桑椹采摘后白藜芦醇含量的变化

朱祥瑞，杨逸文，占鹏飞，沈建栋

（1.浙江大学应用生物资源研究所，杭州 310058；2.安吉县超龙蚕业发展有限公司，浙江湖州 313300；3.湖州市农业科学研究院，浙江湖州 313060；4.湖州市南浔尚豪蚕桑专业合作社，浙江湖州 313000）

桑椹采摘后白藜芦醇含量的变化

朱祥瑞1，杨逸文2，占鹏飞3，沈建栋4

（1.浙江大学应用生物资源研究所，杭州 310058；2.安吉县超龙蚕业发展有限公司，浙江湖州 313300；3.湖州市农业科学研究院，浙江湖州 313060；4.湖州市南浔尚豪蚕桑专业合作社，浙江湖州 313000）

为探索采摘后的桑椹白藜芦醇含量的变化，将采摘后放置1～30 h的桑椹，进行HPLC分析，结果显示，采摘后1～4 h，白藜芦醇含量略有上升，随后开始迅速下降，18 h后白藜芦醇已下降约3/4。

桑椹；白藜芦醇；含量；变化

桑椹（mulberry fruit）是桑树（Morus alba L.）的成熟果实，又名桑果、桑枣，属浆果，营养丰富，功能独特，是一种宝贵的天然资源。桑椹可以鲜食，也可加工成果汁、果酒等食品。据文献报道［1］，桑椹含有白藜芦醇，这为桑椹在功能性食品的开发利用，提供了新的途径。但是，对于桑椹采摘后一定时间内的白藜芦醇含量变化尚未见报道。为充分利用桑椹白藜芦醇，了解桑椹采摘后其含量的变化，笔者进行这方面的实验，结果如下。

1 材料与方法

1.1 材料

桑椹：大10成熟果实，2012年5月，采摘于湖州市南浔尚豪蚕桑专业合作社桑园。

白藜芦醇标准样品：美国Sigma Chemical Co．LTD产品。

乙腈：美国霍尼韦尔公司（Honeywell）色谱级产品。

1.2 仪器

LC-6A高效液相色谱仪、UV检测器：日本岛津公司。

色谱柱：Hypersil ODS柱（250 mm×416 mm，5 μm），美国Thermo Scientific公司。

分析天平：赛多利斯BSA124S，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司。

1.3 方法

1.3.1 白藜芦醇标准样品的制备

精密称取白藜芦醇标准样品2.5 mg，用无水乙醇溶解并定容于25 ml容量瓶中。

1.3.2 标准曲线的绘制

分别吸取白藜芦醇标准样品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，用无水乙醇定容于100 ml容量瓶中，摇匀，得浓度分别为1、2、3、4、5 mg/L白藜芦醇标准系列。以无水乙醇为空白对照，各进样10 μl，在306 nm波长下进行HPLC分析。以样品白藜芦醇量为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），计算曲线方程（n=5）和相关系数（R2）。

1.3.3 桑椹试样的制备

采摘适熟的桑椹，平铺，不重叠、挤压，以免桑椹受损。在桑椹采摘后的1、2、3、4、5、6、8、10、12、18、24、30 h，分别称取桑椹100 g，经高速匀浆器匀浆，微孔过滤，收集滤液，即为试样，供HPLC测试之用。测试前，试样置于低温冰箱-50℃保存。

1.3.4 桑椹试样的HPLC测定

（1）色谱条件

流动相：乙腈：水（35：65）

检测波长：306 nm

柱温：室温

流速：1 ml/min

进样：10 μl

（2）样品分析

在与测定白藜芦醇标准样品相同的条件下，测试各桑椹试样的白藜芦醇含量。

2 结果与分析

2.1白藜芦醇标准曲线

按1.3.2方法，白藜芦醇标准样品以及桑椹试样的HPLC分析图分别见图1和图2。

图1 白藜芦醇标准样的HPLC图Fig 1HPLC chromatogram of resveratrol

图2 桑椹试样HPLC图Fig 2 HPLC chromatogram of mulberry fruit sample

以白藜芦醇标准样品的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归分析，绘制标准样品的标准曲线见图3。

图3 白藜芦醇标准样品的标准曲线Fig 3The standard graph of resveratrol

图3曲线经计算得出回归方程为：y=136 520x-709.42，R2=0.9999，说明线性关系良好。

2.2 精密度和重现性

精密吸取白藜芦醇标准样品，在同样条件下用HPLC分别测定5次，其RSD为0.65，实验精密度良好。

取同一桑椹试样，制备5份样品，测定白藜芦醇含量，其相对标准偏差为0.79，实验重现性良好。

2.3 桑椹试样白藜芦醇含量变化

将采摘后放置不同时间后处理的桑椹试验，经HPLC测定后，结果见图4。

从图4可以看出，桑椹刚采摘的时候，从1～4 h，白藜芦醇含量略有上升，从9.5 mg/L到10.6 mg/L。从第5h开始，白藜芦醇含量逐渐下降，且随着放置的时间延长，下降幅度增大，到第18 h，白藜芦醇的含量仅为1.7 mg/L左右，约为1～4 h时的1/4。

