4种病毒性猪病流行病学调查与分析
2012-11-29隋军锋焦连国侯高伟刘天伦吕帅阳赵亚荣
倪 娇,隋军锋,焦连国,侯高伟,刘天伦,吕帅阳,赵亚荣
(1.北京大北农动物医学研究中心,北京 100097;2.威海市动物卫生监督所,山东威海 264200)
近年来,养猪业迅速发展,不少猪场规模进一步扩大,一些新建猪场应运而生。然而,这些猪场面临的疾病威胁也更加严峻,猪传染病种类逐渐增多。虽然新病不断出现[1],猪瘟(CSF)、猪圆环病毒病(PCVD)、猪蓝耳病(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)等病毒性疾病依然是影响养猪业的主要疾病。为了更好地了解目前我国猪场部分常见病毒性疾病流行特点,本文对我国不同地区规模化猪场在2010年6月-2011年9月期间4种病毒性疾病进行了监测。
1 材料与方法
1.1 待检病料和血清 2010年6月-2011年9月期间来自全国20个省市的病料和血清样品共计13824份,其中病料样品来自发病猪场,用于检测伪狂犬野毒的血清样品来自免疫gE基因缺失疫苗的猪场,检测份数共计6699头份;用于检测抗体的血清来自不同背景的猪场,检测份数共计7125份。
1.2 检测方法 采用PCR/RT-PCR方法进行猪瘟(CSF)、猪圆环病毒病(PCVD)、猪蓝耳病(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)4种疾病的病料样品抗原检测,采用ELISA法检测猪伪狂犬病(PR)的血清样品PRV-gPI抗体;4种疾病的抗体水平检测均采用ELISA法。
1.3 检测试剂 4种疾病抗原检测所用PCR/RTPCR提取试剂盒购自全式金公司,扩增 CSFV、PCV2、PRRSV、HP - PRRSV、PRV 的引物分别来自E2编码区、ORF2编码区、ORF7编码区、Nsp2编码区和gE编码区;猪伪狂犬病gPI抗体检测采用的ELISA鉴别诊断试剂盒购自美国IDEXX公司;猪瘟抗体和猪伪狂犬gB抗体检测采用的ELISA诊断试剂盒购自美国IDEXX公司;猪蓝耳病和猪圆环病毒病抗体检测采用的ELISA诊断试剂盒均购自武汉科前动物生物制品有限责任公司。
2 结果
2.1 4种疾病的抗原和抗体监测情况 2010年6月-2011年9月期间共检测来自全国20个省市的病料和血清样品。各种疾病具体的检测份数和检测场数,以及相应的阳性情况参见表1。抗原检测中,样品阳性率和猪场阳性率最高的均是PCVD,最低的均是PR;抗体水平检测中,抗体水平最高的是PR,最低的是PCVD。
表1 2010年6月-2011年9月期间4种疾病抗原和抗体监测统计表
2.2 不同省市的抗原检测情况比对 对20个省市中样品较多的16个省市4种疾病抗原检测阳性率进行比对,具体比对结果参见图1。
图1 国内16个省市4种疾病抗原检测阳性率比对情况(河南、江苏的PR未测,江西的PCVD未测)
由图1可以看出:各省的PCVD抗原阳性率均很高,最高的河南(4/4)和江苏(5/5)均达到100%,浙江和河北抗原阳性率均很高,分别达到88.89%(8/9)和82.86%(58/70),较低的天津和内蒙古也达到了25%(1/4)和30.23%(13/43);PR的抗原阳性率均很低,最高的是陕西,为40.45%(36/89),安徽和内蒙古阳性率仅为0%(0/27)和0.59%(1/170);CSF和PRRS在各省之间差异均很大,CSF最低阳性率是安徽和河南,均为0%(0/13,0/91),较高的是天津和陕西,分别为 78.95%(15/19)和65.00%(26/40);PRRS最低阳性率是江西,为0%(0/13),较低的黑龙江仅为15.08%(19/126),较高的是河南 100%(4/4)、江苏(15/15)和陕西73.47%(36/49)。
2.3 PR的抗原检测和gPI抗体检测比对情况 采用PCR方法对138个送检猪场送检的病料样品进行抗原检测,样品阳性率达到6.57%,用ELISA方法对147个送检猪场送检的血清样品进行gPI抗体检测,样品阳性率达到10.58%。具体比对情况参见表2。
