超临界二氧化碳流体萃取三叶青藤挥发油成分分析

黎颖君 宋伟峰

1.广东省中医院药学部，广东广州 510120；2.中山大学附属第三医院药剂科，广东广州 510630

超临界二氧化碳流体萃取三叶青藤挥发油成分分析

黎颖君1宋伟峰2

1.广东省中医院药学部，广东广州 510120；2.中山大学附属第三医院药剂科，广东广州 510630

目的 采用GC-MS法分析三叶青藤挥发油成分，为其质量评价提供科学依据。方法 采用二氧化碳超临界萃取法（SFE-CO2）萃取并分离三叶青藤药材中的挥发油，所提取得到的挥发油运用GC-MS进行分析，用面积归一化法确定其相对含量。结果从三叶青藤药材中提取的挥发油经GC-MS分析，共检测到84个色谱峰，通过NIST库检索一共鉴定出39个化合物的具体结构，占所提取的三叶青藤挥发油总量的56.47%（g/g），其中棕榈酸、十三烷酸、芳樟醇等在该药材挥发油中占的比例较高。 结论 该方法提取条件优良，初步揭示了该药材挥发性成分，对进一步研究其化学成分打下基础，为药材的质量评价提供科学参考。

三叶青藤；二氧化碳超临界萃取法；挥发油；气相色谱-质谱联用法

三叶青藤是青藤科（或莲叶桐科）植物红花青藤（Illigera rhodantha Hance）的地上部分，具有祛风散瘀、消肿止痛的功效，该药材广泛应用于跌打肿痛、风湿性关节炎、小儿麻痹后遗症等疾病的治疗[1]。然而，临床上使用三叶青藤药材时出现了一些在植物形态上有些相似的混淆品，从外观上较难区别，可采用现代的化学理论方法来鉴别其真伪。药材中挥发性成分常见的提取方法是采用传统的水蒸气蒸馏法（steam distillation，SD），该法具有提取效率高、操作简便等优点，然而其提取温度较高，一些遇热不稳定的化学成分可能会发生结构的改变，引起挥发油的变质[2-6]。课题组已经采用水蒸汽蒸馏法来提取三叶青藤挥发油并进行GC-MS分析[7]。本文旨在比较三叶青藤药材经过二氧化碳超临界萃取法（SFE-CO2）及SD法提取后挥发油成分的区别，为进一步评价三叶青藤的质量提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器

HA221-50-06型超临界二氧化碳提取设备（江苏南通华安超临界萃取有限公司）；Agilent6890/5973气相-质谱联用仪（NIST 谱库，2008年版）。

1.2 试药

三叶青藤（采自广西南宁市，经鉴定为青藤科植物红花青藤Illigera rhodantha Hance的地上部分），无水乙醚（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），无水硫酸钠（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），二氧化碳（纯度99.99%）。

2 方法与结果

2.1 二氧化碳超临界萃取三叶青藤挥发油

取三叶青藤鲜药材，置阴凉处晾干，粉碎，过筛，取能过20目筛且不能过40目筛的药材粗粉100 g，置超临界流体萃取仪提取（萃取压力为30 mPa，分离压力5 mPa，分离温度45℃，萃取时间为120 min），得到淡黄色油状的提取物。

2.2 GC-MS测定条件

2.2.1 GC条件 毛细管色谱柱 （HP-5MS，30 m×0.25 μm×0.25μm）；进样量1.0μL，分流比40∶1，N2为载气，流速为1.0mL/min；柱初始温度为70℃，以12℃/min的速率上升至170℃，保持3 min，再以 10℃/min的速率上升至 220℃，保持 3 min，再以12℃/min的速率上升至280℃，保持3 min[7]。

2.2.2 MS条件 电离方式EI，电子能量70 eV，离子源温度230℃，扫描质量范围 40～550 amu[7]。

2.3挥发油成分分析结果

取三叶青藤挥发油，照“2.2”项下注入GC-MS色谱仪，记录色谱图及质谱图，并通过NIST谱库（2008年版）检索、对照和解析。结果经GC分离得到84个离子峰，并鉴定了39个化合物的结构，已确定具体结构的化合物总量占挥发油总量的 56.47%（g/g）。 见表 1、图 1。

