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江苏省西部湖泊溶解性有机物光谱学特征和来源解析*

2012-12-11陈小锋揣小明杨柳燕

湖泊科学 2012年2期
关键词:腐殖酸分子量湖泊

陈小锋,揣小明,刘 涛,杨柳燕

(南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室,南京210046)

江苏省西部湖泊溶解性有机物光谱学特征和来源解析*

陈小锋,揣小明,刘 涛,杨柳燕**

(南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室,南京210046)

利用光谱学手段研究江苏省西部湖泊表层水体中溶解性有机物(DOM)组成与结构,并对其来源进行分析.单位浓度可溶性有机碳在254和280 nm波长下的吸光度值(SUVA)测定结果表明,各湖泊芳香性程度及分子量大小依次为邵伯湖>天岗湖>白马湖>石臼湖>洪泽湖>固城湖>骆马湖>高邮湖>宝应湖.特定波长下吸光度的比值(E2/E3、E3/E4)显示邵伯湖和白马湖中的DOM结构复杂、分子量大、苯环多,以腐殖酸为主要成分;其它湖泊的DOM腐殖化程度较低,以富里酸为主.指数函数曲线斜率(S275~295nm)拟合结果也同样表明邵伯湖DOM分子量最大,而宝应湖最低.各湖泊荧光指数和生物指数分别处于1.13~1.30和0.47~0.67范围内,体现出DOM强烈的陆源性.四个主要荧光峰的相对荧光强度之间均存在良好的相关性,表明这些湖泊的类腐殖酸及类蛋白物质可能有着相同的来源.结合这些湖泊的特征及流域经济发展水平,可以初步推断经入湖河流携带的由农业及其下游产业产生的有机质是江苏西部湖泊中DOM的主要来源.

湖泊;溶解性有机物;光谱学;江苏省

溶解性有机质(DOM)是指存在于各种天然水体中、可以通过0.45 μm或0.7 μm滤膜的天然有机质混合体,其组分包括腐殖酸、富里酸以及各种亲水性有机酸、羧酸、氨基酸、碳水化合物等[1],在水生态系统营养物质的生物化学循环过程中起着相当重要的作用[2-4].对水域中DOM组成和来源进行研究,有助于认识水生态系统中营养物质生物化学循环的特征,从而为水生态系统的保护提供依据.由于在水生态系统中的重要作用及化学组成和结构的复杂性,DOM成为近三十年来水环境研究的热点问题之一.目前,对DOM进行分析的手段很多,包括天然稳定性同位素技术[5-6]、超滤[7-8]、凝胶渗透色谱[9-10]和三维荧光光谱[11]等.相对于其它方法,光谱学测试具有样品预处理简单、操作简便、灵敏度高等优点,因此被越来越广泛地用于天然水体DOM光谱特征、分子量特征分析和物质组成及来源鉴别[12-14].

江苏省是我国淡水湖泊分布最集中的省区之一,境内有大小湖荡200余个,湖泊率达6%,居全国首位[15].但是近30 a来,工业和生活污水的排放、土地的高强度利用等人类活动使得江苏地区河湖水系逐步遭受污染威胁[16],因此本研究利用紫外-可见光谱及三维荧光技术分析江苏西部9个湖泊DOM的组成特征,并对其来源进行探讨.

1 材料和方法

1.1 样品采集与处理

2010年6月,在固城湖及石臼湖(图1)用有机玻璃采水器采集1 L表层0.5 m处水样,用鲁哥氏液现场固定,静置48 h浓缩至30 ml后,用浮游植物计数框在光学显微镜(×40)下观察计数[17].2010年10月在江苏西部9个湖泊(图1)中,根据湖泊大小及功能布点采集表层(0~0.5 m)水样,同时用YSI 6600多功能水质仪测定水体温度、pH、溶解氧、电导率等物理化学参数.采集的水样置于冷藏箱内低温保存,运回实验室后立即用0.7 μm玻璃纤维滤膜(预先450℃灼烧)过滤,测定前置冰箱中4℃保存.

