井冈山区63种植物不同溶剂萃取物乙酰胆碱酯酶抑制活性的初步研究
2012-11-24殷帅文刘丽萍王安萍毛恺俊
殷帅文,刘丽萍,王安萍,毛恺俊,熊 欣
1井冈山大学生命科学学院;2江西省生物多样性与生态工程重点实验室,吉安343009
井冈山区63种植物不同溶剂萃取物乙酰胆碱酯酶抑制活性的初步研究
殷帅文1,2*,刘丽萍1,王安萍1,毛恺俊1,熊 欣1
1井冈山大学生命科学学院;2江西省生物多样性与生态工程重点实验室,吉安343009
采用乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性筛选模型,对采自井冈山及周边地区的63种植物(67个部位)乙醇提取物的不同溶剂萃取物进行AChE抑制活性研究。结果表明:在乙酸乙酯萃取物中,供试质量浓度在1 mg/ mL时,其中剪刀草和戟叶蓼表现出较强的AChE抑制活性,抑制率均大于90%,其余大部分植物均大于40%。供试质量浓度在0.025 mg/mL时,蛇莓等6种植物的抑制率大于60%,其余大部分植物小于30%;在正丁醇萃取物中,供试质量浓度在1 mg/mL时,紫萼变种、活血丹、菟丝子、剪刀草、冬青叶山茶叶、地念和车前草的抑制率大于80%,其余大部分植物的抑制率均大于40%。供试质量浓度在0.025 mg/mL时,秀丽四照花等22种植物抑制率均大于50%;在石油醚萃取物中,供试质量浓度在1 mg/mL时,紫萼变种、紫茎前胡、博落回、杠板归、地念、山橿、藤石松和车前草的抑制率大于90%,供试质量浓度在0.025 mg/mL时,紫茎前胡等17种植物抑制率大于70%。另外,有些植物萃取物不仅对AChE没有抑制活性,反而表现出一定的增强作用。
植物提取物;乙酰胆碱酯酶;抑制剂;活性评价
早老性痴呆症(又称阿尔茨海默氏病,Alzhei- mer’s Disease.AD)是发生于老年和老年前期以进行性神经退化为特征的大脑退行性病变,是中枢神经系统变行性疾病,其主要临床表现为进行性认知功能减退并伴有行为障碍和情绪异常等,严重者直至失去生活自理能力[1,2]。目前的研究认为AD是一种多病因疾病,胆碱能假说是目前最为被广泛接受的病理理论[3-5]。因此,AChE抑制剂(Acetylcholinesterase Inhibitor.AChEI)药物是目前研究最多、最为活跃的抗早老性痴呆症药物[3-7]。其中最具代表性的中枢神经性可逆AChEI有第一代的Tacrine (商品名:cognex),Donepezil(商品名:Acricept).Rivastigmine(商品名:Exelon),以及第二代的石杉碱甲(HupA)等[3]。
自然界具有丰富的生物资源多样性,大量研究表明:天然植物药用成分具有疗效好,副作用小,作用面广,适宜长期服用等优点。因而,从药用植物中寻找具有抗老年性痴呆的乙酰胆碱酯酶抑制剂,已成为当今医药研究方面的热点课题[7,8]。为此,本文对采自江西井冈山地区的63种植物乙醇提取物的不同溶剂萃取物进行了AChE抑制活性研究,旨在为发现天然AChE抑制剂提供线索。
1 材料与方法
1.1 植物提取物样品的制备
本实验所用的植物样品均采自江西井冈山地区,由井冈山大学周兵老师鉴定,模式标本保存于井冈山大学标本馆。新鲜的植物材料阴干,磨碎,取上述每种磨碎的植物样品10 g。用95%乙醇100 ml浸泡,超声波提取30 min,过滤,反复提取3次,合并提取液,减压浓缩后得乙醇提取物浸膏,将浸膏用分别加入20 mL蒸馏水,再依次加入约30 mL石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取3次,合并3次萃取液浓缩,分别得石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取物,称重,使用前用50%乙醇分别配成40和1 mg/mL浓度(最终测试浓度分别为1和0.025 mg/mL),备用。
1.2 仪器
UV2550紫外可见分光光度计(日本Shimadzu公司),SC215超级数控恒温槽(宁波天恒仪器厂),旋转蒸发仪(瑞士BüCHI公司)。
1.3 药品与试剂
