UF-1000i全自动尿有形成分分析仪的方法学性能评价

（长江大学荆州临床医学院 荆州市中心医院检验医学部，湖北 荆州434020）

UF-1000i全自动尿有形成分分析仪，是对尿有形成分做荧光色素染色后，利用流式细胞学原理来识别和计数尿中红细胞(RBC）、白细胞(WBC）、管型(CAST）、上皮细胞(EC）、细菌(BACT）、结晶(X，TAL）、精子(SPERM）及酵母菌(YLC）。它可以为临床诊治泌尿生殖系统疾病及全身相关疾病提供重要的信息[1]。在UF-1000i投入使用前，应对其分析系统进行性能验证，如果达到制造商规定的性能要求方可使用[2]。根据ISO15189：2007医学实验室认可准则的要求，我室通过对RBC、WBC、CAST、EC和BACT等5个定量参数的批内精密度、日间精密度、正确度、携带污染率和线性范围来验证该仪器的性能。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Sysmex UF-1000i全自动尿有形成分分析仪，配套原装试剂和质控物。

1.2 方法

1.2.1 批内精密度 收集患者新鲜尿液标本，RBC、WBC、CAST、EC和BACT各项参数选取低、高两个浓度的标本在UF1000i尿有形成分分析仪上重复检测11次，去掉第1次测试的结果，用余下的10次分别计算变异系数CV值。

1.2.2 日间精密度 使用两个水平的尿液有形成分质控物在UF1000i尿有形成分分析仪上连续检测20d，统计所有检测结果的均值、标准差SD和CV值。

1.2.3 正确度评估 由厂商组织，以ISO15189认证实验室(同济医院检验科）经过校准性能稳定的仪器为基准仪器，以我室使用的UF1000i尿有形成分分析仪为比对仪器，使用同批号两个水平的尿液有形成分质控物分别在基准仪器和比对仪器上连续检测5次，计算比对仪器与基准仪器检测结果均值的偏差(%），以此偏差评估我室UF1000i尿有形成分分析仪的测量正确度。

1.2.4 携带污染率测试 该测试用以测试仪器检测结果的携带污染率，从而评价仪器的自清洗效率。取1份RBC与BACT高值尿样，连续检测3次，结果为H1、H2、H3。然后立即取1份RBC与BACT低值尿样连续检测3次，结果为L1、L2、L3，按下列公式计算携带污染率，判断是否满足仪器携带污染率的要求(RBC：≤0.1%或≤5.0／μl，BACT：≤0.05%或≤5.0／μl）。

1.2.5 线性验证 选取接近预期上限的高值尿液样本，分别按100%、80%、60%、40%、20%的比例用鞘液进行稀释，每个稀释度重复测定2次，计算均值。将实测值与理论值作比较(偏离应满足RBC≤10%，WBC≤10%，EC≤30%，BACT≤20%），计算a（斜率）、b（截距）值，得出y＝ax＋b，验证线性范围。要求：a值在(1±0.05）范围内，相关系数r≥0.975。

