华北驼绒藜和帕米尔驼绒藜及F1代酯酶同工酶分析＊

方 浩，张力君＊，乌仁其木格，王玉静，南斯勒玛，乌仁陶格苏

（内蒙古农业大学农学院，内蒙古 呼和浩特 010019）

华北驼绒藜（Caratoedes arborescens）为我国特产植物，主要分布于华北地区，帕米尔驼绒藜（C.？）原产于帕米尔地区，二者分布区存在相当程度的地理隔离。两种驼绒藜均具有株型大、叶量丰富、适应性强、可做饲草和生态建设材料利用等特点。二者在形态特征上区别十分明显。华北驼绒藜种源清晰，帕米尔驼绒藜的分类学地位则未见专门文献记载，两种驼绒藜之间的亲缘关系及杂交试验也未见报道。本研究试将两种驼绒藜杂交，其结果在理论上可为鉴定两种驼绒藜之间的亲缘关系、确定帕米尔驼绒藜的植物学地位提供生理学依据，在实践上或可融合两种驼绒藜之优良特性，探索培育驼绒藜杂交新品种。

同工酶是植物遗传特性的蛋白质表达方式之一，同工酶分析具有简便直观、清晰明确等优点，因此被广泛应用于对植物起源、分类、亲缘关系及遗传多样性的研究中〔1〕。本研究采用酶谱同工酶分析法对华北驼绒藜、帕米尔驼绒藜及其F1植株进行了比较研究。

1 材料与方法

华北驼绒藜来源于内蒙古农业大学牧草试验站。帕米尔驼绒藜种子2006年采收于美国Idaho州围场（NRCS Enclosure）中，其种质来源于亚洲Pamir地区，记载名称为Asian Winterfat（亚洲驼绒藜），“帕米尔驼绒藜”是我们为特指该种驼绒藜而暂用名。

以上两种驼绒藜在栽培生长3年后，于2010年8月7日～8月29日期间，以华北驼绒藜为父本，帕米尔驼绒藜为母本，进行套袋授粉〔2〕杂交工作，10月13日～10月24日采收种子，种子在室温下保存，2010年11月～12月间进行同工酶分析。

供试种子置于25℃恒温箱中发芽7d，取胚芽，采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行同工酶分析。测定、计算酶带Rf值及相对含量，Rf值＝酶带迁移距离／前沿距离。

2 结果与分析

酯酶同工酶分析结果表明，华北驼绒藜、帕米尔驼绒藜及其F1代植株的酯酶同工酶酶谱各具特征（图1，表1）。

华北驼绒藜和帕米尔驼绒藜均有5条酶带，其中Rf值一致的酶带有3条，但酶带强度，包括带宽和色深，均有明显差异。在Rf＝0.22和Rf＝0.61处，华北驼绒藜与帕米尔驼绒藜对比有2条特有酶带，酶带较宽，而帕米尔驼绒藜在Rf＝0.72处则有1条特有酶带。F1代具有4条明显酶带，其中继承了双亲的3条基带（Rf＝0.13、Rf＝0.57和Rf＝0.77）和1条华北驼绒藜特征带（Rf＝0.61），并有1条新增酶带（Rf＝0.80），新增酶带色谱较深。

图1 驼绒藜酯酶同工酶酶谱1－4 华北驼绒藜 5－8F1代 9－11 帕米尔驼绒藜

表1 驼绒藜酯酶同工酶酶谱Rf值

3 讨论与小结

同丁酶是基因表达之产物，酶谱差异可反映基因型差异〔3〕。酯酶同工酶广泛存在于植物体内，参与多种重要理化代谢活动。酯酶同工酶是分析种属亲缘关系及品种鉴定的指标之一〔4〕。

从华北驼绒藜和帕米尔驼绒藜酯酶同工酶的酶带数目、Rf值、代宽、色深等特征分析，两种驼绒藜既有较强的相似性，又各具特征，说明二者之间具有较为紧密的亲缘关系。帕米尔驼绒藜在分类学上尚无确定地位，根据本试验酯酶同工酶的相似性以及杂交成功、产生子代，而且Fl代种子能够正常萌发诸多证据可以推论，帕米尔驼绒藜与华北驼绒藜亲缘关系较近，地理隔离并不构成二者之间实质性的遗传隔离。

〔1〕云锦凤，李瑞芬，米福贵 .冰草的远缘杂交及杂种分析〔J〕.草地学报，1997，5（4）：221－225.

〔2〕刘锦，贾瑞芬，易津 .华北驼绒藜花粉萌发特性及不同授粉方式对其结实率的影响〔J〕.种子，2007，26（9）：5－8.

〔3〕Tsegaye S，Belay G，Tesemma T.Relationships among tetraploid wheat（Tritlcum turgidum L.）landrace populations revealed by isozyme markers and agronomic traits〔J〕.Theoretical and Applied Genetics，1996，93（4）：600－605.

〔4〕乌仁其木格，张力君，易津 .偃麦草属牧草种子同工酶比较研究〔J〕.内蒙古农牧学院学报，1999，20（2）：49－52.