瑞香狼毒炮制前后毒性变化作用的研究

王 星 王永明 田妮娜

(1.宁夏民政厅民康医院，宁夏 银川 750000；2.宁夏医科大学总医院，宁夏 银川 750000；3.兰州市食品药品检验所，甘肃 兰州 730000)

瑞香狼毒始载于《神农本草经》，其辛、苦，平，有毒。具有散结逐水，破积杀虫之功效[1]；瑞香狼毒是《回药本草》中明确记载的，在宁夏主要分布于六盘山地带，其根入药，在回族民间，狼毒主要用于抗炎镇痛、清热燥湿、抗结核、治疗疥癣、杀虫等[2]，现代药理研究表明瑞香狼毒具有抗肿瘤、抗HIV病毒等作用[3]。

李时珍在《本草纲目》[4]中写到：狼毒“有大毒，观其名，知其毒矣”，狼毒浆汁可刺激皮肤长水泡；误食或过量，会刺激口腔咽喉，并可见恶心、呕吐、腹痛等症状[5]。

所以为降低毒性，要将瑞香狼毒进行炮制后才入药[2,6]。宁夏地区对其炮制方法以醋灸为主[6]，本实选用瑞香狼毒醋炙最佳工艺[7]，即炒制温度150℃，炒制时间8min，醋用量25%的炮制方法对狼毒进行炮制，再进一步考察其炮制前后毒性的变化，为瑞香狼毒的进一步研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 药品及试剂

狼毒饮片，宁夏明德中药饮片有限公司，产地宁夏六盘山。白醋，天津市利民调料有限公司。冰醋酸，天津市大茂化学试剂厂，批号2008820；二甲苯，北京五二九五二化工厂，批号：83090501；生理盐水，广东大冢制药有限公司，批号：B121211。

1.2 主要仪器

美的电磁炉及不锈钢锅，中药炮制实验室；电子调温电热套，天津市泰斯特仪器有限公司；电子天平CP114，奥豪斯仪器（上海）有限公司制造；循环水式多用真空泵SHB-Ⅲ，郑州长城科工贸有限公司；旋转蒸发器R206上海申生科技有限公司。

1.3 实验动物

昆明种小鼠700只，体重18～22g，雌雄各半，由宁夏医科大学实验动物中心提供。饲料、饮水、垫料均符合卫生标准。

1.4 狼毒生品水煎液和醋炙狼毒水煎液的制备[8，9]

1.4.1 狼毒生品煎煮液的制备

称取药材瑞香狼毒生品325g，稍拍碎，煎煮2次，每次加蒸馏水10倍量（即蒸馏水3250mL），第一次煎煮时，需浸渍30min。每次煎煮30min，合并滤液，浓缩至 500mL，浓度为 0.65g·mL-1，4℃冷藏。

1.4.2 狼毒醋制品煎煮液的制备

1）炮制品的制备 称取药材瑞香狼毒生品314g，稍拍碎，加白醋（市售）78.5mL，浸渍 10min，使用电磁炉，炒制 8min(温度为 150℃)，待醋被吸干，取出，自然晾干。

2）煎煮液的制备 具体方法参照1），最后得醋制品煎煮液浓度为 0.69g/mL，4℃冷藏。

1.5 毒性测定[10]

灌药前小鼠禁食12h，不禁水，灌胃4h后常规饲养。预实验取80只小鼠，分为2个药品组，每组40只，雌雄各半，生品组一次以最大浓度（0.65g·mL-1），最大体积（0.4mL·10g-1）体重灌服，醋制组以最大浓度（0.69g·mL-1），最大体积（0.4mL·10g-1）体重灌服，各组给药后连续观察7d，观察小鼠有无异常反应和死亡情况，其实验结果如下表1。

表1 毒性测定实验结果

因受药物浓度和体积限制，求不出小鼠Dm(100%死亡率)，故LD50无法求出。

1.6 最大耐受量（是指动物能够耐受的而不引起动物死亡的最高剂量）测定[10]

预实验：取400只小鼠，雌雄各半，分为2个药品组，各药品组再分10个剂量组，每组20只，即生品组为①、②、③、④、⑤、⑥、⑦、⑧、⑨、⑩。醋制组同上分组。

表2 生品组给药量及小鼠死亡情况

各药品组中每组小鼠给药量按照最大给药浓度的0.9倍依次递减，进行灌服。每组一日内重复给药2次，每次间隔4h。即生品组单次给药量为：①0.4mL·10g-1×0.9×0.65g·mL-1，其他组依次类推。 醋制组单次给药量为：①0.4mL·10g-1×0.9×0.69g·mL-1，其他组以此类推。 给药后连续观察14d，观察小鼠死亡情况。给药14d内，其实验结果见表2，醋制品实验结果见表3。