1.2.6 生物参考区间验证 分别选取20位男女健康者，其检测结果至少90%在拟定的参考区间内，说明实验室使用的参考区间有效。

1.3 统计学分析

采用SPSS13.0软件进行回归、线性分析。

2 结 果

2.1 批内精密度

UF1000i尿有形成分分析仪批内精密度测试结果及统计分析见表1。

表1 批内精密度测试结果（n＝10）

2.2 日间精密度

UF1000i尿有形成分分析仪日间精密度测试结果及统计分析见表2。

表2 日间精密度测试结果（n＝20）

2.3 正确度评估

UF1000i尿有形成分分析仪正确度评估结果及统计分析见表3、4。

表3 低值比对结果及统计分析（n＝5）

表4 高值比对结果及统计分析（n＝5）

2.4 携带污染率测试

UF1000i尿有形成分分析仪携带污染率测试结果及统计分析见表5。

表5 携带污染率测试结果及统计分析

2.5 线性验证

UF1000i尿有形成分分析仪线性验证结果见表6～9，图1～4。

表6 RBC线性验证测试结果

图1 RBC线性图

表7 WBC线性验证测试结果

图2 WBC线性图

表8 EC线性验证测试结果

图3 EC线性图

表9 BACT线性验证测试结果

图4 BACT线性图

2.6 生物参考区间验证

UF1000i尿有形成分分析仪生物参考区间验证结果见表10。

表10 生物参考区间验证结果（n＝20）

3 讨 论

UF-1000i全自动尿有形成分分析仪使用流式细胞计数法(FCM）技术来获得尿细胞前向散射光及前向荧光的强度参数[3]。在对细胞中的特定物质进行荧光染色并调节到悬浮状后，在鞘液的包围和约束下，细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出，形成细胞液柱。当液柱通过检测区在入射的激光束照射下产生前向散射光和侧向散射光，它们分别反映细胞大小和颗粒信息，根据这些特性可以将细胞分类，从而定量显示尿红细胞、白细胞、上皮细胞、管型和细菌等。这些指标正是诊断泌尿系疾病，特别是肾脏疾病的重要实验指标之一[4]。

本实验结果表明，仪器的批内精密度、日间精密度、正确度、携带污染率和线性范围均符合厂商和质控品要求。在批内精密度方面，选取的11次重复测定结果去掉第1次，可以将携带污染率降到最低，同时也避免了随机误差的产生。在日间精密度方面，由于尿液的稳定性很差，故用质控品来代替连续行20d的检测。从表1和表2可以看出，无论是低浓度样本还是高浓度样本，各项指标的CV值都比要求的低很多，说明仪器的重复性非常好。至于正确度方面，我室利用了外院校准性能稳定的仪器作为基准仪器进行比对的方法，其偏差均远小于偏差要求。携带污染率是仪器性能评价中不可避免的评价指标，尤其是在检测泌尿生殖系统疾病的标本时，携带污染率已成为影响测定结果的因素之一。表5中红细胞和细菌的携带污染率均符合仪器说明书的要求。我室还对各项参数的线性范围进行验证。由于接近预期上限的高值尿液样本很难获得，故将尿液样本中加入适量的抗凝血作为红细胞和白细胞高值样本，加入适量的移行上皮细胞和扁平上皮细胞作为上皮细胞高值样本，加入适量的大肠埃希菌和葡萄球菌(泌尿系统感染的主要病原菌）作为细菌高值样本[5]。从表6～表9和图1～图4看出，各项参数的相关系数r均在0.99～1之间，它们在各自的范围内呈线性关系。本实验室曾调查过荆州地区1860名健康人群[6]，并建立了自己的生物参考区间(见表10），然后根据NCCLS C28-A2文件推荐的方法进行验证，此次验证各项参数均在拟定的生物参考区间内。

综上所述，我室UF-1000i全自动尿有形成分分析仪精密度好，正确度高，携带污染率低，线性范围广，各项性能均符合仪器要求范围，可应用于临床。

[1]李岩，王会平，李斌，等 .UF-1000i全自动尿液沉渣分析仪的红细胞携带污染实验及分析 [J].现代检验医学杂志，2011，26（5）：131-133.

[2]中国合格评定国家认可委员会 .医学实验室质量和能力认可准则在体液学检验领域的指南 [S].CNAS-GL20，CNAS，2008.

[3]杭建峰，孙朝晖，石玉玲，等 .Sysmex UF-1000i自动尿沉渣分析仪的性能分析及临床应用 [J].检验医学，2011，26（2）：108-110.

[4]王延群，公衍文.UF-1000i尿液有形成分分析仪、干化学法和镜检法对尿液分析的比较 [J].检验医学，2011，26（12）：858-860.

[5]黄震，迟秀文，束振华，等 .UF-1000i临床检测性能评价及复检条件探讨 [J].现代检验医学杂志，2011，26（1）：76-78.

[6]张娟安，李承彬，王昌富，等 .UF-1000i尿液分析仪有形成分生物参考区间的调查 [J].现代检验医学杂志，2011，26（1）：130-131.