冰冻红细胞的制备方法及临床应用

李玉秋 时卉丽 孙晓红 程菲 赵红

随着临床成分血的广泛开展，稀有血型血液的临床用量也逐年增加，特别是急诊抢救和产妇大出血，短时间内紧急需要的血液比较多。我中心应用ACP215全自动细胞处理仪制备冰冻红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞，2010年全年冰冻红细胞304 U，解冻红细胞145 U。

1 材料与方法

1．1 材料 去白悬浮红细胞(2 U/袋)，甘油(57%，160 ml，北京博德桑特输血器材公司);9%NaCl(80 ml，北京博德桑特输血器材公司);0．9%NaCl(1 000 ml，山东威高集团医用高分子制品股份有限公司);羟乙基淀粉40氯化钠注射液(500 ml，山东齐都药业有限公司);MAP红细胞保存液(山东威高集团医用高分子制品股份有限公司);转移袋(200 ml，山东威高集团医用高分子制品股份有限公司);冰冻转移袋(500 ml，山东威高集团医用高分子制品股份有限公司)，全自动细胞处理系统配套的甘油化耗材(REF225)和去甘油化耗材(REF235)(美国血液技术公司)。所有耗材均在有效期内使用。

1．2 主要设备 全自动细胞处理系统(美国血液技术公司)，－80℃(三洋冰箱)。RC12BP大容量低温离心机(美国Kendro公司);37℃电热恒温冰箱(天津市泰斯特仪器有限公司)，全自动无菌管对接机(日本Terumo公司)。

1．3 红细胞甘油化 2～6℃保存6 d内的去白悬浮红细胞与200 ml转移袋用无菌接口机连接，2 500 r/min速度离心12 min，将离心后的血液轻轻放入分离夹中，使上清液全部流入200 ml转移袋中，用卡子卡住转移袋，热合封口，把余下的红细胞与冰冻转移袋进行连接，倒置血袋，使血袋中的血液缓慢、自然地流入袋中。启动ACP215型全自动细胞处理系统，安装甘油化管路，血袋固定在振荡器上，设定甘油化程序后，即自动加入57%甘油，边加边震荡，操作完毕，静置30 min，将甘油化血液以3 034 r/min速度离心5 min，在用分浆夹分离出多余的甘油，红细胞比积控制在75% ～80%，并弃去转移袋，甘油化红细胞平放于盒中，于－80℃冰箱冰冻保存。

1．4 红细胞去甘油化 冰冻红细胞以－80℃冰箱取出后迅速放入37℃水浴箱内，不断摇动使血袋加速融化，用无菌接口机将冰冻红细胞与去甘油化管路连接，启动ACP215全自动细胞处理系统，设定去甘油化程序，开始稀释和洗涤操作制备冰冻解冻去甘油红细胞。

2 病例分析

2．1 患者1，男56岁，2011年10月9日入院，诊断腹部闭合性损伤，失血性休克，急症手术，手术诊断肝破裂，腹膜后血肿，肠系膜破裂，失血性休克，当天紧急输注去甘油化红细胞10 U，10月10日血常规检测。RBC 3．5×1012/L PLT 45×109/L WBC 6．8 ×109/L HGB 118 g/L HCT 35．4%。查:PT 21s，PA 47%，INR 1．68，FIB 1．87 g/L，10 月 11 日又输注去甘油化红细胞4 U，再次检测 PLT 45×109/L，RBC 2．5×1012/L HGB 81 g/L WBC 4．5×109/L HCT 24．4%，10月12日再次输注去甘油化红细胞4 U。

2．2 患者2，女，25岁，2011年10月13日入院，孕足月胎膜早破，胎儿窘迫，急症剖宫手术，查 PT 38．66，S APTT 101 FIB 0．17HGB 60 g/L。来院途中出血1 000 ml(2 h内)，血常规检查:WBC 33．5 ×109/L，NEUT 94．4%，HCT 14．9%PCT 116 ×109，HGB 50 g/L，紧急输血去甘油化红细胞4 U，10月14日查体:PT 17．5 s，PA 62%，FIB 2．19 g/L，APTT 34．2。血常规:WBC 35．8 ×109/L，NEUT 93．7%，HGB 61 g/L，HCT 18．2，PLT 67×109/L。

3 讨论

冰冻红细胞是借助冰冻保护剂(甘油)低温保护的红细胞。主要用于稀有血型和自身血的长期保存［1］。ACP215红细胞处理仪是一种全自动多功能的密闭系统，拥有震荡混合平台及连续流动洗涤系统，可用于红细胞的甘油化及去甘油化，其中去甘油洗涤需40～50 min(人工操作则需数小时)。可见，ACP215红细胞处理仪洗涤的速度快，全程时间明显缩短，提供目测的游离血红蛋白检测卡可及时观察洗涤的效果，洗涤过程完全封闭，减少污染，洗涤效果明显，洗涤后血液检测的指标达到国家规定的标准［2］。

临床使用冰冻红细胞时需洗涤去甘油，经过洗涤的去甘油红细胞去除了细胞的代谢产物和抗凝剂，减少输血中的不良反应，是较为理想的血液制品［3］。通过本文上述两个病例我们看到，冰冻红细胞的输注极大地改善和缓解了患者的症状，达到了治疗的目的。

1 田兆嵩主编．临床输血学．第2版．广州:广东人民出版社，1988．241．

2 中华人民共和国卫生部．全血及成份血质量标准．中华人民共和国卫生部血站基本标准．2000．

3 Lecak J，Young C，Hannon J，et al．Evaluation of red blood cells stored at 80 degrees C in excess of 10 years．Transfusion，2004，44:1306-1313．