软葛Ⅰ号对急性小鼠酒精中毒损伤的保护研究*
2013-01-10宫汝淳门丽红何晓燕苗婷婷
宫汝淳,门丽红,何晓燕,宫 宇,苗婷婷
(通化师范学院 生物科学学院,吉林 通化 134002)
酒在祖国医学中极受重视,中医学很早就发现酒能通血脉,把酒作为方剂中常用之品.酒能结朋好友,增加节日气氛,但过量饮酒对身体会有伤害.血液中酒精的浓度达到0.4%以上时,会造成血液里乙醇含量超过人的承受能力,毒性物质会破坏肝脏,伤害身体则为醉酒即酒精中毒[1-3].软葛Ⅰ号在缓解酒精中毒方面具有很好的疗效,不但起到解酒作用,意在保护肝脏,合理利用野生资源[4-5].软葛Ⅰ号是解酒之佳品.
1 实验材料与实验仪器
药品:软葛Ⅰ号(生理实验室自制);解酒灵口服液,湖北午时药业股份有限公司:标准代号Q/HWSO11卫食证(2007)第0174号.动物:昆明种小鼠,雌雄各半,长春高新医学动物实验研究中心提供,生产许可证号SCXK(吉)2008-0005,使用许可证号SCXK(吉)2008-0005.试剂:乙醇脱氢酶生化级(上海科兴);氧化型辅酶I(上海亿欣).仪器:T6分光光度计(北京普析通用);800型离心沉淀器(上海手术器械厂).
2 实验方法
2.1 动物模型的建立
小鼠饲养在洁净无尘的环境中,温度18~20℃,相对湿度55%,光照12h,人工喂养,饲料由长春高新医学动物实验研究中心提供.将小鼠随机分为四组,即对照组、模型组、治疗组和阳性药物组,每组10只.模型组每天正常进食三次ip50%酒精,每次0.34ml/20g;治疗组ip50%酒精前30min实施ip软葛Ⅰ号3ml/20g,每天3次;阳性药物组正常进食ip50%酒精前实施解酒灵3ml/20g,每天3次;对照组ip等量生理盐水.
2.2 实验观察
(1)酒精入血对胃黏膜的影响.药物入血15d后,每组取2只,颈椎脱臼处死,打开腹腔,观察胃体变化,并取胃沿胃大弯剪开,测量胃黏膜损伤程度(溃疡面/胃面积%).
(2)酒精入血对肝脏的影响.药物入血20d后,每组取2只,颈椎脱臼处死,打开腹腔,取肝脏,用生理盐水冲洗,滤纸吸干后,称重,观察颜色、硬度,制成石蜡切片,经HE染色后置显微镜下观察.
(3)酒精对小鼠毒理实验.60只小鼠随机分为3组,生理盐水组、阳性药物组、治疗组,每组20只.禁食12h,每组每只实施等量2.4ml的50%酒精灌胃,在酒精灌胃前5min三组小鼠分别给等量2.4ml/只生理盐水、解酒灵、软葛Ⅰ号,观察存活率、抗醉酒时间及耐受力.
3 结果
3.1 组织结构观察
(1)酒精对胃黏膜的影响.酒精灌胃15d后,不同程度的损伤了胃黏膜.模型组损伤最大,胃2/3产生气囊,胃壁薄,灼伤面积大;治疗组胃黏膜也有损伤,但相对损伤度小,优于阳性药物和对照组,溃疡面积(见图1a~d).
a.对照组小鼠胃粘膜形态;b.模型组小鼠胃粘膜形态;c.治疗组小鼠胃粘膜形态;d.阳性药物组小鼠胃粘膜
图1溃疡面积统计
(2)酒精对肝脏影响.酒精灌胃20d后,每组随机取出2只,颈椎脱臼处死,打开腹腔取出肝脏称重,正常组肝脏色鲜红,重34.7g,模型组色暗褐色、硬度大,肝平均重量超过正常组1.4g,经HE染色制成石蜡切片与对照组比较显示,模型组肝细胞胞质致密,未见整齐的肝血窦,肝板排列紊乱,出现细胞融合体现象(见图2 b);而阳性药物组肝脏被摸与肝实质也有不同程度粘连,肝板、肝细胞索界限模糊(见图2 c).治疗组肝脏颜色无明显变化,呈深红褐色,质地柔软,与正常组无明显差别,肝边缘略见失水,被摸与肝实质有不同程度粘连,但易剥开,均重超过正常组0.24g,HE染色肝细胞索清晰,排列整齐,肝板呈放射状,肝小叶界限清晰,肝血窦清晰,小管清晰,中央静脉明显(见图2 d).
图2 酒精对肝脏影响不同光镜下的对比
3.2 毒性实验
通过对小鼠抗醉酒时间和醒酒时间的测定显示了治疗组抗醉酒时间为8.6min,优于阳性药组.酒精灌胃后,小鼠出现不同程度的醉酒反应,生理盐水组立即四脚朝天,翻正反射消失,毛松散,眼球泛白;阳性药组约5.6min出现上述现象;治疗组酒精灌胃后表现兴奋,在小鼠笼子里绕圈跑,约8.6min出现毛松散,四脚朝天现象,但很快就有缓解,醉酒时间短.醉酒时间(即翻正反射消失为醉酒;至恢复为醒酒)所需时间,结果见表1.
表1 醉酒现象实验(n=5)
表2 酒精灌胃小鼠存活率(n=20)
4 讨论
通过对小鼠酒精灌胃实验,小鼠服用软葛Ⅰ号,抗醉酒时间长,乙醇降解速度快,降解乙醛作用显著,保护肝脏.酒精在人体中的代谢途径有三个:肝脏解毒、肠道蠕动,排尿.软葛Ⅰ号解酒护肝作用较强,能有效的从这三个环节入手,提高人体肝脏解酒酶的活性并加快酒精的分解转化,加强碳酸氢盐屏障作用,从而减轻了酒精对胃的刺激;[6]通过对毒理实验观察,服用软葛Ⅰ号液的小鼠存活率高,抗醉酒能力强,醒酒时间快.软葛Ⅰ号用在护肝养胃解酒效果尤佳,是较理想的保健饮品,开发和研制解酒护肝养胃安神保健品具有重要意义和广阔的市场前景.
参考文献:
[1]邓源,袁伯俊,胡晋红,等.解酒灵的药理实验研究[J].中草药,2000,31(6):446-448.
[2]嵇扬,陆红,杨平.枳木具子酒与枳木具子水提取液解酒毒作用比较研究[J].时珍国医国药,2001,12(6):481-483.
[3]赖凌燕.丹参对实验性酒精肝损伤保护作用的初步研究[J].广西医科大学学报,1999,16(4):480-481.
[4]刘慧涛,张冰冰,吕耀双.东北地区野生猕猴桃资源现状及开发利用[J].河北林果研究,1999(4):327-330.
[5]黄玉红,王轶淳,王炳元,等.酒精性肝病血清乙醇脱氢酶活性的变化[J].中华肝脏病杂志,2002,10(1):24.
[6]宫汝淳,顾地周.软枣猕猴桃对家兔小肠平滑肌的影响[J].安徽农业科技,2011(4):417-418.