少器官病变与恶性肿瘤中发现LDH-5升高，Michael等［3］的研究发现，NHL患者中存在LDH-5组织异常表达现象。2003—2010年间有多篇研究指出，LDH-5在非小细胞肺癌或其他上皮性鳞癌、头颈部肿瘤、乳腺、肾癌及其他妇科肿瘤组织中存在异常表达［4-8］。本研究旨在评估血清LDH-5水平在NHL诊断与疗效监测方面的价值。

1 资料和方法

1.1 标本来源及分组

收集复旦大学附属肿瘤医院2008年8月—2011年4月均经影像学和病理学确诊的NHL患者(NHL组，n=105)，其中男性49例，女性56例，平均年龄(49.44±14.58)岁；弥漫大B细胞淋巴瘤68例、NK/T细胞淋巴瘤15例、滤泡性淋巴瘤12例、其他种类淋巴瘤10例。对28例采用R-CHOP或R-CEOP方案化疗的标本进行随访跟踪，每例患者留取初次化疗前、初次化疗后、第2、3、4次化疗后(即1个疗程)血清标本各1份。根据NHL临床实践指南中疗效标准进行评价，分为完全缓解(CR，n=12)、部分缓解(PR，n=14)与疾病稳定(SD，n=2)3组。另选择复旦大学附属肿瘤医院健康体检者(健康对照组，n=185)，其中男性82例，女性103例，平均年龄为48.10±13.42岁，均无肝、肾、心脏等系统疾病。

1.2 标本采集

采集3 mL静脉血于促凝管，在离心速率为4 000 r/min(相对离心力3 040×g)的条件下离心10 min分离血清后，吸取血清层，按标本收集要求分装，置于-40 ℃冰箱中冻存待测。

1.3 仪器与试剂

使用SPIFE 3000全自动电泳仪及与其对应的Helena Laboratories公司LDH同工酶检测试剂盒进行琼脂糖凝胶电泳。严格按照说明书进行扫描后在Platinum 3.0软件进行读片分区，计算出血清LDH-5含量。

1.4 统计学处理

用SPSS 13.0统计软件处理，数据用x±s表示；两组间比较用独立t检验；淋巴瘤患者预后随访LDH-5水平比较采用多元方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组的LDH-5水平比较

将5种同工酶总量设定为100%；测定LDH5的含量的百分比。本次实验分析发现，NHL组LDH-5水平为(10.38±3.52)%，而健康对照组为(7.89±2.67)%。两组差异有统计学意义(P＜0.01)。

2.2 NHL患者治疗前后的LDH-5水平变化

取CR和PR组26例患者首次化疗前与第4次化疗后LDH-5水平作比较，结果显示，首次化疗前为(9.53±1.50)%，第4次化疗后为(7.36±1.80)%，配对样本t检验结果显示，LDH-5水平治疗前后差异有统计学意义(P＜0.01)。PR与CR组患者随着化疗次数的增多，LDH-5逐渐下降，SD组LDH-5出现一过性下降，随后升高并超过最初的水平(表1)。

表 1 治疗效果与LDH-5水平比较图Tab. 1 Comparison of LDH-5 level in NHL patients with different treatment

2.3 NHL患者治疗过程中监测LDH-5水平变化

28例淋巴瘤患者预后随访测定LDH-5，结果显示，CR组患者下降最多，达26.17%，其次为PR组为19.85%，SD组LDH-5水平升高至11.51%。不同组别LDH-5水平差异有统计学意义(P=0.003，图1)。

2.4 LDH-5对于NHL患者预后分析

根据LDH水平将随访患者分为LDH高值组(LDH＞250)与LDH正常组(LDH＜250)，比较两组在4次化疗中LDH-5水平变化。结果显示，治疗前LDH-5正常组患者治疗后LDH-5水平逐渐降低，平均下降25.60%，治疗前LDH-5高值组患者治疗后LDH-5水平逐渐升高，平均升高4.83%(图2)。

图 1 不同组别患者LDH-5含量比较Fig. 1 Comparison of LDH-5 level in NHL patients with different treatment

图 2 LDH分组患者LDH-5随访结果Fig. 2 Comparison of LDH-5 level in NHL patients with different LDH group

3 讨 论

通过比较NHL患者与正常人群血清LDH-5水平，分别为(10.38±3.52)%和(7.89±2.67)%，可以清楚地发现NHL患者LDH-5水平异常增高。现有文献均从不同方面研究证实组织学LDH-5存在增高表达，仅两篇涉及到LDH-5血清含量变化［3,10］。本文结果提示，LDH-5与肿瘤发生、发展相关，可以作为临床诊断治疗NHL的重要标志物。

通过对28例患者4次化疗后随访发现，治疗有效的NHL患者在化疗中LDH-5逐渐降低，CR组下降达26.17%，PR组为19.85%；SD组LDH-5水平升高，LDH-5含量与患者疾病进展密切相关(P＜0.05)。现有参考文献仅见LDH水平能够作为鼻咽癌局部化疗的预后指标［8］，并没有涉及到LDH-5在NHL中疗效监测方面作用。LDH-5水平变化基本与疾病进程相符，提示其可用于辅助临床判断NHL化疗疗效检测。在肝充血、肝炎、肝损伤、骨骼肌损伤及心肌梗死、充血性心力衰竭时，LDH-5也会升高，本研究中28例患者均经R-CHOP或R-CEOP化疗，可能在化疗过程中有肝脏和心脏损伤，在选取病例同时已检测肝、肾功能，均正常。