图4 桑椹采摘后白藜芦醇含量的变化Fig 4 The content change of resveratrol after mulberry fruit was

3 讨论

（1）白藜芦醇是植物在抵抗真菌的侵染、机械和紫外线等伤害时产生的植保素类次生代谢产物［2］。因此，采摘后1～4 h，桑椹白藜芦醇含量略有上升的原因，可能是桑椹采摘时受到一定的机械刺激所致。

（2）采摘后5 h，随着放置时间的延长，桑椹白藜芦醇含量逐渐下降，这可能是桑椹采摘后，逐渐变质，桑椹细胞内的某些分解酶类开始作用，转变为白藜芦醇的代谢产物［3］。

（3）在开发白藜芦醇产品时，为了获得和保持较高含量的白藜芦醇，应该在桑椹采摘后4 h内进行处理。

（4）本试验测得的桑椹（汁）的白藜芦醇最高含量，比前期试验结果［4］偏高，接近于桑椹果皮中的白藜芦醇含量，这可能与采用高速匀浆器粉碎桑椹，造成桑椹细胞充分破碎有关，也可能与机械损伤的诱导以及白藜芦醇苷转化为白藜芦醇有关［5］。

［1］朱祥瑞，费建明，杨逸文，等.桑椹和桑枝中白藜芦醇的提取及含量测定［J］.蚕业科学，2007，33（1）：110～112.

［2］Leila Belguendouz，Lucie Fremont，Alain Linard.Resveratrol inhibits metal ion-dependent and independent peroxidation of porcine low-density lipoproteins Original Research Article［J］.Biochemical Pharmacology，1997，53（9）：1347～1355.

［3］王娅宁，尉亚辉，郝浩永，等.白藜芦醇代谢物的研究进展［J］.西北植物学报，2007，27（4）：0852～0857.

［4］占鹏飞，张燕，朱祥瑞.桑树各部位中白藜芦醇的提取与测定［J］.蚕桑通报，2008，39（4）：19～22.

［5］董学伟，余慧琳，陈莉，等.酶转化虎杖苷制备白藜芦醇［J］.食品与发酵工业，2008，34（12）：122～124.

“浙凤一号”等2对桑蚕新品种通过审定

由浙江省农科院蚕桑研究所育成的桑蚕新品种“浙凤一号”和“华菁×平72”在2013年1月28日召开的第45次省农作物品种审定会议上通过审定。

“浙凤一号”是以降低蚕种生产成本为目标的我省首个中丝量单交新品种，原名雌29×卵36，于2007年育成，2008～2012年完成新品种实验室、农村试验。该品种具有发育齐整、茧形大、茧丝质优的特点，蚕种生产成本较常规品种可降低20%以上。适宜在我省各蚕区饲养，尤其在环境、叶质条件较好的季节和区域更能发挥其优势。

“华菁×平72”是我省首个多丝量雄蚕品种，于2008年育成，2009～2012年完成新品种实验室、农村试验。该品种具有发育整齐，体形大，茧型匀整、茧丝质优的特点，我省各蚕区均可饲养，尤宜在环境、叶质条件较好的季节和区域饲养。

（浙江省农科院蚕桑研究所）

Content Change of Resveratrol in Fresh Mulberry Fruit after Picked up

ZHU Xiang-rui1，YANG Yi-wen2，ZHAN Peng-fei3，SHEN Jian-dong4
（1.Institute of applied bioresources,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China;2.Anji Chaolong Sericultural Development Company,Anji 313300 Zhejiang,China;3.Huzhou Academy of Agricultural Science，Huzhou 313000 Zhejiang,China;4.Shanghao Sericultural Professional Cooperation.Nanxun 313000 Zhejiang,China）

To investigate the content change of resveratrol in fresh mulberry fruit after picked up,the resveratrol in fresh mulberry fruit was determined by HPLC after picked 1～30 hours.The experiment result showed that the content of resveratrol had slight increase after picked 1～4 h,then it decreased fast,at last,the resveratrol was left 1/4 of the original content after picked up 18 h.

fresh mulberry fruit;resveratrol;content;change

S886.9

A

0258-4069（2013）01-

项目来源：湖州市科技局攻关计划农业项目（2012C22154）

朱祥瑞（1957-），男，副教授，从事蚕业资源开发利用研究。Email：xrzhu@zju.edu.cn