乙酰胆碱酯酶(AChE.Sigma公司),50 mmol/ L、pH 8.0的磷酸缓冲盐溶液(PBS),15 mmol/L二硫二硝基苯甲酸(Dithiobisnitrobenzoic acid.DTNB)溶液(Sigma公司)(用50 mmol/L.pH 8.0 PBS配制),15 mmol/L硫代乙酰胆碱(Acetylthiocholine.ATch.Sigma公司,用50 mmol/L.pH 8.0 PBS配制),4%十二烷基硫酸钠(SDS.Sigma公司).阳性对照tacrine(Sigma公司),其余化学试剂均为分析纯。
1.4 实验方法
实验采用改良的Ellman方法[9]进行,简单的说,2.65 ml PBS(pH 8.0)。50 μLAChE(0.85 U/ ml,buffer pH 8).100 μL 15 mM DTNB和样品溶液100 μL加入试管,37℃预热2 min,然后加入100 μL 15 mM ATch,在37℃保温20 min后立即加入1 mL 0.4%SDS终止反应,将所得溶液立即在412 nm下测量吸光值并根据下式计算抑制率。
抑制率(%)=[A对照-(A样品-A样品空白)]/A对照×100
这里 A对照是指样品溶液为没有添加样品的50%乙醇溶液时的吸光值,A样品是指添加样品溶液的吸光值,而A样品空白则表示添加样品溶液但没有添加底物ATch时的吸光值。所有实验重复三次并计算平均值和标准差,阳性对照为他克林。
2 结果
2.1 乙酸乙酯萃取物的AChE抑制活性的研究
对63种植物乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物AChE抑制活性的研究表明(表1):在供试质量浓度在1 mg/mL时,剪刀草和戟叶蓼表现出较强的AChE抑制活性,抑制率均大于90%,其余大部分植物的抑制率均大于40%。在供试质量浓度在0.025 mg/mL时,只有少数植物表现出较高的AChE抑制活性,其中蛇莓、博落回、苦苣苔、盐肤木、南方红豆杉和圆锥绣球的抑制率大于60%。其余大部分植物的抑制活性均小于30%,甚至有些植物不仅对AChE没有抑制活性,反而表现出一定的增强作用。总的来说,忍冬科、大戟科、灯心草科、海金沙科、龙牛儿苗、苦苣苔科、漆树科、红豆杉科和虎耳草科植物在1 mg/mL,0.025 mg/mL浓度下抑制率较高。
表1 63种植物乙酸乙酯萃取物抑制AChE活性Table 1 AChE inhibitory activity of the the ethyl acetate soluble fractions isolated from ethanol extracts of 63 species of plants
黄牛奶叶(Symplocos laurina) 山矾科 叶 48.30±2.78 11.58±1.33辣椒(Capsicum annuum) 茄科 叶,茎 80.36±3.30 27.41±0.25龙牙草(Agrimonia pilosa) 蔷薇科 叶,茎 79.46±0.96 -23.94±0.16蛇莓(Duchesnea indica) 蔷薇科 叶,茎 52.12±8.89 69.81±0.94水杨梅(Geum aleppicum) 蔷薇科 叶,茎 45.24±2.67 30.96±0.35紫萼变种(Teucrium porphyreum) 唇形科 叶,茎 72.12±4.48 6.84±1.51薄荷(Mentha haplocalyx) 唇形科 叶,茎 58.41±4.55 -2.31±1.99活血丹(Glechoma longituba) 唇形科 叶,茎 47.74±2.91 25.05±7.09菟丝子(Cuscuta chinensis) 旋花科 叶,茎 56.47±1.73 -3.57±1.17牛耳枫(Daphniphyllum calycinum) 交让木科 叶,茎 86.93±0.52 46.36±9.64野胡萝卜(Daucus carota) 伞形科 叶,茎 44.69±0.64 43.72±6.42紫茎前胡(Peucedanum violaceum) 伞形科 叶,茎 75.14±0.68 19.03±6.85葎草(Humulus scanden) 桑科 叶,茎 65.31±1.08 -29.44±1.18忍冬(Lonicera japonica) 忍冬科 叶,茎 51.18±1.33 45.82±6.58乌蔹莓(Cayratia japonica). 