不同炮制方法对肉豆蔻中肉豆蔻醚的影响

李迪，吴宏娟，许贵军

(黑龙江中医药大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150001)

在《药性论》、《中药大辞典》、《中华药海》等书中均有肉豆蔻的记载，具有收涩、温里、行气等功效。现代药理研究表明，肉豆蔻具有抗菌、麻醉、抗肿瘤、镇静催眠等作用。目前，肉豆蔻主要炮制方法有蒸制、炒制、土制、制霜等。本实验对不同炮制方法的肉豆蔻中的肉豆蔻醚的含量进行了考察。

1 仪器与试药

P230高效液相色谱仪(大连依利特分析仪器有限公司);R400E－HPLC流动相过滤装置(上海领德仪器有限公司);HH－4数显恒温水浴锅(常州普天仪器制造有限公司);SK3300HP功率可调台式超声仪(上海垒固仪器有限公司);R502B旋转蒸发器(西安太康生物科技集团);Direct－Pure EDI 10 UV纯水系统(上海瑞枫生物科技有限公司);UV－1600紫外/可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司);JA5003B电子精密天平仪(河南兄弟仪器设备有限公司);C18色谱柱(广州艾欣科学仪器有限公司);肉豆蔻醚(自制);乙腈(天津康科德有限公司);甲醇(天津赛孚世纪科技发展有限公司);磷酸(天津康科德有限公司);乙醇(国药集团化学试剂有限公司);冰醋酸(天津科密欧有限公司);三乙胺(天津博迪化工股份有限公司);肉豆蔻(产于广东)。

2 测定方法

2.1 色谱条件

实验用甲醇－水－磷酸(70∶30∶0.01)为流动相;检测波长为282nm;流速为1.0ml/min;实验室温度为25℃，柱温箱温度为30℃。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取肉豆蔻醚标准品5mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇适量，超声溶解，冷却至室温，加甲醇定容，精密量取1ml，至于100ml容量瓶内，用甲醇定容，即得。

2.3 提取方法

肉豆蔻粉碎，过20目，称取3份，分别加入乙醇、50%甲醇、甲醇超声提取，结果以甲醇提取含量最高，所以实验采用甲醇提取。精密称取3份肉豆蔻粗粉，加甲醇超声波振荡，分别提取15、20、30min，结果以30min含量最高，所以采用提取时间为30min［1］。

2.4 供试品溶液的制备

精密称取肉豆蔻粗粉约 1.0g，精密加入甲醇800mL，超声处理 30min，过滤，加甲醇至 1 000ml，摇匀，即得。

2.5 精密度试验

精密称取肉豆蔻醚标准品5mg，加甲醇适量，超声溶解，放至室温，加甲醇定容至100ml，精密量取1ml，至于100ml容量瓶内，甲醇定容。按照上述实验条件，连续进样6次，每次10μl，记录峰面积。实验结果表明，本方法精密度良好。

2.6 对照品的线性考察

分别配制 0.4、1.6、2.0、4.0、6.0μg/mL 肉豆蔻醚标准品溶液，以峰面积(Y)为纵坐标，对照品进样量(X)为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，肉豆蔻醚在0.4～6.0μg/mL范围内呈良好的线性关系。

2.7 回收率试验

分别配制6份肉豆蔻样品溶液，进行含量测定，再分别加入一定量的肉豆蔻醚对照品，按上述实验方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.05%，RSD为 0.67%。

2.8 样品稳定性试验

按上述实验方法配制肉豆蔻样品溶液及对照品溶液，每隔2h测定1次，共测定5次。实验结果表明，供试品和对照品10h内稳定。

3 炮制品的制备

3.1 面裹炒制

分别称取肉豆蔻 1kg，滑石粉 0.5kg，面粉 0.5kg。将面粉中加入0.025kg水，和成湿面团，制成湿面皮。将药材用湿面皮逐个包裹，取滑石粉置锅内加热，将包好的肉豆蔻倒入，拌炒至外面的面呈焦黄色取出，除去面皮，乘热切片。

3.2 小麦面炒制

分别称取肉豆蔻1kg，小麦面0.5kg。将小麦面粉倒入锅内，用文火炒热，将肉豆蔻倒入，炒成微黄色时，出锅，筛去面粉，摊开，晾凉。

3.3 赤石烘烤 分别称取肉豆蔻1kg，赤石脂1kg。药材直接埋于赤石脂细粉烘烤1h，去除赤石脂，将肉豆蔻切片。

3.4 蒸制

分别称取肉豆蔻1kg，麸皮0.5kg。将肉豆蔻在水中浸泡1h，捞出，置笼内，一层麸皮，一层肉豆蔻，层层相间，蒸制2h，去除麸皮，将肉豆蔻切厚片，干燥。

3.5 土制

分别称取肉豆蔻1kg，细黄土1kg，将细黄土置锅内炒制发泡，倒入肉豆蔻，不断翻炒，炒至油质渗出，筛净黄土，备用［2－6］。

4 结果

测定5种炮制品和生品的含量，按炮制前药材量计算，蒸制品、面裹炒制品、小麦面炒制品、赤石烘烤品、土制品中肉豆蔻醚的含量分别为0.211%，0.210%，0.205%，0.203%，0.201%。未经炮制的肉豆蔻药材中肉豆蔻醚的含量为0.215%。

5 讨论

实验对流动相进行了考察，分别采用了甲醇－水－ 磷酸(70∶30∶0.01)、甲醇 － 水 － 冰醋酸(70∶30∶0.01)、水 －乙腈 －三乙胺(40∶60∶0.01)，结果以甲醇－水 － 磷酸(70∶30∶0.01)为流动相，供试品各峰分离效果最好。肉豆蔻醚为肉豆蔻主要成分之一，其具有一定毒性，服用过量对胃肠道有抑制作用，甚至可致中毒，产生昏迷及惊厥。在中药大辞典中记载过肉豆蔻中毒致死的报道［7］。实验结果表明，各种炮制方法对肉豆蔻醚的含量影响不大。在炮制过程中肉豆蔻醚不易除去的主要原因是肉豆蔻醚沸点较高(276℃ ～277℃)［8－9］。所以应增加对肉豆蔻炮制的研究，降低其毒副作用。

［1］李国毅，陈仰荣.《中国药典》中药炮制品检验问题的探讨［J］.中国中药杂志，2000，25(6):379.

［2］龚千锋.中药炮制学［M］.北京:中国中医药出版社，2007:215－225.

［3］冯秀锟.中药炮制技术［M］.北京:中国中医药出版社，2007:89－95.

［4］周燕华，谭建宁.不同炮制条件对肉豆蔻挥发油、脂肪油及肉豆蔻醚含量的影响［J］.中国中药杂志，1998，23(4):217.

［5］崔学义，季宇彬.肉豆蔻炮制工艺研究［J］.中国中药杂志，1992，17(10):599.

［6］天津市药品检验所中药组.关于肉豆蔻炮制方面有关问题的探讨［J］.中草药通讯，1979，10(1):16.

［7］江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海:上海科学技术出版社，1977:894.

［8］李铁林，周杰，江文君，等.炮制对肉豆蔻挥发油成分及肉豆蔻醚含量影响的研究［J］.中国中药杂志，1990，15(8):23.

［9］李铁林，周杰，徐植灵，等.炮制对肉豆蔻挥发油含量的影响及肉豆蔻挥发油化学成分的研究［J］.中国中药杂志，1990，15(7):21.