冠心病患者血浆高迁移率族蛋白B1与白细胞介素18水平变化研究

许国新，杨凤英，陈郁钢

(1、无锡市第四人民医院检验科,江苏无锡214062；2、太仓出入境检验检疫局江苏太仓215400；3、太仓妇幼保健所，江苏太仓215400)

冠心病患者血浆高迁移率族蛋白B1与白细胞介素18水平变化研究

许国新1，杨凤英2，陈郁钢3

(1、无锡市第四人民医院检验科,江苏无锡214062；2、太仓出入境检验检疫局江苏太仓215400；3、太仓妇幼保健所，江苏太仓215400)

目的研究冠心病(CHD)患者血清白细胞介素-18(IL-18)、高迁移率族蛋白B1(HMGBl)水平变化的临床意义，为CHD的诊疗提供参考。方法CHD组102例为本院确诊患者，对照组52例为健康体检者，采集早晨空腹静脉血5ml于EDTA-Na2抗凝管中，3000 r/min离心15 min后采用ELISA法测定HMGBl、IL-18水平。结果CHD组HMGBl、IL-18水平高于对照组(P＜0.01)，CHD组中HMGBl、IL-18水平在不同病变程度各组间差异有统计学意义(P＜0.05)，其水平与冠状动脉病变程度呈正相关。结论HMGBl、IL-18水平变化佐证冠心病的发生和发展中炎症反应在起着重要作用，血浆HMGBl、IL-18水平检测可作为冠心病病程变化的参考指标。

冠心病；高迁移率族蛋白Bl；白细胞介素-18

冠心病(coronary heart disease，CHD)的发病由多种因素引起，冠状动脉粥样硬化(AS)为CHD的病理基础，在其发病过程中炎症反应的作用极其重要。高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)与白细胞介素-18(interlekin-18，IL-18)均为重要的炎症因子[1，2]。细胞在机械损伤和坏死过程中能够释放HMGB1，介导单核-巨噬细胞向损伤或坏死部位聚集。前炎症细胞因子IL-18是炎症反应的一个中枢性调节因子，在血管粥样硬化斑块中有表达，而没有粥样硬化的血管中检测不到IL-18。本文通过观察CHD患者血浆HMGBl、 IL-18水平变化，以期为冠心病的诊断与治疗提供新的策略和靶位。

1 材料与方法

1.1 研究对象CHD组为2012年3月至2013年3月本院明确诊断的CHD诊断标准[2]，确诊的CHD住院病人102例，男性62例，女性40例，平均年龄(56.38±11.26)岁。根据CHD诊断及分型标准，将CHD患者分为稳定型心绞痛(SAP)(36例)组、不稳定型心绞痛(UAP)(32例)和急性心肌梗死(AMI)(34例)，冠脉造影以冠状动脉狭窄≥50%作为诊断标准，依据冠脉造影显示累及支数，分为单支病变组31例、双支病变组37例、三支病变组34例三组。对照组为我院健康体检者52例，平均年龄(57.38±10.76)岁，男25例，女27例。对照组经体

检各项标准均正常，冠状动脉造影成像未见狭窄或斑块，排除肝胆疾病、感染、心脏疾病、风湿活动、恶性肿瘤以及急性损伤等疾患。

1.2 标本采集与保存所有研究对象均抽取早晨空腹静脉血，采集早晨空腹静脉血5ml于EDTANa2抗凝管中，30 min内3000r/min离心15min，分离血浆置于-20℃冰箱保存。

1.3 方法采用ELISA法测定HMGBl、IL-18水平，HMGBl试剂盒为美国ADL公司产品，IL-18试剂盒为Eton Bioscience产品，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.4 统计学处理应用SPSS13.0软件对数据进行分析处理。结果以x±s表示，率的比较用χ2检验，多组间比较采用方差分析，2组间比较采用非配对t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1CHD组、AMI组、UAP组、SAP组与对照组HMGBl、IL-18水平比较与对照组相比，CHD组病人HMGBl、IL-18水平均显著升高，差异有统计学意义(P＜0.01)。AMI组HMGBl、IL-18水平高于UAP组、SAP组；UAP组HMGBl、IL-18水平SAP组。见表1。

表1 不同类型CHD患者血浆HMGBl、IL-18水平

2.2 不同病变程度CHD患者血浆HMGBl、IL-18水平变化单支、双支、三支病变组组血浆HMGBl、IL-18水平依次升高，两两比较差异有统计学意义(P＜0.05)。随着冠状动脉病变支数的增加，HMGBl、IL-18水平也逐渐增高。见表2。

表2 不同病变程度CHD患者血浆HMGBl、IL-18水平

3 讨论

HMGBl、IL-18作为炎性因子，在介导炎症过程中扮演重要角色，对AS的发生发挥着重要的调节作用。而AS作为CHD的病理基础，在其形成及发展过程中与炎症关系密切，炎症因子、炎症细胞起着重要作用，故HMGBl、IL-18在CHD起着重要作用。

