玫瑰保春胶囊对更年期大鼠T-AOC、GSH-Px影响的研究*

陈雪娟，倪志宏

(甘肃中医学院，甘肃 兰州 730000)

更年期综合征是妇女在绝经前后由于雌激素水平波动或下降所致的以植物神经系统功能紊乱为主，伴有神经心理症状的一组症候群［1］。目前主要采用激素治疗，但禁忌症、副作用较多，长期替代治疗可引起子宫内膜增殖，大大增加了癌变的危险性。中医学治疗该病有较好疗效。本研究小组在传统验方的基础上，结合我院多年临床经验研发了玫瑰保春胶囊。该药主要由当归、红芪、百合、红玫瑰、地龙、公丁香等按一定的工艺制成。本研究以去势更年期大鼠为模型，通过观察玫瑰保春胶囊对大鼠血清中GSH-Px活力、T-AOC含量及子宫指数的影响，以期探讨玫瑰保春胶囊对更年期大鼠体内抗氧化作用的影响，及其对内分泌、卵巢功能和下丘脑—垂体—性腺轴的调节作用。

1 材料与方法

1．1 动物

健康Wistar雌性大鼠30只，11～12月龄，体质量180～200 g，由甘肃中医学院实验动物中心提供，质量合格证号：scxk(甘)2011-0001。

1．2 药品、试剂与仪器

玫瑰保春胶囊浓度为0．5g生药/mL;大豆异黄酮，南宁富莱欣生物科技有限公司产品，批号DL03118。水合氯醛，青岛宇龙海藻有限公司产品，批号2010052501;T-AOC(批号20111027)和 GSHPx(批号20111107)检测试剂盒，南京建成生物工程研究所提供。CT14RD台式高速冷冻离心机，上海天美生化仪器设备工程有限公司产品;可见分光光度计(VIS-723N)，北京瑞利分析仪器公司产品;数显恒温水浴锅，郑州杜甫仪器厂产品。

1．3 模型的建立

采用切除双侧卵巢法建立更年期大鼠模型。用100 g/L水合氯醛按0．3 mg/g腹腔注射麻醉大鼠;将大鼠放在解剖板上，腹部向上，剪去腹部毛，用碘伏消毒后，依次剪开腹部皮肤和肌肉;用眼科镊沿子宫角找到卵巢，结扎子宫角后，摘除卵巢(假手术组只切除少量脂肪组织);依次缝合肌肉和皮肤，缝合结束后用碘伏消毒、750 g/L酒精脱碘;用16万单位/mL青霉素钠清洗刀口，连续5 d。第6天开始做阴道细胞涂片：将无菌棉签用生理盐水浸湿后，伸入大鼠阴道，顺时针方向旋转1周;将棉签上的分泌物涂在干净的载玻片上，晾干，滴加美蓝染液;染色15 min后，洗片，晾干后二甲苯树脂封片;光学显微镜下观察，随机选择5个视野，计算阴道脱落细胞角化细胞指数(CI)。以CI＜50%作为造模成功的标准。

1．4 动物分组与药物干预

将30只大鼠随机分为假手术组、去势空白组(去势组)、去势+大豆异黄酮组(大豆异黄酮组)、去势+玫瑰保春胶囊小剂量组(玫瑰保春胶囊小剂量组)和去势+玫瑰保春胶囊大剂量组(玫瑰保春胶囊大剂量组)5组，每组6只。假手术组和去势组给予生理盐水0．01 mL/g体质量，大豆异黄酮组给予大豆异黄酮0．4 mg/g体质量，玫瑰保春胶囊小、大剂量组依次给予2．5，7．5 mg生药/g体质量。每天灌胃1次，连续15 d。

1．5 检测指标

大鼠干预结束后，腹主动脉取血，2 500 r/min、离心10 min取血清，-20℃保存备用;采用分光光度法、严格按试剂盒说明书测定血清中T-AOC和GSH-Px水平。称取子宫湿质量并计算子宫指数，计算公式为：子宫指数=子宫湿质量(g)/体质量(g)×100%。

1．6 统计学方法

2 结果

2．1 玫瑰保春胶囊对更年期大鼠子宫指数的影响

与假手术组对比，其余各组子宫指数明显下降，差别有统计学意义(P＜0．05)。与去势组对比，各药物干预组子宫指数增加，其中玫瑰保春胶囊大剂量组较之差别有统计学意义(P＜0．05)。与大豆异黄酮组对比，玫瑰保春胶囊大剂量组子宫指数增加，差别有统计学意义(P＜0．01)。见表1。

