新生凉山乌金猪乳前猪瘟免疫试验

李翠蓉 （西昌学院 四川 西昌 615013）

凉山乌金猪，是川贵滇接壤地区放牧型古稀原始种质，分布在州内二半山区。产区洁净的草山草坡可供常年放牧。凉山乌金猪具有体型较小，生长慢，耐寒耐粗饲，易放牧等特点，尤其以股部肌肉发达，瘦肉略呈大理石状，口感鲜嫩，香味丰满为优势，市场价格已高于普通猪肉30%以上，是凉山彝族自治州高寒山区的当家猪种。猪瘟(CSF)乃是凉山乌金猪养殖业之大敌。近年来随着免疫接种强度的不断提高，急性、典型病已减少，成年猪的发病率不高，疫情缓和，但仔猪慢性猪瘟州内的一些县和猪场时有发生，以温和型或无症状为主，病理变化由以前广泛性、弥漫性出血逐渐转变为病理变化不明显，其原因是多方面的，尤其是新生仔猪母源抗体干扰，是主要原因。在仔猪猪瘟免疫上，如何排除母源抗体对仔猪免疫干扰和选择最佳免疫日龄，近年来国内外进行了广泛的研究。现将新生凉山乌金猪乳前猪瘟免疫试验分述如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

（1）试验动物：凉山州金阳县祖代种猪场，选择8头凉山乌金猪所产仔猪。母猪均于配种前一周左右接种干燥猪瘟兔化弱毒苗(150个免疫量)。选择西宁镇一个兔场的家兔，体重1.5～2.5kg。试验前经3d体温测试，选择体温恒定的健康兔备用。（2）试剂：免疫用于燥猪瘟兔化弱毒苗、猪瘟兔化弱毒种毒均系中牧实业股份有限公司成都药械厂提供。石门系猪瘟强毒系农牧渔业部兽医药品监察所供给，取回后，经用健康仔猪复壮一代。

1.2 试验方法

1.2.1 第1阶段 2窝共16头仔猪，分4组，分别为5、5、4、2头。于出生后颈侧肌肉注射干燥猪瘟兔化弱毒苗1头份(150个免疫量)，注射后分别间隔0.5、1.5、3.5、4.5h后让仔猪吸吮初乳[1]，至60日龄断奶。断奶后按一般育肥猪条件饲养至155～271d，分别行前腔静脉采血，分离血清，用兔体中和试验法测定其血清中和抗体[2]，以判定其免疫力，见表1。

表1 第1阶段兔化弱毒苗剂量及仔猪吮乳时间

中和抗体测定采用弱毒种毒和血清的定性试验。血清与病毒混合后，于6℃静置1～1.5h，每份猪血清注射2只家兔，每只家兔耳静脉注入内含0.1ml血清，10个发热量的猪瘟兔化弱毒。兔的热型反应，按原农林部兽医生物药品制造及检验规程中“关于猪瘟兔化弱毒苗用兔效检及攻毒复检方法”进行判定。

1.2.2 第2阶段 5窝50头仔猪，于出生后颈侧肌肉注射干燥猪瘟兔化弱毒苗1头份(150个免疫量)，注射后间隔0.5h再让仔猪吸吮初乳，至60日龄断奶。试验猪经饲养117～157d后，从中随机抽取2窝计18头，分2组：①甲组：为猪瘟强毒攻击试验组，计免疫试验猪11头，对照试验猪2头，每头试验猪肌注石门系猪瘟强毒(血毒)1ml；②乙组：为同居自然感染试验组，计免疫试验猪7头，对照试验猪2头，与上述强毒攻毒猪同圈饲养。受试猪在试验期内，上下午各测温1次/d，观察至对照猪死亡后14d结束，见表2。

表2 第2阶段攻毒情况及体温测定

1.2.3 试验猪抗体消长测定 对注苗后间隔0.5h组的5头试验猪，分别在210日龄、298日龄时，行前腔静脉采血，分离血清，用兔体中和试验法测定其血清抗体滴度，以了解其免疫力的消长衰退情况。