表3 醋制品组给药量及小鼠死亡情况

正式试验：取120只小鼠，雌雄各半，分为2个药品组，每个药品组再分3个剂量组，每组20只。即生品组为①、②、③，醋制品组为：④、⑤、⑥。每组一日内重复灌服给药2次，每次间隔4小时。给药后连续观察7d，观察小鼠死亡情况。其实验结果见表4。

表4 瑞香狼毒醋制品及生品最大耐受量

由以上实验结果可知，狼毒生品最大耐受量为19.5g·kg-1，狼毒炮制品最大耐受量为28.98g·kg-1，其毒性较生品狼毒有所降低，即用狼毒最佳炮制工艺可以降低生品狼毒的毒性。

2 讨论

瑞香狼毒始载于《神农本草经》[11]，其云:“狼毒，味辛平。”其性味描述未提到瑞香狼毒的毒性，直至汉末的《名医别录》[12]中描述：“性平，有大毒”，瑞香狼毒的毒性才被后世多本本草名著所记录。现代《中药大辞典》[1]记载瑞香狼毒的性味为：“味苦辛，性平，有大毒”；《宁夏回药志》对其描述为：“狼毒的毒性较大”，但对其毒性大小没有具体数字指标。本实验通过对宁夏产瑞香狼毒炮制前后的毒性变化进行研究，发现：生品组一次以最大浓度（0.65g·mL-1），醋制组以最大浓度（0.69g·mL-1），都以最大体积（0.4mL·10g-1）灌服，7 天后观察小鼠反应情况，生品组40只小鼠只有12只小鼠死亡，炮制品组有6只小鼠死亡，因此受药物浓度和体积限制，无法得到小鼠Dm(100%死亡率)，故LD50无法求出，实验结果还说明：用醋炙优化法进行炮制后，瑞香狼毒的毒性有所降低。《本草蒙筌》有“用醋注肝经，且资住痛”之说，醋味酸、涩，入肝经，具有收敛、散瘀、止痛、解毒等功效。瑞香狼毒经醋炙后，其生物碱类成分与醋中酸性成分结合，可形成水溶性的盐从而降低毒性，使用药安全性提高。因在生品组和炮制品组中，40只小鼠中均有数目不等的死亡，故用最大耐受量（MTD）来考察瑞香狼毒的毒性大小。经实验结果发现，瑞香狼毒生品最大耐受量为19.5g·kg-1，瑞香狼毒炮制品最大耐受量为28.98g·kg-1，炮制后其毒性有所降低。

由以上内容可以得出结论：宁夏回族民间的醋炙工艺炮制狼毒可降低狼毒的毒性，这为进一步深入的研究宁夏地区产瑞香狼毒药材，进一步拓宽瑞香狼毒的市场开发奠定了一定基础。

［1］江苏新医学院.中药大辞典（下册）[M].上海：上海人民出版社，1977，1898.

［2］刑世瑞.宁夏回药志（下册）[M].宁夏:宁夏人民出版社，1998，273.

［3］张美妮，刘玉玺，王明正.瑞香狼毒研究进展[J].山西医药杂质，2000，29（3）：213-215.

［4］李时珍.本草纲目(精华本)[M].北京:科学出版社，1998(43):192-193.

［5］李秀英，主编.有毒中药鉴别、炮制与保管[M].北京:科学技术文献出版社，1996:76-79.

［6］李志明.宁夏药材炮制规范[M].宁夏:宁夏人民出版社，1981:450-451.

［7］周丽，王永明，宋玉霞，等.回药瑞香狼毒最佳炮制的工艺研究[J].宁夏医学杂志，2011，33(12)：1145.

［8］李怡文，钟赣生，柳海艳，等.海藻、甘草配伍组合及其复方海藻玉壶汤的急性毒性实验比较研究[J].科技导报，2012，30（34）：19-20.

［9］龚千锋，周道根，张的凤，等.马钱子不同炮制品急性毒性实验研究[J].南昌:江西中医学院学报，2007，19(3):47-48.

［10］陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1993，118.

［11］徐树楠，牛兵占，编著.神农本草经[M].石家庄：河北科学技术出版社，1996：131.

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