葡萄科 叶 64.35±1.64 -21.67±1.72乌蔹莓(Cayratia japonica) 葡萄科 茎 57.96±0.83 -42.96±7.66剪刀草(Sagittaria trifolia) 泽泻科 叶,茎 98.40±2.76 23.77±1.98柿树(Diospyros kaki) 柿树科 叶 41.08±5.86 10.99±3.70柿树(Diospyros kaki) 柿树科 茎 84.65±2.84 4.59±5.44冬青叶山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 茎 71.60±3.26 24.73±6.10冬青叶山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 叶 45.11±1.19 -14.96±1.46枫杨(Pterocarya stenoptera) 胡桃科 叶,茎 59.20±1.05 3.91±0.99庐山楼梯草(Elatostema stewardii) 荨麻科 叶,茎 53.77±1.27 -13.93±4.04叶下珠(Phyllanthus urinaria) 大戟科 叶,茎 55.91±0.43 48.53±0.36高山肺形草(Tripterospermum cordifolium) 龙胆科 叶,茎 60.02±0.72 7.79±2.01博落回(Macleaya cordata.) 罂粟科 叶,茎 54.97±0.72 61.99±2.65血水草(Eomecon chionantha) 罂粟科 叶 54.53±0.76 -15.27±6.52小灯心草(Juncus bufonius) 灯心草科 全草 60.54±0.95 56.09±8.75尼泊尔蓼(Polygonum nepalense) 蓼科 全草 63.41±3.13 -54.05±1.72戟叶蓼(Polygonum thunbergii.) 蓼科 全草 99.50±2.21 30.62±1.24杠板归(Polygonum perfoliatum.) 蓼科 叶,茎 31.72±2.51 12.64±4.69毛茛(原变种)(Ranunculus japonicus) 毛茛科 全草 51.84±1.36 -29.29±5.65柏拉木(Blastus cochinchinensis) 野牡丹科 叶,茎 86.93±1.16 5.70±1.22肥肉草(Fordiophyton fordii) 野牡丹科 花,叶,茎 69.36±0.05 4.72±4.00地念(Melastoma dodecandrum) 野牡丹科 全草 50.45±7.32 46.11±1.030中国茜草(原变种)(Rubia chinensis) 茜草科 全草 73.01±7.01 26.29±3.02四叶葎(Galium bungei.) 茜草科 叶,茎 40.11±1.06 19.36±1.10短柄怉栎(Quercus serrata) 壳斗科 叶 36.82±2.65 11.03±3.27短柄怉栎(Quercus serrata) 壳斗科 茎 71.08±4.82 35.77±1.04过路惊(Bredia quadrangularis) 壳斗科 叶,茎 49.41±2.17 38.33±0.17星毛鸭脚木(Schefflera minutistellata) 五加科 叶,茎 16.14±0.97 -0.67±0.95棘茎楤木(Aralia echinocaulis) 五加科 叶,茎 56.64±4.55 28.55±2.45
注:数值表示为±s(n=3);阳性对照浓度为0.1 μg/mL。Note:Values were expressed as mean±SD;tacrine concentration is 0.1 μg/ml.