2 结果与分析

2.1 第1阶段试验结果

新生仔猪乳前行猪瘟苗免疫后，按上述不同时间开始吸吮初乳，经饲养155d后采血行兔体中和试验，结果见表3。

表3 仔猪乳前猪瘟免疫与家兔中和试验结果的关系

0.5h组的5头猪，经饲养至271d，采血用10只家兔行中和抗体测定，仅有1头猪1只家兔获得中和，其余4头猪的8只家兔均未获中和。

2.2 第2阶段试验结果

甲组11头各组试验猪经攻毒试验和乙组7头乳前免疫后0.5h吮乳组自然感染试验。免疫试验猪，保护率100%，对照试验猪，全部发病死亡。结果见表4。

表4 猪瘟攻毒试验和自然接触感染试验结果

2.3 试验猪抗体滴度消长测定结果

为了进一步观察免疫试验猪的抗体消长情况，于2012年7月另设了0.5h组的5头试验猪，用兔体中和试验进行消长期测定，210日龄时5头试验猪均有中和抗体，至298日龄时，5头试验猪中有2头仍然保有中和抗体，1头保有部分中和抗体，另2头无中和抗体。试验结果表明，免疫试验猪至9月龄时中和抗体开始出现衰退。

2.4 试验猪剖检结果

试验结束后，宰杀所有试验猪，解剖检查，结果：除4头对照死亡猪的心房、心冠等处有大量点状出血，肾包膜下有少量点状出血，肠黏膜有轻重不同的弥漫性炎症外，其余各免疫试验猪，均未发现异常。

3 讨论与小结

新生仔猪吸吮初乳后，获得母源抗体，这对保护新生仔猪，使其免于病原微生物感染具有重要作用。但母源抗体抑制新生仔猪对同源免疫抗体的形成，影响仔猪预防接种效果[3]。在生产实践中，尤其是仔猪猪瘟的免疫，更为明显，如何排除母源抗体对仔猪猪瘟免疫的干扰，日益受到国内外兽医界的重视。1980年，在丹麦召开的第六次国际兽医猪病会议上指出：古典型猪瘟的工作方向是完善诊断方法和对新生仔猪在初乳前的免疫。近年来，很多资料说明，猪的免疫活性发生较早，甚至在胎儿发育中、后期，即有免疫应答能力，并形成抗体，故可推论，仔猪出生后，其免疫应答能力已经比较成熟。

该试验证实，仔猪出生后即注射猪瘟兔化弱毒苗，经0.5h后再令其吸吮初乳，饲养至155日行中和抗体测定，获得良好的免疫效果，但饲养至27ld的本组试验猪，再行中和抗体测定，只有极少免疫试验猪存在中和抗体。饲养117d的各组试验猪，经攻击猪瘟强毒，完全获得保护。饲养157d各组试验猪，攻击强毒后，虽有短暂体温升高和减食反应，但均能耐过。该试验组与强毒攻击组行同居感染试验，亦获得了完全保护，说明新生仔猪乳前注射猪瘟兔化弱毒苗，可以产生良好的免疫效果[4]。

试验组中1.5、3.5、4.5h的试验猪，其免疫效果不及0.5h组，是否因为同窝新生仔猪中先后吸吮初乳时间有关或是0.5h组的试验猪，首先吸吮的初乳中含有大量的各种免疫球蛋白。据报道：IgM至少有一定浓度时并不抑制合成淋巴细胞的刺激物，相反的能对增进原始免疫应答起作用。同时Henry及Dennert也认为IgM有促进免疫应答的作用，或与饥饿影响免疫有关。关于免疫与吸吮初乳时间关系的理论探讨，有待进一步试验证实。

新生凉山乌金猪乳前猪瘟免疫法，具有现实生产实用价值，尤其适用于大型集体养猪场，不仅可以避免因母源抗体的影响而造成免疫后几周乃至几个月的无效期的缺点，同时也可以节省人力和物力。因此，新生仔猪乳前猪瘟疫苗接种是一个新的免疫途径，对预防和控制猪瘟具有重大意义。

[1] 宁宜宝. 猪瘟病毒持续感染与猪瘟预防控制[J]. 中国兽药杂志. 2005(5): 31-35.

[2] 唐传林. 猪瘟免疫后仍有发病的主要原因及防制方法[J]. 养猪大视野. 2005(4): 19-20.

[3] 魏丽萍. 引起猪免疫抑制的常见因素与预防措施[J]. 吉林畜牧兽医. 2006(6): 154-156

[4] 黄艳艳等. 猪瘟超前免疫法及其在国内的应用进展[J]. 黑龙江畜牧兽医. 2004(1): 64-65.