表2 PR的抗原和PRV-gPI抗体检测比对情况表
2.4 引起 PRRS的毒株鉴别诊断 目前,引起PRRS的毒株有经典毒株PRRSV,同时也有引起高致病性蓝耳病的变异毒株HP-PRRSV。本文采用不同的引物、RT-PCR方法进行毒株鉴别检测,当用扩增PRRSV的引物扩增为阳性,而用扩增HP-PRRSV的引物扩增为阴性时,判为PRRSV;两者同时为阳性时,判为HP-PRRSV。结果显示:PRRSV的阳性率为38.43%,HP-PRRSV 的阳性率为35.83%,具体数据参见表3。
表3 引起PRRS的毒株鉴别情况表
3 分析与讨论
养猪业的压力来源于管理、饲养、疫病等各个方面,疫病是最主要的危害,并且从近几年农业部发布的全国生猪疫情通报分析,在多重感染的疾病中,80%是病毒病[2]。由此可见,病毒性疾病已经占据首要位置,值得关注。很多专家均认为在众多病毒性疾病中,猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病和猪圆环病毒病等仍是影响养猪业的主要疫病[3-4]。在2010年6月-2011年9月期间对全国20个省市的病料和血清监测结果表明:4大疾病的流行范围非常广泛,普遍存在,PCVD位居首位,其次是PRRS、CSF和PR;PCVD的抗原阳性率和猪场阳性率最高,整体抗体水平最低,PR的抗原阳性率和猪场阳性率最低,整体抗体水平最高,其中抗原阳性率的检测与2010年上半年的检测结果基本一致[5]。虽然抗原抗体检测不是一一对应的关系,并且大多数抗原检测没有进行疫苗毒和野毒的鉴别检验,但是根据送检样品的猪场免疫背景综合分析,基本能够从整体上反映出疫苗免疫的重要性。猪伪狂犬病抗原检测是鉴别检测,只要是阳性即为野毒感染,本文结果为抗原阳性率低、抗体阳性率高,有力地证实了猪伪狂犬疫苗发挥了一定的保护作用。
从各省市的病原检测阳性率比对分析结果来看,不同疫病在不同地区的流行情况有所不同,各省的PCVD抗原阳性率均很高,PR的抗原阳性率均很低,CSF和PRRS的流行在各省市之间差异均很大。这个比对结果说明可能与各地区的防疫措施、免疫技术、使用疫苗的质量和免疫程序等各种因素有一定关系。
目前,由于猪伪狂犬疫苗基本都是基因缺失苗,所以针对PR的病原检测主要采用PCR和gPI抗体检测两种方法,本文的结果证明了两种方法检测的结果基本一致。
猪蓝耳病依旧是侵害我国养猪业的病毒病之一,并且毒株呈多样化趋势。杨汉春教授指出HP-PRRSV广泛流行和传播,是引发猪繁殖与呼吸综合征疫情的优势流行毒株,其致病性与毒力没有降低,只是基因组发生了一些微小的变异;还指出同一个猪场使用两种(不同毒株)以上的活疫苗、免疫次数过频会加剧猪繁殖与呼吸综合征病毒的变异、疫苗毒株间以及疫苗毒株与野毒株间的重组机会,从而导致新毒株的产生,将会使我国的猪繁殖与呼吸综合征越来越复杂[3]。本文的检测结果也证实了这一现象,PRRSV和HP-PRRSV的阳性率很相近。
综上所述,在对送检猪场免疫背景清晰的前提下,对检测的数据进行综合分析,近年来我国的PCVD感染率有所上升。养猪户需更新养殖理念,及时采用有效的检测方法以便及时了解猪场发病情况,做到早发现早预防,从而达到更好的效益。
[1] 崔尚金.2005年我国猪病流行现状及特点[J].猪业科学,2006,(1):34 -35.
[2] 孙友德,王玉东,张学忍.当前主要猪病的流行趋势及流行原因分析[J].山东畜牧兽医,2010,(10):33-35.
[3] 杨汉春.2010年猪病流行情况与2011年流行趋势及防控对策[J].猪业科学,2011,(1):47 -48.
[4] 万遂如.2009年我国主要猪病流行概况与防控对策[J].养猪,2009,(6):49 -54.
[5] 吕超超,焦连国,张金双,等.2010年上半年11省市规模猪场疫病检测与剖析[J].中国畜牧兽医,2011,38(2):165 -167.