2.2 正丁醇萃取物的AChE抑制活性的研究
对63种植物乙醇提取物的正丁醇萃取物AChE抑制活性的研究表明(表2):供试质量浓度在1 mg/mL时,水杨梅、紫萼变种、活血丹、菟丝子、剪刀草、冬青叶山茶叶、地念和车前草的AChE抑制率均大于80%,其余大部分植物的抑制率均大于40%。供试质量浓度在0.025 mg/mL时,仍有部分植物表现出较高的AChE抑制活性,其中秀丽四照花、龙牙草、黄牛奶叶、蛇莓、牛耳枫、野胡萝卜、葎草、忍冬、乌蔹莓、柿树茎、冬青叶山茶叶、枫杨、庐山楼梯草、博落回、血水草、小灯心草、戟叶蓼、毛茛(原变种)、柏拉木、地念、柿树茎和过路惊抑制率均大于50%。一些植物如活血丹、棘茎楤木、盐肤木、南方红豆杉、圆锥绣球和车前草提取物不仅对AChE没有抑制活性,反而表现出一定的增强作用。总的来说,山茱萸科、蔷薇科、旋花科、交让木科、桑科、忍冬科、胡桃科、荨麻科、大戟科、罂粟科、鳞始蕨科和壳斗科植物在1,0.025 mg/mL浓度下抑制率较高。
表2 63种植物正丁醇萃取物抑制AChE活性Table 2 AChE inhibitory activity of the the n-butyl alcohol soluble fractions isolated from ethanol extracts of 63 species of plants
龙牙草(Agrimonia pilosa) 蔷薇科 叶,茎 49.28±0.93 81.53±0.55蛇莓(Duchesnea indica) 蔷薇科 叶,茎 68.37±7.84 56.90±14.25水杨梅(Geum aleppicum) 蔷薇科 叶,茎 89.40±0.99 23.82±0.66紫萼变种(Teucrium porphyreum) 唇形科 叶,茎 83.43±1.95 42.07±0.69薄荷(Mentha haplocalyx) 唇形科 叶,茎 74.81±2.19 4.01±3.67活血丹(Glechoma longituba) 唇形科 叶,茎 86.74±1.81 -27.01±6.43菟丝子(Cuscuta chinensis) 旋花科 叶,茎 82.33±0.02 48.37±0.76牛耳枫(Daphniphyllum calycinum) 交让木科 叶,茎 53.03±1.16 64.55±3.09野胡萝卜(Daucus carota) 伞形科 叶,茎 22.00±1.45 52.21±1.12紫茎前胡(Peucedanum violaceum) 伞形科 叶,茎 59.38±3.10 16.69±1.27葎草(Humulus scanden) 桑科 叶,茎 69.62±1.51 56.11±2.92忍冬(Lonicera japonica) 忍冬科 叶,茎 57.60±2.34 64.33±2.37乌蔹莓(Cayratia japonica). 葡萄科 叶 53.39±3.97 36.46±4.11乌蔹莓(Cayratia japonica) 葡萄科 茎 52.84±2.63 53.01±0.75剪刀草(Sagittaria trifolia) 泽泻科 叶,茎 83.86±0.73 41.343±0.19柿树(Diospyros kaki) 柿树科 叶 49.07±1.51 30.39±4.87柿树(Diospyros kaki) 柿树科 茎 63.51±0.77 85.089±0.70冬青叶山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 茎 71.80±7.20 39.70±0.29冬青叶山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 叶 86.20±0.87 69.81±9.37枫杨(Pterocarya stenoptera) 胡桃科 叶,茎 74.36±1.76 68.71±5.24庐山楼梯草(Elatostema stewardii) 荨麻科 叶,茎 71.57±5.27 50.24±1.86叶下珠(Phyllanthus urinaria) 大戟科 叶,茎 53.28±1.29 70.69±2.84高山肺形草(Tripterospermum cordifolium) 龙胆科 叶,茎 68.18±7.77 24.08±0.99博落回(Macleaya cordata.) 