不同产地红景天中红景天苷提取工艺研究*

何宝佳，魏 蔚

(皖南医学院 药学院，安徽 芜湖 241002)

红景天系蔷薇目景天科红景天属(RadixetRhodiolaeCrenulatae)多年生草本或亚灌木植物，茎叶嫩绿，花、根、茎之浸液均呈红色而得名．长期以来，民间用其根茎熬水、泡酒可消除疲劳，抵御严寒，尤以高原藏族人民应用地域较广、时间较长；《本草纲目》草部第20卷中注明红景天为“草本上品”，主要功效是扶正固本、补气养血、清热润肺．现代药理学研究也证明红景天属植物具有抗辐射、预防高原反应、抗缺氧、抗衰老、抗肿瘤、提高记忆力等作用,近年来国内将红景天作为强身健体的药物逐步进行深入研究和开发，已有了多种制剂、保健品及饮料，另外对心血管系统还有一定影响．药理学研究也表明它们所含的红景天苷、红景天素、酪醇、二苯甲基六氢比啶、草质素、岩石菜素等为其有效活性成分，而红景天苷为其主要活性成分．本实验对不同产地红景天的提取溶剂进行研究比较，通过对红景天苷的提取率比较，以筛选出最优的提取溶剂，为红景天药材质量标准的建立及提取工艺的研究提供一定的理论依据和实验依据．

1 材料与设备

1.1 材料

西藏大花红景天、青海大花红景天、西藏圣地红景天、四川大花红景天、临江高山红景天，以上均由吉林农业大学教授鉴定为景天科红景天属植物红景天．

1.2 仪器设备与试剂

ALLTECH高效液相色谱仪，色谱柱：ODS-C18(4.6mm×250mm5um)，KQ-250DB型数控超声波清洗器；乙腈、甲醇均为色谱醇，水(杭州产娃哈哈纯净水1.25L装)经微孔滤膜滤过，红景天苷对照品购自中国药品生物制品检定所．

1.3 色谱条件

流动相:甲醇:水(12:58)；检测波长:278nm;流速:0.70ml/min;柱温:25℃;理论板数按红景天苷峰计算,应不低于2000．

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

精密称取红景天苷对照品12.5mg于25ml容量瓶中，加甲醇超声溶解，待冷至室温后，定容至刻度，摇匀，即得红景天苷对照品溶液(0.5mg.ml-1)．

2.2 样品的处理

(1)水提.精密称取粉碎药材各0.5g，分别置50ml三角瓶中，分别加蒸馏水40、30、30ml，60℃下，超声提取30min，合并提取液于100ml容量瓶中，放置室温，蒸馏水定容至刻度，备用．

(2)醇提.精密称取粉碎药材各0.5g，分别置50ml三角瓶中，分别加30%、60%、90%乙醇40、30、30ml，30℃下，超声提取30min，合并提取液于100ml容量瓶中，放置室温，30%乙醇定容至刻度，备用．

(3)甲醇提取.精密称取粉碎药材各0.5g，分别置50ml三角瓶中，分别加甲醇30、20ml，30℃下，超声提取30min，合并提取液于50ml容量瓶中，放置室温，甲醇定容至刻度，备用．

2.3 样品溶液的制备

水提：将已制备的水提样品溶液转移至已恒重的蒸发皿中，待蒸干样品后，将其转移至10ml容量瓶中，加少量甲醇超声溶解，放置室温，加甲醇定容至刻度备用．醇提：制备方法同水提．甲醇提：制备方法同水提．

2.4 方法学考察

(1)线性关系的考察.分别精密吸取对照品溶液0.2、0.4、1.0、2.0、4.0、5.0、10.0ml，于10ml容量瓶中，并加甲醇定容至刻度，摇匀，备用．按照已经确定的色谱条件，分别进样5μl，每样重复进样3次，取峰面积的平均值；以峰面积为纵坐标，红景天苷进样量为横坐标，得方程为Y=2.192×106X+140359，相关系数R=0.9998，该条件下峰面积和红景天苷量的线性关系良好，线性范围为0.1～5μg．

(2)精密度试验.精密吸取红景天苷对照品溶液(0.5mg.ml-1)5μl，重复进样5次，测定红景天苷峰面积，得其RSD=1.37%．

(3)稳定性试验.精密吸取红景天苷对照品溶5μl，每隔2h测定1次，结果表明样品在8h内稳定，样品红景天苷峰面积的RSD=1.23%(n=5)．

(4)重现性试验.取四川大花红景天样品，按2.2中的(2)制样方法制样5份，依次进样测定红景天苷的含量，结果红景天苷的RSD=1.33%(n=5)．

(5)回收率实验.采取加样回收法．取已知红景天苷含量的四川大花红景天粉末5份，每份约0.5g，精密称定，分别加入红景天苷对照品0.25mg，制备供试品溶液，计算回收率，测得红景天苷平均回收率为97.19%，RSD=1.17%(n=5)．

2.5 含量测定与结果

图1 红景天苷标准品图

图2 红景天样品谱图

在上述色谱条件下，分别进样测定红景天药材中红景天苷的含量，进样量5μl．不同产地红景天苷含量(见表1).

表1 不同提取溶剂提取红景天苷的含量比较

2.6 结论

本试验对不同产地红景天药材样品进行分离，结果表明由于不同产地的红景天药材样品成分不尽相同，因此不能对各个产地的样品均达到良好的分离效果，而且出峰时间均较早，因此缺少一定的准确度和精密度；但该流动相对各个产地的样品均能达到良好的分离效果，且峰形良好，也弥补了乙腈/水作为流动相使红景天苷出峰过早的缺点．故本实验选择甲醇/水(18:52)作为最佳比例的流动相，同时发现临江地区红景天样品与其他产地样品比较成分更为复杂，且红景天苷的含量相对也要低一些，因此，从药用价值角度考虑，推荐使用四川、西藏、青海等地的红景天药材．另外，不同产地红景天其红景天苷提取率随溶剂极性的减小而升高，并在60%乙醇提取下达到最高，而后呈下降趋势，这说明60%乙醇能够比较完全的提取红景天苷，而与一些文献报道的水提红景天苷提取率最高并不一致；且黄明立等选用不同比例的甲醇-水作为提取溶剂对红景天苷进行提取，发现甲醇-水(2:8)提取效果为最佳．

参考文献：

[1]龚晨睿,李字红,马良.红景天复合制剂抗疲劳作用研究[J].卫生研究,2002,31(5):397．

[2]向进乐.红景天有效成分的提取与分离工艺研究[D].重庆:西南农业大学,2005.

[3]崔艳梅,娄安如,赵长琦.红景天属植物化学成分及药理作用研究进展[J].北京师范大学学报,2004,44(3):17.

[4]包文芳,吴维春,李葆华.抗疲劳药用植物红景天[M].北京:人民军医出版社,2005.