草莓红颊的组培快繁与扶苗移栽技术

赖小芳，项玉英，王伯诚，陈银龙

(浙江省台州市农业科学研究院，浙江 临海 317000)

近年来，随着台州市草莓种植面积的不断扩大、销量不断递增，莓农迫切希望通过对草莓品种的更新换代来寻求该产业的利益最大化。红颊草莓具有长势旺、产量高、果型大、食味佳、外观美观、耐贮运和商品性好等优点，是很有发展前途的优良新品种［1］。自引进以来，面积逐年提升，种苗供不应求，深受莓农欢迎，目前已成为台州市的当家品种。草莓繁殖主要通过匍匐茎分株繁殖提供种苗，繁殖系数低，易感染病毒，产量和品质下降，影响其经济价值，成为阻碍草莓生产的主要问题。应用离体快繁技术不仅可以解决大量优质草莓种苗的供应，有利于品种提纯和更新，而且还可用于脱毒和无病毒种苗繁殖，加快新品种推广。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验选用仙居县田市镇提供的草莓新品种红颊，取其长势好、无病虫健壮母株的匍匐茎尖作为外植体。

1.2 试验方法

草莓茎尖诱导培养基为MS+6-BA 0.50mg·L-1+NAA 0.01mg· L-1［2］;增殖培养基为MS+NAA 0.02mg· L-1+6-BA(0.05，0.10，0.20，0.50，1.00，1.50mg·L-1)，共 6个;生根培养基分别为1/2MS+0.1%AC，1/2MS+NAA 0.02 ～ 0.05mg·L-1+0.1%AC、1/2MS+IBA 0.02 ～ 0.05mg·L-1+0.1%AC［3］，共 5 个上述培养基中添加白砂糖30 g·L-1、琼脂粉5 g·L-1，pH值5.8;培养室培养温度为 (23±2)℃，光照强度为1500 lx，光照时间为10 h·d-1。然后观察记载采用不同组培技术的培养效果，最后将长根苗移栽到事先准备好的3种不同基质配比的穴盘里，观察其移栽成活率。

移栽方法采用杭州锦海农业科技有限公司提供的金色3号育苗基质，草莓长根苗移栽到金色3号与珍珠岩按体积不同配比的基质中，移栽前将2种基质浇水拌均，移栽后再用洒水壶洒水定根，适当遮荫，保持基质湿润。

2 结果与分析

2.1 无菌苗的获得与不定芽诱导

将选取的材料用自来水冲洗1 h，然后置于无菌操作台上，用75%酒精振荡消毒20 s，再用0.1%升汞加Twin-80消毒8min，最后用无菌水冲洗5～6次，然后在无菌条件下切取0.5 cm左右长的茎尖，分别接到事先配制好的诱导培养基上。15 d后基部即有愈伤组织形成，以后愈伤组织块上慢慢分化出密密的绿色小芽，但这些小芽细弱且生长缓慢。

2.2 丛生芽的壮苗增殖培养

将丛生芽分割开来，分别接到不同的增殖培养基中，观察在各培养基中的生长情况 (表1)。处理1与2在20 d后其基部就有多个增殖芽出现，生长较快、植株健壮。如将基部的幼芽切成单芽继续继代培养，以此方法反复继代可获取大量的增殖芽，增殖系数为4～5，且丛芽生长健壮浓绿，继代周期适宜，一般为30～35 d;处理3与4上部零星叶片有玻璃化，生长较快;而6-BA浓度大于1.00mg·L-1的处理5与6形成的丛芽生长缓慢，茎叶变脆硬，易碎，继代困难，尽至无法接种继代，有效苗很少;随着6-BA浓度的增加，玻璃化程度有加重趋势，因此最适增殖培养基配方为MS+6-BA 0.10mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1。此外，室内光照强度与培养温度对试管苗生长影响也较大，如温度超过25℃，玻璃苗现象严重，试管苗最适培养温度为22 ～25℃，最适光照强度为1500 lx。