罂粟科 叶,茎 61.81±1.58 67.64±2.93血水草(Eomecon chionantha) 罂粟科 叶 59.39±1.27 78.59±1.60小灯心草(Juncus bufonius) 灯心草科 全草 61.82±2.23 50.72±1.42尼泊尔蓼(Polygonum nepalense) 蓼科 全草 57.15±1.42 48.47±1.08戟叶蓼(Polygonum thunbergii.) 蓼科 全草 47.31±1.79 70.37±1.20杠板归(Polygonum perfoliatum.) 蓼科 叶,茎 47.07±2.37 30.95±2.08毛茛(原变种)(Ranunculus japonicus) 毛茛科 全草 55.02±0.84 54.89±1.63柏拉木(Blastus cochinchinensis) 野牡丹科 叶,茎 59.39±0.62 53.28±0.37肥肉草(Fordiophyton fordii) 野牡丹科 花,叶,茎 56.92±2.81 5.08±5.37地念(Melastoma dodecandrum) 野牡丹科 全草 80.22±0.83 53.01±0.60中国茜草(原变种)(Rubia chinensis) 茜草科 全草 54.82±5.75 19.33±3.74四叶葎(Galium bungei.) 茜草科 叶,茎 57.54±1.98 43.68±3.97短柄怉栎(Quercus serrata) 壳斗科 叶 71.83±3.26 50.54±3.87短柄怉栎(Quercus serrata) 壳斗科 茎 68.94±0.75 31.47±3.27过路惊(Bredia quadrangularis) 壳斗科 叶,茎 57.14±4.74 52.24±0.30星毛鸭脚木(Schefflera minutistellata) 五加科 叶,茎 22.84±2.01 8.21±6.32棘茎楤木(Aralia echinocaulis) 五加科 叶,茎 70.34±0.86 -47.20±5.83水金凤(Impatiens noli-tangere) 凤仙花科 花,叶,茎 33.05±6.45 21.43±0.50山橿(Lindera reflexa). 樟科 叶,茎 66.14±1.15 48.30±3.91
注:数值表示为±s(n=3);阳性对照浓度为0.1μg/mL。Note:Values were expressed as mean±SD;tacrine concentration is 0.1μg/mL.
2.3 石油醚萃取物的AChE抑制活性的研究
对63种植物乙醇提取物的石油醚萃取物AChE抑制活性的研究表明(表3):在供试质量浓度在1 mg/mL时,紫萼变种、紫茎前胡、博落回、杠板归、地念、山橿、藤石松和车前草的AChE抑制率均大于90%。供试质量浓度在0.025 mg/mL时,仍有部分植物表现出较高的AChE抑制活性,其中抑制率大于70%的分别有紫茎前胡、柿树叶、冬青叶山茶叶、肥肉草、中国茜草(原变种)、短柄怉栎叶、短柄怉栎茎、过路惊、星毛鸭脚木、水金凤、山橿、藤石松、东亚老鹳草、一把伞南星、大叶冷水花、金线吊乌龟、花叶山姜和半枫荷等17种植物。总的来说,柿树科、大戟科、罂粟科、茜草科、壳斗科、五加科、凤仙花科、樟科、石松科、天南星科、防己科和姜科的抑制率在1、0.025 mg/mL浓度下抑制率较高。
表3 63种植物石油醚萃取物抑制AChE活性Table 3 AChE inhibitory activity of the the petroleum ether soluble fractions isolated from ethanol extracts of 63 species of plants
紫萼变种(Teucrium porphyreum) 唇形科 叶,茎 90.44±2.43 40.89±3.43薄荷(Mentha haplocalyx) 唇形科 叶,茎 86.22±0.23 11.03±7.75活血丹(Glechoma longituba) 唇形科 叶,茎 53.39±7.13 41.57±1.98菟丝子(Cuscuta chinensis) 旋花科 叶,茎 58.70±1.45 35.13±0.36牛耳枫(Daphniphyllum calycinum) 交让木科 叶,茎 39.63±0.16 33.39±1.29野胡萝卜(Daucus carota) 伞形科 叶,茎 55.06±2.44 26.52±2.50紫茎前胡(Peucedanum violaceum) 伞形科 叶,茎 92.49±3.07 76.60±2.18葎草(Humulus scanden) 桑科 叶,茎 37.39±4.83 30.42±0.92忍冬(Lonicera japonica) 忍冬科 叶,茎 17.78±0.32 46.52±7.68乌蔹莓(Cayratia japonica). 