图1 江苏省西部湖泊采样位点图Fig.1 Location of sampling lakes in Jiangsu Province

1.2 样品分析

已过滤的水样用日本岛津TOC5000A总有机碳测定仪测定可溶性有机碳(DOC)含量,仪器检测限为0.004 mg/L,标准偏差<2%.过滤后的水样置于1 cm石英比色皿中,采用岛津2450紫外-可见分光光度计测定200~600 nm吸收光谱,扫描间距0.5 nm.为了消除过滤清液中残留细小颗粒物的散射,利用700 nm处吸收系数进行散射效应订正[18].

三维荧光光谱用HitachiF-7000型荧光分光光度计测定,仪器光源为150 W氙灯,光电倍增管电压700 V,激发(Ex)和发射(Em)单色器均为衍射光栅,波长误差±2 nm,激发波长为350 nm时水的拉曼峰信躁比S/N>250(P-P).激发和发射狭缝宽度均为5 nm,扫描波长范围λEx为200~450 nm,λEm为250~600 nm,步长5 nm,扫描速度1200 nm/min.为消除水Rayleigh和Raman散射的影响,将图谱中Ex≥Em,2×Ex≤Em及Ex=Em±10~15 nm等区域中的数据以0代替[19-20].利用紫外-可见扫描数据对所得荧光值进行内滤波效应校正[21],同时为消除仪器间差别,采用0.01 mg/L硫酸奎宁的稀硫酸硫酸溶液在Ex/Em=350 nm/450 nm处的荧光强度将所测荧光强度换算成标准荧光强度后进行比较[13].处理后数据采用Sigmaplot 11绘制等高图.

1.3 单位DOC浓度样品的吸收系数及指数函数斜率的计算

单位DOC浓度的样品在特定波长下的吸收系数(SUVA)采用公式SUVA=A/bc进行计算[22],式中,A是该波长下的吸收值,b为比色皿光程(m),c为可溶性有机碳的浓度(mg/L).

DOM 光谱吸收基本上呈现指数衰减的规律,Bricaud 等[23]提出如下公式:a(λ)=a(λ0)exp[S(λ0-λ)];式中,a(λ)为DOM的吸收系数(m-1);λ为波长(nm);λ0为参照波长(nm);S为指数函数曲线斜率参数(μm-1),在275~295 nm波段采用线性拟合获得.

1.4 数据处理

采用SPSS 13对数据进行统计和分析,包括线性拟合及相关性分析等.

2 结果与讨论

2.1 湖泊基本水质参数

2010年10月江苏省西部湖泊的基本水质参数可以看出,9个湖泊水体均呈弱碱性(pH 7.4~8.5),溶解氧除白马湖(4.76 mg/L)外,其它湖泊相差不大.而各湖泊的DOM浓度则有着较大的差异,其中宝应湖的DOM浓度最高(以C计),达到23.08 mg/L,而邵伯湖的DOM浓度只有6.85 mg/L(表1).

表1 江苏省西部湖泊的基本水质参数Tab.1 The physical and chemical properties of the lake water in the west of Jiangsu Province

