培养条件对锦带花粉离体萌发的影响*

刘雪莲，秦佳梅，张 岩，梁 宇，徐贵福

(通化师范学院 生命科学学院，吉林 通化 134002)

锦带(Diervillasessilifolia.)为忍冬科落叶直立灌木，花期4～6月，锦带花枝叶茂密，花色艳丽，花期长可达两个多月[1-2]，适宜庭院墙隅、湖畔群植．也可在树丛林缘作花篱、丛植配植．点缀于假山、坡地．锦带属阳性树种，喜光、耐寒、耐旱、怕水涝，对土壤要求不严，是一种很好的园林绿化装饰树种[3].目前关于锦带花粉活力[4]、培养基组分对花粉离体萌发的影响[5]有相关报道，但就培养条件对锦带花粉离体萌发的研究尚未见报道，本试验以锦带新鲜花粉为研究材料,采用单因素实验方法研究培养基pH值、培养温度和时间对花粉萌发的影响,其结果可为锦带花粉的生殖生物学研究、植物的品种改良与育种操作、种质库保存提供基础资料．

1 材料与方法

1.1 实验材料

选用通化师范学院校园内8:00～10:00采集的锦带花花粉进行萌发实验.选择当天开放完整的，花粉多的花朵，最好在晴天采集．

1.2 培养基

实验采用固体培养基，培养基的成分为: 20%蔗糖+0.02%硼酸+0.005%钙离子+5g/L琼脂．

1.3 实验方法

(1)花粉的培养方法.配制好的培养基滴在干净载玻片上，待培养基冷却后，再将当天采集花朵的花粉用毛笔均匀的洒落在载玻片的培养基表面，每个载玻片大约2～3朵花，然后将载玻片放在衬有湿润滤纸的培养皿中，以保证空气湿度利于花粉的萌发和防止培养基快速蒸发，在培养箱内培养.

(2)实验处理.采用单一因素实验方法，在研究某一因素时其他因子均取假设的最适值.实验处理如下：培养基pH:5.5、6.0、6.5、7.0、7.5五个梯度.培养温度:15℃、20℃、25℃、30℃四个梯度.培养时间:1h、2h、3h、4h、6h五个梯度.

(3)花粉的萌发与检测.经过培养后，在显微镜下观测花粉萌发的情况，每处理3次重复，统计花粉萌发率，用测微尺测量花粉管的长度，以10个花粉的花粉管长度平均值作为花粉管的长度，花粉管长度超过花粉粒直径作为萌发标准，计算萌发率(同一视野中花粉萌发数占花粉总数的百分比)和花粉管长度，每个视野花粉粒总数约在100粒左右.

(4)数据分析.利用DPS统计软件和EXCEL软件对所得实验数据进行统计分析.

2 结果分析

2.1 培养基pH值对花粉萌发和花粉管生长的影响

测定pH值对其影响时，在不同pH值的培养基上，花粉萌发和花粉管生长有显著差异. 由表1可见，花粉萌发率和花粉管长度的变化趋势一致，在pH值为5.5的培养基上萌发率为0,pH值为6.0时的萌发率达到最大为89.333%，花粉管长度最大为0.44mm,当pH值超过6.0后花粉萌发率和花粉管长度随pH值的升高而逐渐下降.

表1 培养基pH值对锦带花粉萌发和花粉管生长的影响

注：表中每个小写字母代表5%的显著水平

2.2 培养温度对花粉萌发和花粉管生长的影响

经不同温度培养的花粉，其萌发率和花粉管生长差异较大(见表2).在15～25℃温度范围内花粉萌发率随温度升高而上升，25℃培养时花粉萌发率最高为86%，与其他温度下培养的萌发率相比差异显著，超过25℃时花粉萌发率开始下降.花粉管长度的变化趋势与花粉萌发率的变化趋势一致，即在较低的温度范围内，随温度的升高花粉管生长越好，当超过25℃培养时花粉管长度反而下降，25℃培养条件下花粉管生长最好为0.42mm，与其他处理相比差异显著.

表2 培养温度对锦带花粉萌发和花粉管生长的影响

注：表中每个小写字母代表5%的显著水平

2.3 培养时间对花粉萌发和花粉管生长的影响

不同培养时间条件下花粉萌发率和花粉管生长长度有较大差异(见表3).随培养时间的延长花粉萌发率先升高后下降，当培养时间为3h时花粉萌发率最大为92%，与培养时间为2h和4h的花粉萌发率相比差异不显著,花粉管长度的变化趋势与花粉萌发率不同，随培养时间的延长花粉管长度逐渐增加，当培养时间达到6h时花粉管长度达到最大值.

表3 培养时间对锦带花粉萌发和花粉管生长的影响

注：表中每个小写字母代表5%的显著水平

3 结论

花粉萌发与生长不仅与培养基组分有关，而且也受培养基pH值和培养温度的影响.研究表明植物花粉离体培养基的适宜pH值为5.0～7.0，最适pH值为6.0～6.5，在强酸或强碱条件下，均不利于离体花粉萌发与生长.他们受花粉培养温度的影响，在培养温度较低时花粉几乎不萌发，花粉管也不生长．而达到15℃以上时才能良好生长.本实验条件下,锦带花粉萌发和花粉管生长的最适培养基pH值为 6.0，培养温度为25℃，培养时间为3h.除了这些环境因素外，外源激素对植物花粉萌发和花粉管生长影响作用也很大.有关外源激素对锦带花粉离体萌发的影响有待进一步研究.

参考文献：

[1]阿达来提,侯正年.四季锦带引种与栽培技术[J].新疆林业,2005,6(1):23-29.

[2]周景清,张丽茹,周长虹,等.锦带花全光喷雾嫩枝扦插繁殖技术[J].河北林业科技,2007(1):20-21.

[3]汉斌,郑亦津,李法曾.山东植物志[M].青岛:青岛出版社,1997.

[4]刘林德,张萍,张丽,等.锦带花的花粉活力、柱头可授性及传粉者的观察[J].西北植物学报,2004,24(8):1431-1434.

[5]李范.不同培养条件对锦带花粉萌发的影响[J].安徽农业科学,2007,35(11):3234-3236.