葡萄科 叶 60.52±3.20 59.66±0.65乌蔹莓(Cayratia japonica) 葡萄科 茎 47.02±0.80 32.92±1.76剪刀草(Sagittaria trifolia) 泽泻科 叶,茎 29.70±2.54 26.96±3.62柿树(Diospyros kaki) 柿树科 叶 79.31±3.73 72.94±3.98柿树(Diospyros kaki) 柿树科 茎 55.56±3.87 61.25±1.61冬青叶山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 茎 86.82±7.19 23.84±2.20冬青叶山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 叶 44.16±5.82 96.52±1.78枫杨(Pterocarya stenoptera) 胡桃科 叶,茎 87.14±6.65 36.55±2.80庐山楼梯草(Elatostema stewardii) 荨麻科 叶,茎 62.42±1.06 38.20±1.56叶下珠(Phyllanthus urinaria) 大戟科 叶,茎 100.00±0.00 55.17±1.64高山肺形草(Tripterospermum cordifolium) 龙胆科 叶,茎 54.80±1.23 34.16±0.55博落回(Macleaya cordata.) 罂粟科 叶,茎 95.33±5.14 63.93±1.11血水草(Eomecon chionantha) 罂粟科 叶 -83.92±6.57 46.85±1.14小灯心草(Juncus bufonius) 灯心草科 全草 65.29±0.57 37.19±3.97尼泊尔蓼(Polygonum nepalense) 蓼科 全草 87.79±5.96 30.90±1.05戟叶蓼(Polygonum thunbergii.) 蓼科 全草 5.69±0.43 49.50±2.50杠板归(Polygonum perfoliatum.) 蓼科 叶,茎 97.66±0.38 18.30±1.92毛茛(原变种)(Ranunculus japonicus) 毛茛科 全草 35.49±7.99 29.55±2.34柏拉木(Blastus cochinchinensis) 野牡丹科 叶,茎 88.05±4.18 44.94±4.56肥肉草(Fordiophyton fordii) 野牡丹科 花,叶,茎 39.10±1.11 76.03±2.00地念(Melastoma dodecandrum) 野牡丹科 全草 95.44±5.26 32.28±3.33中国茜草(原变种)(Rubia chinensis) 茜草科 全草 62.68±2.83 73.34±0.96四叶葎(Galium bungei.) 茜草科 叶,茎 66.57±3.89 56.36±2.53短柄怉栎(Quercus serrata) 壳斗科 叶 74.03±0.39 74.91±2.60短柄怉栎(Quercus serrata) 壳斗科 茎 25.92±0.39 86.78±1.53过路惊(Bredia quadrangularis) 壳斗科 叶,茎 61.68±2.04 76.11±1.34星毛鸭脚木(Schefflera minutistellata) 五加科 叶,茎 79.95±3.40 74.55±0.35棘茎楤木(Aralia echinocaulis) 五加科 叶,茎 55.46±2.80 40.02±2.21水金凤(Impatiens noli-tangere) 凤仙花科 花,叶,茎 68.58±0.63 74.93±0.51山橿(Lindera reflexa). 樟科 叶,茎 97.83±1.57 76.49±1.20藤石松(Lycopodiastrun Lycopodiastrum) 石松科 全草 95.72±4.79 75.65±1.66东亚老鹳草(Geranium nepalense) 龙牛儿苗 全草 39.04±7.50 75.23±3.59一把伞南星(Arisaema erubescens) 天南星科 叶,茎 62.68±2.83 73.95±2.33
注:数值表示为±s(n=3);阳性对照浓度为0.1 μg/mL。Note:Values were expressed as mean±SD;tacrine concentration is 0.1 μg/mL.
