吴茱萸质量控制与品质评价方法研究进展△

魏娟，曾金祥，张寿文，朱继孝，朱玉野，王晓云，吴波

(江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心，江西 南昌 330004)

吴茱萸质量控制与品质评价方法研究进展△

魏娟，曾金祥，张寿文*，朱继孝，朱玉野，王晓云，吴波

(江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心，江西 南昌 330004)

对近年来吴茱萸质量控制与品质评价方法研究现状进行综述，为今后吴茱萸药材的进一步研究与应用提供参考。

吴茱萸；质量控制；品质评价

吴茱萸(Euodiae Fructus)为常用中药，为芸香科(Rutaceae)植物吴茱萸 Euodia rutaecarpa.(Juss.)Benth.、石虎 Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.oficinalis(Dode)Huang或疏毛吴茱萸 Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang的干燥近成熟果实，具有散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻功能[1]。大量吴茱萸被用来制备肠康片、左金丸、戊己丸、吴茱萸汤和鸡鸣散等药物。目前国内市场对吴茱萸的需求量大，而全国合格品少，大量品质低劣产品在市场上流通。因此，近年来吴茱萸的质量控制与品质评价方法一直是研究热点。

目前吴茱萸质量控制与品质评价的方法主要有3类：一类是反映吴茱萸精确活性成分信息的含量测定方法，另一类是反映吴茱萸化学成分整体模糊信息的指纹图谱方法，第三类是含量测定与指纹图谱结合方法。本文现对这些方法进行综述，以期为吴茱萸的进一步研究与应用提供参考。

1 质量评价与含量测定方法研究进展

已报道的测定吴茱萸中活性成分含量的方法有薄层扫描法[2]、高效毛细管电泳法[3]、高效液相色谱法[4]、电喷雾解吸电离质谱[5]、在线超临界流体萃取-气相色谱联用[6]、微乳液相色谱法[7]、离子对色谱法[8]等。

薄层扫描法分离度较好，结果准确稳定、简便、快捷，是分析吴茱萸及其制剂质量的简便有效的手段之一，但存在分离效率低、精密度低，检测峰容量有限的缺点。

朱坤福[2]采用薄层扫描法测定吴茱萸颗粒剂中吴茱萸次碱的含量。该方法简便，分离度较好，结果准确稳定，可作为吴茱萸颗粒剂的质量控制方法。刘蕴秀等[9]用薄层荧光扫描法同时测定吴茱萸药材及其制剂中羟基吴茱萸碱、N-甲酰二氢吴茱萸次碱、吴茱萸酰胺甲、吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量。该方法无须进行复杂的预处理，方法简便、灵敏度高、样品用量少，可为寻找和利用植物资源，控制生药及方剂质量提供科学依据。

陈盛余等[10]采用毛细管电泳安培法检测吴茱萸次碱的含量。吴茱萸次碱5min内被分离出来，浓度在1.74×10-8～3.48×10-6mol·L-1与峰面积具有良好的线性关系，回收率为94％～106％。李琴韵等[11]采用HP3D全自动毛细管电泳仪在254nm波长测定吴茱萸中吴茱萸碱的含量。吴茱萸碱在1.94～7.78μg呈良好的线性关系，平均回收率为101.3％(n＝3)。该方法简单、快捷、灵敏，成功应用于吴茱萸中吴茱萸碱的含量测定，结果令人满意。

蒋俊等[4]建立了HPLC-DAD(高效液相色谱-光电二极管阵列检测器)法同时测定萸黄连的炮制辅料吴茱萸汁中生物碱、苦味素、有机酸类等3类组分的4个代表性成分：吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸内酯、绿原酸，以期此方法能为萸黄连炮制辅料吴茱萸汁的质量控制和质量标准的制定提供重要依据。

曾金祥等[12]采用高效液相色谱及紫外检测法建立同时测定吴茱萸药材中辛弗林、绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱7种活性成分含量的方法。该方法简单、快速、准确、可靠，适用于同时测定吴茱萸药材中辛弗林、绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量，为吴茱萸药材的质量评价提供了更好的途径和技术手段。