表1 各组大鼠子宫指数对比 ±s

表1 各组大鼠子宫指数对比 ±s

注：与假手术组对比，* P ＜0．05;与去势组对比，#P ＜0．05;与大豆异黄酮组对比，△△ P＜0．01。

组 别 动物数 子宫指数假手术组5 0．226 ±0．069去势组 6 0．043 ±0．008*大豆异黄酮组 6 0．046 ±0．003*玫瑰保春胶囊小剂量组 5 0．051 ±0．005*玫瑰保春胶囊大剂量组 6 0．059 ±0．005*#△△

2．2 玫瑰保春胶囊对更年期大鼠血清 T-AOC、GSH-Px的影响

与假手术组对比，其余各组血清T-AOC含量降低，差别有统计学意义(P＜0．01);与去势组对比，各药物干预组血清T-AOC含量增加，其中玫瑰保春胶囊大剂量组较之差别有统计学意义(P＜0．01);与大豆异黄酮组对比，玫瑰保春胶囊大剂量组TAOC含量高，差别有统计学意义(P＜0．01)。

与假手术组对比，其余各组血清GSH-Px活力下降，其中去势组、大豆异黄酮组和玫瑰保春胶囊小剂量组差别有统计学意义(P＜0．05或P＜0．01);与去势组对比，各药物干预组血清中GSH-Px活力增加，但差别无统计学意义;与大豆异黄酮组对比，玫瑰保春胶囊大剂量组GSH-Px高，差别有统计学意义(P ＜0．01)。见表2。

表2 各组大鼠血清T-AOC及SH-Px对比U·mL-1，±s

表2 各组大鼠血清T-AOC及SH-Px对比U·mL-1，±s

注：与假手术组对比，*P ＜0．05，＊＊ P ＜0．01;与去势组对比，##P ＜0．01;与大豆异黄酮组对比，△△ P＜0．01。

组 别 动物数T-AOC GSH-Px假手术组5 10．422 ±0．830 1 607．619 ±50．238去势组 6 6．907±0．685＊＊ 1 280．714±163．86*大豆异黄酮组 6 7．297±0．766＊＊ 1 380．952±26．255＊＊玫瑰保春胶囊小剂量组 5 7．104±0．650＊＊ 1 374．286±31．515＊＊玫瑰保春胶囊大剂量组 6 8．757±0．614＊＊##△△ 1 553．175±22．420△△

3 讨论

玫瑰保春胶囊主要由当归、红芪、百合等组方而成。方中当归，主要成分为多种有机酸、脂类、糖和多种氨基酸［2］，具有补血活血、调经止痛、养血滋补和抗氧化等功能［3-5］;红芪主要活性成分为红芪多糖，具有增强机体免疫力、抗衰老、抗氧化和清除自由基等作用［6-8］;百合主要活性成分为百合多糖，可增强机体免疫调节作用、抗肿瘤和抗氧化活性等［9-11］。

更年期的最早变化是卵巢功能衰退，然后才表现为下丘脑和垂体功能退化。内分泌和临床方面的变化均源于卵巢的衰老。体内自由基的含量与组织器官衰老有密切关系，体内氧自由基含量增多，组织抗氧化酶活性下降，导致卵巢组织衰老，雌激素分泌下降是一个重要因素［12-13］。自由基与体内物质(如核酸、蛋白质和脂质等)发生反应，生成氧化物或过氧化物，对机体造成损害，导致生物体衰老死亡。T-AOC从总体上反映机体防御系统抗氧化能力的水平;GSH-Px可阻断线粒体在呼吸链电子传递过程中产生各种自由基的链式反应，使细胞免受过氧化物的损伤［14-15］。

本研究结果显示，去势更年期大鼠子宫指数、血清中GSH-Px活力和T-AOC含量明显减少，机体抗氧化能力显著降低，其机制有待于进一步探讨;去势组给予大豆异黄酮和玫瑰保春胶囊后，血清中GSHPx活力和T-AOC含量得到一定程度提高，且玫瑰保春胶囊大剂量组效果较为显著。综上可知，玫瑰保春胶囊具有较强的抗氧化和清除自由基作用，可增强更年期大鼠抗氧化能力，从而在一定程度上延缓和改善了卵巢功能衰退。

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