2.2 DOM的组成结构分析

紫外-可见吸收光谱(UV-Vis Absorbance Spectroscopy)已经广泛地应用于水、土壤中可溶性有机物的表征研究[24].特定波长下紫外吸收值对可溶性有机碳的比值(SUVA)可用来区分可溶性有机物组成[25].如SUVA254nm常被用于表征腐殖质样品中的芳香性结构,其值越高芳香性越强[26].而Chin等[27]则认为酚类、苯胺衍生物、安息香酸、多烯等物质在270~280 nm发生π~π*电子迁移,因此选择280 nm波长下的吸光度值进行研究,结果发现SUVA280nm可以提供可溶性有机质的芳香性程度、源、腐殖化程度和分子量等重要的信息,并且该值与DOM的芳香性、平均分子量均具有良好的相关性.特定波长的UV-Vis吸光值比也可用来指示水溶性有机物的组成、团聚化程度和分子质量的大小[28].E2/E3是250和365 nm处的紫外吸收值之比,有研究认为E2/E3可以较好地反映水溶性有机质的分子状况,E2/E3越小,则水溶性有机物的分子质量越大[29].Peuravuori等[30]发现E2/E3可作为湖沼中腐殖化的标志物,通常来说,腐殖酸相对于富里酸具有高的SUVA280nm和低的E2/E3.Abbt-Braun等[31]则选择300和400 nm处的紫外吸收值之比(E3/E4)进行研究,他们认为E3/E4<3.5时湖泊中水溶性有机物以腐殖酸为主,而E3/E4>3.5时则主要是富里酸.因此,本研究采用紫外-可见吸收光谱对江苏西部湖泊DOM特征进行分析,了解其化学组成.

各湖泊样品在一些特定波长下的SUVA值表明,在波长为254和280 nm时,各湖泊水样的SUVA值依次为邵伯湖>天岗湖>白马湖>洪泽湖>固城湖>石臼湖>骆马湖>高邮湖>宝应湖(表2),这说明邵伯湖中DOM的芳香性程度和平均分子量最高而宝应湖最低.从E2/E3值可以看出,各湖泊的DOM中腐殖酸的比例及DOM平均分子量大小依次为宝应湖>高邮湖>骆马湖>固城湖>天岗湖>石臼湖>洪泽湖>白马湖>邵伯湖,与SUVA的结果基本一致.邵伯湖的E3/E4值小于3.5,说明蓝移的程度较小,DOM的结构复杂、分子量大、苯环多,腐殖化程度较高,DOM以腐殖酸为主;其它湖泊的样品基本保持在3.96~7.00,说明蓝移的程度较大,腐殖化程度较低,DOM以富里酸为主,腐殖酸的含量较少.

指数函数斜率S值是表征有色可溶性有机物吸收系数随波长增加而递减的参数[23],其数值大小与有机物结构及拟合时所选取的波段有关.Helms等[32]对指数函数斜率与DOM分子量、来源关系进行研究,发现275~295 nm波长范围内拟合所得指数函数斜率S275~295nm值与DOM的分子量呈显著负相关,此后,S275~295nm得到广泛的应用.Tamara等[33]发现 Mckenzie河中 S275~295nm值在 11.1 ~15.5 μm-1间变化,而海水的S275~295nm值为 13.4 ~48.3 μm-1[34].国内张运林等[35]对太湖 DOM 吸收的 S275~295nm值进行拟合,其值约为17.9 μm-1.本试验发现各湖泊的 S275~295nm值在 15.3 ~26.60 μm-1之间(表2),均在国内外大量文献给出的范围内.比较S275~295nm值大小可发现邵伯湖DOM分子量最大,而宝应湖最小,与前面的研究结果一致.

表2 江苏省西部湖泊的DOM光谱学指标Tab.2 Some spectroscopic indices of DOM in lakes of west Jiangsu

2.3 湖泊DOM源分析

江苏省西部不同湖泊的DOM三维荧光光谱图可以看出,荧光峰主要有4类,包括2个类腐殖酸荧光峰(A峰,Ex/Em=230~260 nm/410~450 nm;C峰,Ex/Em=320~340 nm/430~450 nm)以及2个类蛋白荧光峰(B 峰,Ex/Em=280 nm/310 nm;D 峰,Ex/Em=220 ~230 nm/310 ~330 nm)[11](图2).一般认为 A、C 峰反映的是外源输入的富里酸和腐殖酸形成的荧光峰值,与腐殖质结构中的羰基和羧基有关,而B、D峰则反映的是生物降解来源的色氨酸和酪氨酸形成的荧光峰值[11].三维荧光光谱图中,荧光峰A和C较强,而类蛋白荧光峰B和D相对较弱,说明这些湖泊的来源以陆源有机质为主,由湖泊微生物产生的有机质比较少.浮游动植物细胞渗漏、有机体降解等过程[36-37]会产生类蛋白物质,从而导致荧光峰B和C荧光强度的比值r(B,C)升高,因此刘明亮等[38]提出r(B,C)可以作为区分DOM内外源贡献的重要参数.西部湖泊DOM的r(B,C)值在0.25 ~0.53 之间(表2),远远小于宋晓娜等在太湖的测试结果(2.0 ~2.7)[39],说明这些湖泊的DOM的外源性远远强于太湖.2010年6月测得石臼湖和固城湖的藻密度约为106~107cells/L,相对较高的浮游植物密度可能是这两个湖泊r(B,C)值(0.49~0.53)大于其它湖泊的原因.