罗习珍等[8]建立一种能同时测定吴茱萸中辛弗林、吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的离子对色谱方法，辛弗林、吴茱萸碱和吴茱萸次碱都获得了良好的分离效果，该法适用于吴茱萸药材中辛弗林、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的同时分析。该方法稳定性高，重现性好，操作简单，分析速度快，是吴茱萸质量监控较理想的方法。

吴茱萸挥发油具有丰富的化学成分，娄方明等[11]用固相微萃取-气相色谱-质谱联用对吴茱萸挥发油成分进行分析，能全面快速地获得其组成信息，可应用于吴茱萸挥发油成分的快速分析，为进一步合理开发中药吴茱萸提供了科学依据。

杨敏等[6]等首次采用超临界流体色谱法测定吴茱萸中吴茱萸次碱和吴茱萸碱的含量，可在简单的流动相条件下对吴茱萸中的吴茱萸次碱和吴茱萸碱进行良好分离。该方法简便快速、经济环保，且具有较好的重复性和线性关系。

任晶波等[7]首次将微乳液相色谱法应用于吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、辛弗林3种有效成分的分离测定，通过对表面活性剂种类及浓度、流动相酸度、添加剂等因素的考察，获得了最佳微乳体系和色谱，在等度洗脱条件下，使该3种主要成分得到有效的分离，从而建立了一种全新、准确、可靠、稳定的快速检测吴茱萸中3种有效成分的方法。

陈焕文等[5]等利用电喷雾解吸电离质谱(DESIMS)，在优化的实验条件下快速获得了吴茱萸的DESI-MS指纹谱图，然后利用串联质谱对其中有重要活性的5种生物碱即吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸酰胺、羟基吴茱萸碱、吴茱萸酰胺甲进行了结构鉴定。实验表明，基于固体表面解吸电离质谱分析的方法不需要萃取-分离手续，单个样品测定时间不超过1.5min，大幅度提高了分析速度，有望在药品品质的在线监测和工艺过程控制中发挥重要作用。

赵金明等[14]以吴茱萸内酯、吴茱萸碱及吴茱萸次碱3种成分为指标，采用HPLC法分别测定采用不同方法炮制的吴茱萸中3种成分的含量，结果表明吴茱萸碱含量最高的是酒制品，最低为醋制品；吴茱萸次碱含量最高的是盐制品，最低为甘草制品；吴茱萸内酯的含量依次按生品、姜制、醋制、甘草制、酒制、盐制下降；温慧玲等[15]对吴茱萸不同炮制品中绿原酸的含量进行比较，结果表明：生品中绿原酸含量最高，其次是酒制、醋制、樟帮泡吴茱萸(开水泡制)、盐制、制吴茱萸、樟帮泡吴茱萸(甘草水泡制)。可以看出吴茱萸经过炮制后，绿原酸含量显著降低，而采用不同的炮制方法，吴茱萸中绿原酸含量的降低的程度也不一样。大致呈现出浸泡工艺所得的炮制品比浸润工艺所得的炮制品中绿原酸含量降低更多。而炮制中所加的辅料对于吴茱萸药材中绿原酸的含量也似有影响。樟帮泡吴茱萸(甘草水泡制)在浸泡工艺所得的炮制品中绿原酸含量最低，制吴茱萸在浸润工艺下所得的炮制品中含量最低。这种方法全面地评价吴茱萸生品及不同炮制品中生物碱类成分及柠檬苦素类成分的变化，为临床用药提供更科学全面的依据。

曹亮[16]对吴茱萸品质进行分析，以吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸内酯3个比较确定的有效成分为指标，从吴茱萸药材品种来源、采摘时间、年份、产地来源多角度分析吴茱萸药材品质，发现吴茱萸主要成分含量受以上4个因素影响明显。这为吴茱萸药材的药效形成提供参考，为吴茱萸的生产提供指导，也为其他果实类中药材的研究提供思路。

2 吴茱萸指纹图谱方法建立研究

中药为多成分的复杂体系，其化学成分众多，测定少数几种有效成分或指标成分，不足以保证药材或制剂的质量。中药指纹图谱具有整体性、特征性及可量化等特点，可用于鉴别中药真伪、评价药材的道地性以及产品的一致性与稳定性，是一种有效的质量控制方法。

