新疆哈萨克族胃癌患者胃癌组织Smad4蛋白表达及意义

刘 玺，陈卫刚，刘晓燕，康 雪，郑 勇

(1 石河子大学医学院，新疆石河子 832000;2 石河子大学医学院第一附属医院)

我国是胃癌的高发区，胃癌病死率居各类癌症病死率的第一位［1］。研究发现，新疆哈萨克族人群胃癌病死率为41.3/10万，高于我国胃癌病死率的平均水平，也高于新疆地区汉族和维吾尔族胃癌病死率，居新疆少数民族之首。研究发现，TGF-β/SMADS信号通路与多种肿瘤的发生、发展有关，Smad4基因是TGF-β信号传导系统的重要中间环节，TGF-β/Smad4基因突变及表达缺失可导致多种肿瘤的发生发展［2～8］。目前，对新疆哈萨克族胃癌组织中Smad4蛋白表达水平及其在哈萨克族胃癌发病中的机制尚不明确。2010年10月～2012年10月，我们进行了相关研究。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 选择来源于新疆新源县哈萨克族胃癌研究现场的哈萨克族胃癌组织30份为胃癌组，选择来源于新疆伊犁哈萨克自治州友谊医院的哈萨克族正常胃黏膜组织30份为对照组。胃癌组织与正常胃黏膜组织均为经内镜下活检所得，均经病理学检查证实。标本冷冻于液氮中-80℃保存备用。

1.2 Smad4蛋白检测 采用Western blot法。组织经裂解液提取蛋白，采用Bicinchoninic acid法测定蛋白浓度并行蛋白定性。制备SDS-聚丙烯凝胶、上样样品后上样;经电泳、转膜(转膜时间为52 min)、脱脂奶粉封闭后，4℃一抗(兔抗人Smad4多克隆抗体)孵育过夜。冲洗一抗。室温下用二抗辣根过氧化物酶偶联的山羊抗兔IgG抗体孵育1 h，冲洗二抗后在X片上经化学发光法显影并扫描结果条带，测定光密度值。特异性基因光密度/管家基因光密度(β-actin)为Smad4基因蛋白相对表达量。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0软件，采用独立样本t检验，以P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

胃癌组、对照组Smad4蛋白表达水平分别为0.17 ±0.01、0.31 ±0.04，胃癌组明显低于对照组(P ＜0.05)。

3 讨论

Smad4基因是TGF-β信号传导通路的重要中间环节，对其信号传导具有重要影响。Smad4基因突变或表达缺失是胃癌发生发展的高危因素［9］。研究发现胃癌组织中Smad4蛋白表达水平降低［10］。Smad4基因沉默在早期贲门腺癌发病过程中也发挥了重要作用［11，12］。目前认为Smad4基因表达缺失、突变、甲基化和磷酸化导致了Smad4蛋白的失活。

我国少数民族中，新疆哈萨克族胃癌病死率居第一位。因患者聚居区地处我国新疆北部，患者以游牧生活为主，流行病学调查存在一定难度;加之当地基层医务人员对胃癌疾病的诊断和治疗研究比较薄弱，技术相对落后，因此开展有关肿瘤早期诊断、流行病学研究就显得尤为重要。本研究发现，哈萨克族胃癌患者胃癌组织中Smad4蛋白表达水平明显低于正常胃黏膜组织，提示新疆地区哈萨克族胃癌的发生与Smad4蛋白表达降低有关。研究发现，低分化癌组织Smad4蛋白表达低于高分化癌组织，低表达患者的预后也较差［13～15］。哈萨克族以游牧生活为主，有许多具有民族特色的饮食习惯，如食用馕、奶渣、烤肉等，绝大多数为高盐、熏烤类或腌制食物，熏烤类食物及高盐食物可增加胃癌的危险性。而熏烤食物在烹饪过程中，经高温分解和不完全燃烧产生大量3，4-苯并芘等多环芳烃类致癌物，可明显增加胃癌的发生率。研究证实，经常食用熏烤食品可以增加胃癌的危险性［16］。高盐或腌制食物可损伤胃黏膜，导致胃腔内壁细胞的萎缩和脱落，增加机体对致癌物的易感性［17］。哈萨克族食用的发霉奶渣对胃癌的发生也有明显的促进作用［18］。因此，哈萨克族胃癌发生率高的原因可能与其民族饮食习惯有关。

综上所述，新疆哈萨克族居民胃癌高发与TGF-β/SMADS信号通路中Smad4蛋白表达降低密切相关。由于细胞增殖、分化及凋亡相关的信号通路及生物因子较多，TGF-β/SMADS信号通路及其Smad4抑癌基因的作用尚需更深入的研究。

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