Federico、M.D.Anderson肿瘤中心等都将LDH列为评价淋巴瘤预后的主要指标之一［11］。本文将LDH高值组患者归类分析，发现第4次化疗后LDH-5水平较治疗前平均升高4.83%；而LDH水平正常患者第4次化疗后较治疗前平均下降25.60%。提示LDH高于正常值患者预后不良：随着化疗次数增加，LDH-5水平逐渐升高的患者预后也较差。

本研究主要讨论血清LDH-5的水平变化，并未涉及组织标本，所用病例数较少，结果可能有偏倚。近年来有多篇研究指出LDH-5分别在非小细胞肺癌或其他上皮性鳞癌、头颈部肿瘤、乳腺、肾癌及妇科肿瘤的组织标本中均存在异常增高的情况［4-8］。这些研究从组织学方面印证了血清LDH-5变化与肿瘤发生、发展显著相关，随着对LDH-5研究的不断深入，其在NHL诊断与疗效检测方面的价值将进一步被临床肯定。

［1］ American Cancer Society Inc. Cancer Facts & Figures, 2012：1-62 ［EB/OL］. ［2012-11-20］. http：//www.cancer.org/ acs/groups/content/@epidemiologysurveilance/documents/ document/acspc-031941.pdf.

［2］ 郭林, 高翔, 左桂兰. 血清乳酸脱氢酶及其同工酶在卵巢癌诊治中的初步应用［J］. 诊断学理论与实践, 2003, 2(4)： 300-302.

［3］ ALEXANDRA G, MICHAEL I K, FRANCESCO P, et al.Lactate dehydrogenase 5 expression in non-Hodgkin B-cell lymphomas is associated with hypoxia regulated proteins［J］. Leuk Lymphoma, 2008, 49(11)： 2181-2186.

［4］ MICHAEL I K, ALEXANDRA G, EFTHIMIOS S. Lactate dehydrogenase isoenzymes 1 and 5 differential expression by neoplastic and stromal cells in non-small cell lung cancer and other epithelial malignant tumors ［J］. Tumor Biol, 2003, 24： 199-202.

［5］ MICHAEL I K, EFTHIMIOS S, ALEXANDRA G, et al. Lactate-dehydrogenase 5 expression in squamous cell head and neck cancer relates to prognosis following radical or postoperative radiotherapy［J］. Gynecol Obstet Invest, 2009, 67： 162-168.

［6］ GIAN K, AHMAD K, WULF S, et al. Lactate-dehydrogenase 5 is overexpressed in non-small cell lung cancer and correlates with the expression of the transketolase-like protein 1［J］. Diagn Pathol, 2010, 5： 22-32.

［7］ HAN X, VLADIMIR A V, MARIA J M, et al. LDH-A inhibition, a therapeutic strategy for treatment of hereditary leiomyomatosis and renal cell cancer (HLRCC)［J］. Mol Cancer Ther, 2009, 8(3)： 626-635.

［8］ SELAHATTIN T, ENIS O, KADRI A, et al. Serum lactatedehydrogenase level is a prognostic factor in patients with locoregionally advanced nasopharyngeal carcinoma treated with chemoradiotherapy［J］. Cancer Invest, 2007, 25： 315-321.

［9］ ALPER S, RAMAZAN S, ERSIN F. The utility of lactate dehydrogenase isoenzyme pattern in the diagnostic evaluation of malignant and nonmalignant ascites［J］. J Nat Med Assoc, 2005, 97(1)： 79-84.

［10］ YANISLAV K, HIROYUKI U, YOKO T I, et al. Lactate dehydrogenase-5 (LDH-5) expression in human gastric cancer： association with hypoxia-inducible factor (HIF-1a) pathway, angiogenic factors production and poor prognosis［J］. Ann Surg Oncol, 2008, 15(8)： 2336-2344.

［11］ NCCN (National Comprehensive Cancer Network) Practice Gudielines in Oncology Version 2. 2012 in Non-Hodgkin’s Lymphomas［EB/OL］. ［2012-11-20］. http：//www.nccn. org/professionals/physician_gls/f_guidelines.asp.

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The level of LDH isoenzyme in non-hodgkin lymphoma patients and its preliminary application in disease monitoring

JIANG Ming-Lei, CHEN Zhu-jun, LU Ren-quan, GUO Lin (Department of Clinical Laboratory, Fudan University Shanghai Cancer Center; Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China)

GUO Lin E-mail: guolin5002002@yahoo.com

Background and purpose：Lactate dehydrogenase isoenzyme 5 (LDH5) is the main enzyme in glycolysis, which catalyze the oxidation of lactate into pyruvate. This study aimed to investigate the level of serum lactate dehydrogenase 5 (LDH-5) in non-Hodgkin’s lymphoma (NHL) patients and evaluation of LDH-5 level determination in disease curative effect monitoring. Methods：LDH-5 level of NHL patients (n=105) and healthy controls (n=185) were detected by agarose gel electrophoresis and 28 cases patients were detected and statistically analyzed. Results：The serum LDH levels were significantly higher in NHL patients (10.38±3.52)% than that in healthy controls (7.89±2.67)% (P＜0.01). The determinations after chemotherapy decreased progressively and have significant statistical difference (P＜0.05). The LDH-5 expression is significant correlated with NHL prognostic index. Conclusion：LDH-5 detection has a promising role in disease curative effect monitoring assessment of NHL.

LDH-5; Non-Hodgkin lymphoma; Agarose gel electrophoresis

R733.4

：A

：1007-3639(2013)01-0055-04

2012-08-31

2012-12-03）

郭林 E-mail:guolin5002002@yahoo.com

DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2013.01.010