表1 SFE-CO2提取三叶青藤挥发油的GC-MS分析结果

3 讨论

3.1 GC-MS能有效分析鉴定挥发油成分

从三叶青藤药材中用SFE－CO2提取的挥发油经GC-MS分析，共检测到84个色谱峰，通过NIST库检索一共鉴定出39个化合物的具体结构，占所提取的三叶青藤挥发油总量的56.47%（g/g），其中棕榈酸、十三烷酸、芳樟醇等在该药材挥发油中占的比例较高。

3.2 SFE-CO2与SD法提取的效果有显著差别

和SD提取三叶青藤药材中挥发油[7]相比，两种样品中主要成分和水蒸气蒸馏法提取相似，比如说棕榈酸、芳樟醇等，但含量高低有差别；SFE-CO2提取出的挥发油成分比较多，可能是二氧化碳流体对挥发油有比较好的溶解能力；SFECO2提取的挥发性成分多为萜类的含氧衍生物、烷烃类以及一些极性较小的有机酸类等，萜类的含氧衍生物往往具有比较广泛的药理作用，这些化学成分将为以后研究该药材的物质基础提供参考。

本文采用SFE-CO2法提取三叶青藤药材中的挥发油，该法提取条件比较温和，临界温度接近室温，一些遇热不稳定的成分不会被破坏，更为真实地反映了该植物的挥发性成分。

[1]广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准（1990年版）[M].南宁：广西科学技术出版社，1992：101.

[2]符继红，张丽静.新疆维吾尔医用药材神香草挥发油的GC-MS分析[J].中成药，2008，30（3）：413-414.

[3]付先龙，林颖，庄平，等.美容杜鹃叶挥发油化学成分的气相色谱-质谱联用分析[J].时珍国医国药，2008，19（4）：931-933.

[4]郑良，朱华勇，沈慧，等.GC-MS分析山东野花椒果皮中挥发油的化学成分[J].华西药学杂志，2009，24（4）：386-388.

[5]王建，赵应学.广西莪术种内变异类型中不同颜色挥发油化学成分分析[J].中草药，2009，40（11）：1726-1727.

[6]林朝展，柴玲，祝晨蔯，等.枇杷叶紫珠叶挥发油化学成分的研究[J].时珍国医国药，2010，21（9）：2275-2277.

[7]刘兰军，宋伟峰.三叶青藤挥发油成分的GC-MS分析[J].临床医学工程，2011，18（12）：1857-1858.

GC-MS analysis of the essential oils extracted by SFE-CO2from Illigera rhodantha Hance

LI Yingjun1SONG Weifeng2
1.Department of Pharmacy,Guangdong Hospital of Traditional Chinese Medicine,Guangdong Province,Guangzhou 510120,China;2.Department of Pharmacy,the Affiliated Third Hospital of Sun Yat-sen University,Guangdong Province,Guangzhou 510630,China

ObjectiveTo analyze the constituents of the essential oils from Illigera rhodantha Hance by GC-MS,and provide the scientific basis for quality control.MethodsThe essential oils were extracted by SFE-CO2,analyzed and identified by GC-MS.The components were calculated with normalization method.Results84 peaks were extracted and detected,among which 39 compounds had been identified,which made up 56.47% (g/g)of the total essential oils.The main chemical composition were n-Hexadecanoic acid,Tridecanoic acid,Linalool and so on.ConclusionThe extraction method is excellent,the first time to reveal the essential oils from Illigera rhodantha Hance,for further research its chemical composition to lay the foundation,and provide the scientific basis for quality control.

Illigera rhodantha Hance;SFE-CO2;Essential oil;GC-MS

R284.2

A

1673-7210（2012）08（a）-0026-02

黎颖君（1983.8-），女，本科，中药师；研究方向：医院药学（中药鉴定研究）。

宋伟峰（1972.4-），男，本科；研究方向：医院药学。

2012-03-06 本文编辑：卫 轲）