鸡禽流感免疫抗体消长规律观察与分析

陆 宇 陈 瑜 周 希

（1.江苏省无锡市惠山区钱桥街道畜牧兽医站，无锡 214000；2.江苏省无锡市惠山区畜牧兽医站，无锡 214000）

高致病性禽流感（HPAI）是当前世界范围内对养禽业及公共卫生威胁最大的A类烈性动物传染病。近几年来，该病在全球范围扩散蔓延，据报道已有60多个国家和地区发生疫情或分离到病毒。2004年以来，我国部分地区也出现了疫情，造成重大经济损失和社会影响。采取疫苗免疫是我国目前防控HPAI的主要措施之一。为了解雏鸡禽流感（AI）母源抗体和免疫鸡AI抗体产生的消长情况，合理制定有效免疫程序，提高免疫效果，我们于2011年5月起，选用禽流感H5N1（Re-4Re-5）灭活疫苗，对免疫鸡进行了HI抗体消长跟踪监测，现报告如下：

1 材料与方法

1.1 试验动物

在无锡惠山区某小型封闭养鸡场，选定300只1日龄苗鸡（种鸡经过禽流感疫苗免疫），在一独立鸡舍，分5个试验组，每组60只分隔饲养，饲料、日常管理不变。

1.2 标准试剂

均由青岛异邦生产。禽流感H5N1（Re-5）抗原，批号20110328；禽流感H5N1（Re-5）阳性血清，批号20110328；禽流感H5N1（Re-5）阴性血清，批号20110328；禽流感H5N1（Re-4）抗原，批号20110328；禽流感H5N1（Re-4）阳性血清，批号20110328；禽流感H5N1（Re-4）阴性血清，批号20110328。

1.3 疫苗

禽流感H5N1（Re-4Re-5）灭活疫苗，由青岛异邦生产，批号2010125。

1.4 母源抗体测定

分别于1、3、7、14、28日龄随机每次选苗鸡30只，心脏或翅静脉采血，分离血清备用。

1.5 疫苗2免后抗体产生情况及维持时间观察

根据一免后抗体的消长规律，确定2免时间，采用肌注进行2免，然后观察其抗体消长规律。

1.6 不同免疫剂量免疫效果试验

选取3个实验组，分别肌内注射禽流感H5N2疫苗0.3ml、0.5ml、0.7ml，然后分别于第3、7、14、21、28、56 d翅静脉采血进行血清抗体检测，观察其抗体产生消长情况。

1.7 HA和HI试验

按常规法在96孔110°的V型微量反应板上进行。

2 结果

2.1 鸡禽流感母源抗体消长情况

试验鸡禽流感母源抗体消长情况详见图1。

图1 禽流感母源抗体水平消长情况曲线图

2.2 禽流感H5N1（Re-4Re-5）灭活疫苗免疫后抗体消长情况

试验鸡只注射禽流感疫苗后抗全消长情况详见图2。

图2 禽流感免疫后抗体水平消长曲线图

2.3 不同免疫剂量免疫后抗体检测情况

对不同免疫剂量免疫后的抗体情况进行检测，结果详见表1。

表1 不同免疫剂量对H5 HI抗体的检测 （log2）

3 结论与讨论

（1）试验表明，苗鸡AI母源抗体在3日龄达到最高值，基本接近母体水平，随后迅速下降，7日龄接近母体的一半，14日龄时母源抗体大多在2Log2以下，28日龄基本检不到母源抗体，提示有较高母源抗的苗鸡应在14日龄左右首免比较好。

（2）从图2可看到，禽流感免疫抗体平均水平在首免后第18 d达到高峰5.3 log2，以后开始下降，第35 d回落到4 log2的保护临界值，而在一免后第3～4周进行加强免疫后，抗体水平能一直保持在保护值以上，且能维持相当长一段时间，免疫效果确实。因此，在不能通过免疫监测指导免疫的地区，为确保AI免疫质量，应在首免后3～4周再加强免疫1次，实施2次免疫。

（3）从表1可以看出，禽流感H5N1（Re-4Re-5）灭活疫苗剂量较大的试验组产生免疫抗体的速度和滴度都要高于剂量较少的组，通过对不同时期部分鸡的剖检也未发现因免疫剂量加大而发生肉眼可见的吸收障碍。因此，我们可推广应用在平常免疫时使用推荐剂量，而在紧急免疫时使用加大剂量的免疫方法。