3 讨论
随着社会人口的老化,老龄人口不断增加,老年性痴呆症发病率相对上升,目前,全世界约有1700~2500万的人患有此病[10],痴呆症与心血管疾病、恶性肿瘤一起已成为老年人致残、致死的三大疾病[11]。然而,从植物中筛选并开发出的抗老年性痴呆症的药物并不多,系统的进行植物AChE抑制活性研究的报道也很少[3],本实验对采集到的63种植物乙醇提取物的三种溶剂萃取物进行了AChE抑制活性研究,实验结果显示部分溶解萃取物提取物具有较高的的抑制AChE活性。例如在石油醚萃取物中,在供试质量浓度在1 mg/mL时,紫萼变种、紫茎前胡、博落回、杠板归、地念、山橿、藤石松和车前草的抑制率均大于90%。供试质量浓度在0.025 mg/mL时,仍有部分植物表现出较高的AChE抑制活性,其中紫茎前胡等18种植物抑制率大于70%。另外,在对不同溶剂萃取物的比较中,由正丁醇相和石油醚相抑制率比乙酸乙酯相要高,显示抑制AChE活性成分或许更多的在这两相溶剂中,极性偏小或偏大,而在中等极性溶剂中则较少。在不同科植物的对比中,乙酸乙酯相中忍冬科、大戟科、灯心草科、海金沙科、龙牛儿苗、苦苣苔科、漆树科、红豆杉科和虎耳草科植物抑制率较高;正丁醇相中山茱萸科、蔷薇科、旋花科、交让木科、桑科、忍冬科、胡桃科、荨麻科、大戟科、罂粟科、鳞始蕨科和壳斗科植物抑制率较高;石油醚相中柿树科、大戟科、罂粟科、茜草科、壳斗科、五加科、凤仙花科、樟科、石松科、天南星科、防己科和姜科的抑制率较高。表明这些科植物极有可能含有强抑制AChE活性的成分,对这些植物进行系统深入的化学成分研究,很有可能从中发现活性更强的有效成分,从而为防治早老性痴呆症的药物研究提供有价值的活性先导结构。这些植物的进一步的活性追踪、化学成分分离与结构鉴定工作仍在进行中。另外,在AChE抑制活性的研究中,我们发现,部分低浓度提取物对AChE活性不但没有抑制作用,反而有一定的增强作用,这种现象在海藻组分[12]和蕨类植物[13]中亦被观察到,本文的研究进一步证明了这种现象的存在。
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Primary study on the acetylcholinesterase inhibitory activity of different Plant Extracts
YIN Shuai-wen1,2*,LIU Li-ping1,WANG An-ping1,MAO Kai-jun1,XIONG Xin11School of Life Sciences.Jinggangshan University.Ji’an 343009,China;2Key Laboratory JZfor Biodiversity Science and Ecological Engineering.Ji’an 343009,China
To research of acetylcholinesterase(AChE)inhibitory activity of 63 plant extracts which collected from Jinggangshan.Jiangxi Province.model of AChE inhibitory activity were used.The results showed that under the concentration of 1 mg/mL the ethyl acetate soluble fractions of Sagittaria trifolia and Polygonum thunbergii had more than 90%inhibiting rates to AChE.However.under the concentration of 0.025 mg/mL.most of plants had low inhibition rate less than 30%.except 6 plants such as Duchesnea indica and Macleaya cordata et al.had more than 60%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 1 mg/mL the n-butyl alcohol soluble fractions isolated from ethanol extracts of 7 kinds of plants such as Glechoma longituba.Cuscuta chinensis and Sagittaria trifolia et al.had more than 80%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 0.025 mg/mL more than 22 kinds of plants Dendrobenthamia elegans etc.had more than 50%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 1 mg/mL the petroleum ether soluble fractions isolated from ethanol extracts of 8 kinds of plants such as Peucedanum violaceum.Macleaya cordata and Polygonum perfoliatum et al.had more than 90%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 0.025 mg/mL.More than 17 kinds of plants Peucedanum violaceum etc.had more than 50%inhibiting rates to AChE.On the contrary.some plant extracts even enhanced this enzyme.
Plants extracts;Acetylcholinesterase(AChE);Inhibitor;Activity evaluation
1001-6880(2012)10-1429-09
2012-02-22 接受日期:2012-04-19
国家自然科学基金项目(30760031);江西省自然科学基金项目(20114BAB204025);江西省生物学高水平学科项目
*通讯作者 E-mail:shwyin@126.com
R931.77
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