李战等[17]对吴茱萸高效液相色谱的指纹图谱进行研究；周欣等[28]建立吴茱萸药材的反高效液相色谱(RP-HPLC)指纹图谱分析方法。实验研究结果表明，在药材产地、采收、干燥方法等相对固定的前提条件下，利用HPLC色谱指纹图谱来控制吴茱萸的质量优劣是切实可行的，它比现行质量标准要更全面、客观，该法为吴茱萸的质量控制提供了更全面的信息，并为吴茱萸的指纹图谱研究奠定了基础。洪玉梅等[19]建立吴茱萸饮片的RP-HPLC指纹图谱研究方法，该方法可较全面地反映吴茱萸饮片的内在质量，可用于吴茱萸饮片的质量控制。

甄攀等[20]首次建立了中药吴茱萸中水溶性成分的HPLC指纹图谱，为吴茱萸药材的真伪鉴别和质量监控提供依据。张敏等[21]对吴茱萸生物碱类成分的指纹图谱进行研究，该实验首次建立了中药吴莱萸中生物碱成分的HPLC指纹图谱，为不同产地和采收期的吴茱萸药材鉴别提供了科学依据。

张丽艳等[22]建立了吴茱萸药材薄层色谱指纹图谱，该方法简单易于操作，便于推广应用，可用于采购及生产中的快速检验，为评价吴茱萸药材品质优劣和GAP规范化种植、种植标准操作规程的制定以及质量监控提供科学依据。

卢永飞等[23]建立不同产地吴茱萸有效成分指纹图谱研究，将吴茱萸的供试品和对照品用高效液相色谱法进行分析，将色谱数据输入分析软件进行相似性检测，为吴茱萸内在质量的评价提供参考并且为吴茱萸产品产地鉴定提供一些帮助。

莫善列等[24]利用核磁共振氢谱(1H-NMR)指纹图谱对吴茱萸的特征性化学成分进行分析，该方法可对吴茱萸进行快速、准确的鉴别，为中药吴茱萸的质量控制和品质评价提供依据。

3 指纹图谱与含量测定研究

上述的这些研究并没有将能反映吴茱萸药材化学成分整体模糊信息的指纹图谱技术与精确活性成分信息的含量测定技术结合起来，因而不能全面科学合理地控制与评价吴茱萸药材的品质。

吴燕等[27]建立不同产地和品种吴茱萸药材的高效液相色谱指纹图谱，并同时测定吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素3种主要成分的含量。该方法准确可靠，重复性好，指纹图谱结合含量测定可以更好地用于吴茱萸药材的真伪鉴别及品质评价，为吴茱萸药材的质量控制提供更有效的方法。

曾金祥等[20]研究了吴茱萸中药材的指纹图谱，该研究首次建立了吴茱萸药材的指纹图谱并同时用HPLC法测定了吴茱萸药材中的绿原酸、金丝桃苷和吴茱萸碱含量，为不同产地、不同采收期吴茱萸药材的质量评价提供了更好的技术手段。这种将指纹图谱技术与含量测定技术相结合的方法，为吴茱萸药材的质量控制与品质评价提供一种新的方法，为吴茱萸GAP建设提供科技支撑。

4 讨论

近年来，吴茱萸质量控制与品质评价方法研究获得了很大的发展。这些方法以吴茱萸活性成分的含量测定居多，从中药整体模糊信息上进行吴茱萸质量控制与品质评价的指纹图谱技术也开始广泛应用。但是目前将指纹图谱与含量测定结合起来全面控制与评价吴茱萸药材的品质的研究依然很少，随着现代科学技术与方法的发展，吴茱萸的质量控制与品质评价方法必然会得到进一步的提高与完善。

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The Progress of Quality Control and Evaluation M ethods of Euodiae Fructus

WEIJuan，ZENG Jin-xiang，ZHANG Shou-wen，ZHU Ji-xiao，ZHU Yu-ye，WANG Xiao-yun，WU Bo
(Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine，Chinese Medicine Germplasm Resource Engineering Technology Research Center of Jiangxi Province，Nanchang 330004，China)

This paper reviewed the quality control and evaluationmethods of quality for Euodiae Fructus.This paper can provide reference for further research and application.

Euodiae Fructus；Quality control；Evaluation methods of quality

2012-06-17)

国家“十二五”科技支撑计划项目(2011BAI04B04)

*[通讯作者]张寿文，E-mail：wtzsw＠163.com