特定波长荧光强度的比值可以用来区分外源和内源的相对贡献.McKnight等[26]发现激发光波长为370 nm时,荧光发射光谱强度在450与500 nm处的比值(荧光指数,FI)可以提供DOM来源的信息,并确定了陆源和内源的临界值分别为1.4和1.9.生物指数(BIX)是激发波长为310 nm时,荧光发射光谱强度在380和430 nm处的比值,它也可以用来估计湖泊内源物质对水体中DOM的相对贡献,当BIX值在0.8~1.0时表明DOM由生物或微生物活动产生,而低于0.6时则可认为DOM主要来自于外源[40].本研究中,各湖泊的FI和BIX分别在1.13~1.30和0.47~0.67之间(表2),体现出DOM极强的外源性.

图2 各个湖泊DOM三维荧光谱图Fig.2 Three-dimensional excitation emission matrix fluorescence spectroscopy(3DEEM)of DOM in different lakes

不同来源DOM的紫外区与可见区类腐殖酸荧光强度比值r(A,C)相差显著.Coble[11]研究河流DOM的r(A,C)平均值为1.08,国内有研究表明红枫湖 r(A,C)在1.76 ~1.97 之间[41],而太湖则在 1.12 ~2.36 之间[39],因此r(A,C)值的范围可作为湖泊类腐殖酸物质来源差异性的指标.本研究中,各湖泊的r(A,C)值在0.99~1.29之间(表2),其分布范围远小于太湖,说明这些湖泊可能具有相似的类腐殖酸物质来源.

相关性分析可以判定不同湖泊DOM来源差异性.紫外区类腐殖酸荧光主要由一些低分子量、高荧光效率的有机物质所引起,而可见区类腐殖酸荧光则是由相对稳定、高分子量的芳香性类富里酸物质所产生[42].因此,如果类腐殖酸荧光峰A和C的相对荧光强度存在较好的线性关系,即可认为其来源具有相似性[38].与此相似,如果类蛋白物质与类腐殖酸物质的相对荧光强度具有相关性,则可认为类蛋白物质和类腐殖酸类物质具有相似的来源,或者两者的结构之间具有某种联系[43].四个荧光峰的相对荧光强度的相关性分析结果可以看出,类蛋白荧光峰(峰B、峰D)之间、类腐殖酸荧光峰(峰A、峰C)之间以及类蛋白荧光峰(峰B、峰D)与类腐殖酸荧光峰(峰A、峰C)之间均存在良好的相关性(表3),表明这些湖泊的类腐殖酸及类蛋白物质可能存在相同的来源.