HMGBl是一种广泛存在于高等真核细胞中的染色体结合蛋白，位于大多数细胞的胞核和胞浆中，为基因调控蛋白。在细胞表面，HMGB1主要通过与信号转导受体结合而作用于细胞[4]，参与DNA的重组、修复。正常血管壁内存在HMGBl的表达，分布比较均匀，生理条件下，HMGBl维持在较低水平的表达。当组织细胞坏死、损伤时，HMGBl释放至血液和组织液，高浓度的HMGBl诱导内皮细胞表达分泌炎症因子，炎症因子趋化、活化单核-巨噬细胞，从而在内皮细胞损伤-炎症因子产生-HMGBl分泌中形成正反馈，加快AS的形成。因此，HMGBl在动脉粥样硬化以及促进冠脉再狭窄的血管重构的病理过程中发挥重要作用。Sorensen MV等研究显示[5]，HMGB1升高程度与急性心肌梗死不良预后有很好的相关性。本研究中CHD患者HMGBl水平明显高于对照组(P＜0.01)，在CHD组各分组比较中，HMGBl水平随着CHD病情的加重明显增加，且随着冠状动脉病变累及支数的递增，炎症范围的扩大，HMGBl也呈上升趋势，差异有统计学意义(P＜0.05)。提示HMGBl水平与AS形成和发展密切相关，在冠状动脉病变过程中起着十分重要的作用。

IL-18作为CHD的一个重要危险因子，被认为是心血管事件危险最强有力的预测因子之一，主要是由单核细胞和巨噬细胞产生多生物活性的细胞因子，可诱导急性期炎性反应的产生，促进多种免疫细胞的分化及活化，在炎症反应过程中扮演重要角色。在动脉粥样硬化过程中，IFN-γ起促进作用，而IL-18作为IFN-γ的诱导因子可诱导IFN-γ的产生，在增强局部炎症反应以及血管内皮细胞表达相关分子过程中，IL-18起到了促进作用。血管粥样硬化斑块中IL-18的表达使得中性粒细胞和单核细胞趋化、活化至炎症部位，活化的炎症细胞继而进一步大量表达IL-18，进一步加重损伤部位的炎症反应，形成一个正反馈过程。在本研究显示CHD组各分组比较中，IL-18含量为AMl组＞UAP组＞SAP组，各组间水平有显著性差异(P＜0.05)；在单支、双支及三支病变组间，IL-18水平呈逐渐增高的趋势，显示IL-18水平与CHD的冠脉病变程度显著正相关。该结果与国外研究一致[6]。这可与血浆IL-18水平升高导致不稳定斑块破裂，继而促进急性冠状动脉综合征的进一步加剧有关。

本研究表明，与对照组比较，CHD患者HMGBl、IL-18水平明显升高，提示HMGBl、IL-18都可以通过炎症反应促进AS的发生、发展，与CHD的进展程度呈正相关。HMGBl、IL-18水平变化佐证冠心病的发生和发展中炎症反应在起着重要作用，血浆HMGBl、IL-18水平检测可作为冠心病病程变化的参考指标，为冠心病的治疗开辟了一条新的途径。

[1]Li W,Zhu W,Li J,et a1.EGCG stimulates autophagy and reduces cytoplasmic HMGB1 levels in endotoxin-stimulated macrophages [J].Biochem Pharmacol,2011,81(9):1152-1163.

[2]Hulthe J,McPheat W,Samnegard A,et a1.Plasma interleukin(IL)-18 concentrations is elevated in patients with previous myocardial infarction and related to severity of coronary atherosclerosis independently of C-reactive protein and IL-6[J].Atherosclerosis, 2006,188(2):450-454.

[3]刘晓芳,黄建英,张胜利,等.冠心病患者血清脂联素水平与高敏C应蛋白和胰岛素抵抗的关系[J].国际检验医学杂志,2013,34(2): 149-150.

[4]Farmer DG,Kennedy S.RAGE,vascular tone and vascular disease[J]. Pharmacol Ther,2009,124(2):185-194.

[5]Sorensen MV,Pedersen S,Mogelvang R,et a1.Plasma high mobility group box 1 levels predict mortality after ST-segment elevation myocardial infarction[J].JACC Cardiovasc Interv,2011,4(3):281-286.

[6]Narins CR,Lin DA,Burton PB,et a1.Interleukin-18 and interleukin-18 binding protein levels before and after percutaneous coronary intervention in patients with and without recent myocardial infarction[J].Am J Cardiol,2004,94(10):1285-1287.

Changes of high mobility group protein B1 and interleukin-18 levels in plasma of patients with coronary heart disease

XU Guoxin,YANG Fengying,CHEN Yugang.Department of Clinical Laboratory,the fourth People's Hospital of Wuxi City, Jiangsu Wuxi 214062,China.

Objective To research the clinical significance of changes of high mobility group B1(HMGBl)and interleukin-18 levels in plasma of patients with coronary heart disease(CHD),and provide reference for the diagnosis and treatment of CHD. Methods One hundred and two cases of CHD were diagnosed in our hospital,and the control group were 52 healthy people.5ml morning fasting venous blood was collected in EDTA-Na2anticoagulant tube,and then centrifuged for 15 minutes with 3000 r/min, and last detected the levels of HMGBl and IL-18 by ELISA method.Results The levels of HMGBl and IL-18 in CHD group were significantly higher than control group(P＜0.01),and there was a positive correlation between HMGBl,IL-18 levels and the severity of coronary artery disease(P＜0.05).Conclusion The changes of HMGBl and IL-18 levels confirm that inflammatory reaction plays an important role in the occurrence and development of CHD.The plasma levels of HMGBl and IL-18 may be regarded as markers of CHD progression.

Coronary heart disease；High mobility group protein B1；Interleukin-18

R541.4

A

1674-1129(2013)06-0524-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.06.004

国家自然科学基金资助项目(30871193,81001319)

许国新，男，1973年1月出生，江苏大学基础医学与医学技术学院学士主管技师临床检验专业研究方向：免疫、临床生化。