2.3 生根培养

把增殖培养基中的丛生植株取出，将丛芽分切成单芽转接到各个生根培养基中，观察它们的生长情况。从表2可以看出，红颊草莓的增殖芽在添加激素IBA的处理4与处理5中生长快、长势旺盛，25 d可长成高4～5 cm、具有5～6根左右新根的健壮植株，生根率达100%。而添加NAA则诱导了根部愈伤组织发生，方能生根，但根毛细弱，清洗麻烦且易伤害根系，移栽成活率较低，不适合作为生根培养基添加的激素。可见在1/2MS培养基中添加IBA可以促进生根［4］，提高平均根数，所以最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.05mg·L-1+0.10%AC。

表1 不同激素浓度对试管苗增殖与株高的影响

表2 不同激素与浓度对诱导生根与长势的影响

2.4 试管苗的移栽技术

将长根苗移至常温条件下室内炼苗，接受窗外散射光照射，经过1周左右的锻炼后，可见幼苗茎秆颜色变深，最好转为紫红色，表明幼苗已经具备适应外界环境的生理条件，此时即可选择晴天进行移栽［5］。移栽时将培养瓶内的小苗轻轻取出，用清水将根部附着的琼脂清洗干净，尽量不伤及根系。

经试验，红颊草莓长根苗适宜移栽到金色3号与珍珠岩按体积比1∶2混合基质中，移栽前将2种基质浇水拌均，移栽后再用洒水壶洒水定根，适当遮荫，保持基质湿润，长根苗移栽成活率达100%，无根苗成活率也比较高 (表3)。

表3 不同种类基质配比对移栽成活率的影响

另据试验经验，放置穴盘苗的环境不容忽视，若直接放置在闷热的连栋大棚或普通的塑料大棚里，即使盖上遮阳网成活率也会很低。穴盘苗宜放置在尼龙薄膜小拱棚内，小拱棚两头揭开，一直保持空气流畅，在小拱棚外面再搭置一层遮阳网，遮阳网高度适宜，以便于工作人员管理操作。放置穴盘的地面移栽的前1 d灌热开水杀虫消毒1次;移栽后若高温天气，每天揭膜喷水1次，若天气比较阴凉，3～5 d喷1次水。

3 小结与讨论

试验结果表明，草莓红颊茎尖诱导培养基为MS+6-BA 0.50mg·L-1+NAA 0.01mg·L-1，最适增殖培养基为 MS+6-BA 0.10mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1，增殖系数可达4～5，生根培养基为1/2MS+IBA 0.05mg·L-1+0.1%AC。在此过程中，要防止试管苗玻璃化现象，措施是降低激素6-BA浓度，同时可结合降低室内培养温度与光照强度;生根诱导阶段，在1/2MS培养基中添加IBA可以促进生根，提高平均根数，而添加NAA则诱导了根部愈伤组织发生，虽大部分能生根，但根毛细弱，清洗麻烦且易伤害根系，移栽成活率较低，不适宜作为生根培养基添加的激素。

试验中长根苗适宜移栽到金色3号与珍珠岩按体积比1∶2混合基质中，移栽成活率达到100%，甚至有些无根苗成活率也比较高。另外穴盘苗的放置环境与地面消毒也是不容忽视的一个重要环节。

［1］陈怀勐，高丽，路河，等.红颜草莓茎尖组培脱毒苗技术研究 ［J］.生物技术，2011(1):6-8.

［2］郭月玲，解振强，王永平，等.我国草莓组织培养生产研究现状及前景 ［J］.浙江农业科学，2010(6):12-13.

［3］谭文澄.观赏植物组织培养技术 ［M］.北京:中国林业出版社，1997:143.

［4］孙永平，高年春，张琼，等.红颊草莓组培快繁技术研究［J］.江苏农业科学，2011(5):63-64.

［5］狄文伟.草莓组织培养苗的驯化技术 ［J］.蔬菜，2010(7):11-12.