表3 单位DOC浓度下不同荧光峰强度的相关性Tab.3 The correlation of fluorescence intensities per unit organic carbon at different peaks

三维荧光图谱的多个指标均表明外源输入是这些湖泊中DOM的主要来源.湖泊DOM的外源输入包括地表径流引起的湖泊周围土壤中动植物碎屑及有机质的输入、生活污水及工农业污水的直接排入、养殖饲料投加以及入湖河流输入等[39].生活污水以及养殖饵料的分解物等均具有类富里酸含量低、类蛋白含量高的特点[44],但三维荧光图谱中类蛋白荧光并不强烈,表明这些因素对江苏西部湖泊中DOM的贡献甚小,而江苏西部湖泊均为过水性湖泊,换水周期短[15],因此可推断入湖河流输入是这些湖泊DOM的主要来源.固城湖和石臼湖属青弋江、水阳江水系,该流域主要以农业耕作为主[45].洪泽湖等苏北湖泊属淮河水系,众所周知,淮河流域总体上处于经济欠发达地区,第一产业在沿淮四省的产业结构中仍占有较大比重[46].农村地区的土壤、农田堆肥和腐烂植物中的腐殖质会随雨水和灌溉水输入河道,从而进入湖泊.此外,淮河流域占工业污染负荷50%以上的企业是造纸企业,其规模小、设备落后、治污难度大[47].造纸废水中含有大量的纤维素、木质素等有机质,因此这可能是苏北湖泊中DOM的另一个重要来源.入湖河流携带是江苏西部湖泊DOM的主要来源,同时也是这些湖泊富营养化的重要因素[16],因此应加强对江苏西部湖泊入湖河道的环境保护.

3 结论

1)江苏省西部湖泊中DOM的紫外-可见吸收光谱的SUVA、E2/E3、E3/E4和指数函数斜率均表明DOM的结构复杂度及分子量大小依次为邵伯湖>天岗湖>白马湖>石臼湖>洪泽湖>固城湖>骆马湖>高邮湖>宝应湖.

2)江苏省西部各湖泊的DOM三维荧光图谱中FI值和BIX值分别在1.13~1.30和0.47~0.67之间,显示DOM具有极强的外源性.

3)DOM的r(A,C)值及相关性研究结果均表明江苏西部湖泊中DOM具有相似的来源,结合这些湖泊流域的经济发展水平可推断入湖河流携带的由农业及其下游产业产生的有机质是江苏西部湖泊中DOM的主要来源.

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Characteristics and source identification of the dissolved organic matter in the lakes of west Jiangsu by spectroscopy

CHEN Xiaofeng,CHUAI Xiaoming,LIU Tao&YANG Liuyan
(State Key Laboratory of Pollution Control and Resource Reuse,School of the Environment,Nanjing University,Nanjing 210046,P.R.China)

The composition and origin of the dissolved organic matter(DOM)in some lakes of west Jiangsu was investigated using UV-Vis absorbance and fluorescence spectroscopy.The specific ultraviolet absorption(SUVA)at 254 nm and 280 nm indicated that the aromaticity and molecular weight of DOM ranked in the order of Lake Shaobo,Lake Tiangang,Lake Baima,Lake Shijiu,Lake Hongze,Lake Gucheng,Lake Luoma,Lake Gaoyou and Lake Baoying.The E2/E3and E3/E4values suggested that the DOM of Lake Shaobo and Lake Baima was structural complex with humic acid being the primary component,while other lakes’DOM was less complex and constituted mostly by fulvic acid.The exponential slope parameter(S275-295nm)values results were consistent with the conclusion obtained from SUVA,E2/E3and E3/E4.Fluorescence indexes and biological index of these lakes’DOM were ranged of 1.13-1.30,0.47-0.67,respectively,suggesting DOM a strong terrestrial origin.Significant correlation was found between the fluorescence intensities per unit organic carbon at different peaks,which indicated that the humic-like and protein-like materials in these lakes have a similar source.Considered the characterization of these lakes and the economic development,it can be deduced that most of these DOM are produced by agriculture and its downstream industries and imported with inflow rivers.

Lake;dissolved organic matter;spectroscopy;Jiangsu Province

* 国家水体污染控制与治理科技重大专项项目(2009ZX07106-001-001)资助.2011-03-24收稿;2011-10-10收修改稿.陈小锋,男,1975 年生,博士研究生;E-mail:xfchen@yzu.edu.cn.

** 通信作者;E-mail:yangly@nju.edu.cn.

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